二甲雙胍對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2增殖及REDD1、cyclinD1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:探討二甲雙胍作用于人肝癌 HepG2細(xì)胞后,對(duì)人肝癌細(xì)胞 HepG2增殖以及對(duì)REDD1、cyclinD1表達(dá)變化的影響。
　　方法:以不同濃度(0.0、2.5、5.0、10.0mmol/L)二甲雙胍處理 HepG2細(xì)胞,即實(shí)驗(yàn)按上述不同二甲雙胍濃度共分四組。分別用四甲基偶氮唑鹽酶反應(yīng)比色法(MTT)和流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖活性和細(xì)胞周期變化。并用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)細(xì)胞中 REDD1、cyclin

2、D1基因 mRNA的表達(dá)量,用蛋白印跡法(western blot)檢測(cè)細(xì)胞中REDD1、cyclinD1基因的蛋白的表達(dá)量。
　　結(jié)果:二甲雙胍作用細(xì)胞48小時(shí)后,與對(duì)照組相比,二甲雙胍處理組的HepG2細(xì)胞增殖均明顯受到抑制(P<0.05);G1期細(xì)胞比例與對(duì)照組比較均明顯增加(P<0.05);RT-PCR檢測(cè)顯示各二甲雙胍處理組REDD1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量均明顯高于對(duì)照組(P<0.01),cyclinD1 mRNA的相對(duì)

3、表達(dá)量均明顯低于對(duì)照組(P<0.05);western-blot檢測(cè)顯示二甲雙胍處理組 REDD1蛋白相對(duì)表達(dá)量與對(duì)照組比較明顯升高(P<0.01),cyclinD1蛋白相對(duì)表達(dá)量與對(duì)照組比較明顯下降(P<0.01)。
　　結(jié)論:二甲雙胍可抑制 HepG2細(xì)胞的增殖活性,誘導(dǎo) HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)周期阻滯于G1期,并上調(diào)HepG2細(xì)胞 REDD1基因 mRNA和蛋白的表達(dá),抑制cyclinD1基因mRNA和蛋白的表達(dá),呈濃度依賴性。