小鼠著床前胚胎miR-125a,miR-295和miR-181b表達的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、微小RNA是一類單鏈非編碼RNA,大約20-25個核苷酸的長度,在線蟲到人類的真核生物中廣泛存在。miRNA具有高度的保守性、組織特異性和時序性;生成miRNA的基因并不是隨機分布的,從同一個前體RNA加工而來的共表達miRNA存在基因簇集現(xiàn)象。成熟的miRNA通過其5’端的5-8個核苷酸,識別并與目標特異性基因進行不完全互補配對或者完全互補配對,引起目標特異性基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的降解或者誘導(dǎo)翻譯抑制,從而來調(diào)控目的基因的表達。miRNA通

2、過上述的作用原理在基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮著重要的作用,并且還在對生物體的個體發(fā)育、細胞增值、凋亡、分化以及腫瘤的發(fā)生等許多方面的研究上具有重要的意義。本課題開展miRNA-125a、miRNA-295、miRNA-181b在小鼠著床前胚胎表達的研究,分析miRNA在著床前胚胎生長發(fā)育、細胞分化等方面可能起到的作用。
　　目的:建立小鼠的超排、交配和胚胎收集系統(tǒng),研究miRNA-125a、miRNA-295、miRNA-181b在小鼠著

3、床前胚胎的表達,探討miRNA在著床前胚胎發(fā)育和細胞分化中的作用和意義。
　　方法:采用miRNA特異RT引物進行反轉(zhuǎn)錄,采用SYBR Green實時定量PCR技術(shù),研究miR-125a、miR-295和miR-181b在小鼠著床前胚胎發(fā)育過程中表達水平的變化。
　　結(jié)果:著床前胚胎發(fā)育的各階段均表達miR-125a、miR-295和miR-181b;隨著胚胎的發(fā)育,miR-295的表達呈逐漸上升的趨勢;miR-125a在卵

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