氫氣對(duì)大鼠全腦I-R損傷海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的保護(hù)作用.pdf

1、目的：探討吸入高濃度氫氣對(duì)大鼠全腦缺血/再灌注（I/R）損傷海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　方法：雄性SD大鼠120只，體重為(280±20)g,采用四血管阻斷法（4-VO）建立全腦 I/R損傷模型。隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為3組，即假手術(shù)組（SH組，n=30），模型組（4-VO組）（再灌注同時(shí)吸入67％N2，33%O2，n=45），治療組（4-VO+H2組）（再灌注同時(shí)吸入67%H2，33%O2，n=45）。檢測(cè)各組再灌注

2、72 h，9 d海馬CA1區(qū)錐形神經(jīng)元尼氏染色、免疫組織化學(xué)神經(jīng)元特異性核蛋白抗體（NeuN）、小膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白抗體（Iba1）染色計(jì)數(shù)，以及免疫熒光雙標(biāo) NeuN與Iba1觀察神經(jīng)元與小膠質(zhì)細(xì)胞的位置關(guān)系；同時(shí)在再灌注9 d時(shí)采用水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶功能以及高爾基染色檢測(cè)各組錐形神經(jīng)元樹突棘數(shù)量。
　　結(jié)果：與4-VO組相比，4-VO+H2組在再灌注72 h及9 d海馬CA1區(qū)神經(jīng)元形態(tài)更接近正常，神經(jīng)元存活數(shù)量明顯增

3、多（P＜0.05）；免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示4-VO+H2組神經(jīng)元存活數(shù)量明顯高于4-VO組（P＜0.05），4-VO組小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量明顯高于4-VO+H2組（P＜0.05）。水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，4-VO+H2組第四象限游泳時(shí)間明顯長(zhǎng)于4-VO組（P＜0.05），高爾基染色顯示，4-VO+H2組可顯著提高樹突分支復(fù)雜性及海馬 CA1區(qū)錐形細(xì)胞樹突棘數(shù)量；高倍油鏡下觀察，樹突棘數(shù)量4-VO+H2組明顯多于4-VO組（P＜0.01）。