β-淀粉樣肽引起大鼠海馬CA1、CA3區(qū)神經(jīng)元損傷及其機制的研究.pdf

1、目的:關于阿爾茨海默病(AD)分子機制的研究成為腦科學研究中的一個熱點。研究工作者也提出了很多假說，在諸多假說中β-淀粉樣肽(Aβ)假說已被廣泛認可。本實驗在整體動物上研究Aβ作用后P38MAPKs的活化、調(diào)節(jié)及其與Aβ神經(jīng)毒性的關系，為深入理解AD的發(fā)病機制提供新的理論依據(jù)，為AD的治療提供新的藥物作用靶點。 方法:成年雄性SD大鼠，清潔級，側腦室注射寡聚化Aβ25-35(Aβ)；蘇木素伊紅(HE)染色方法檢測神經(jīng)元存活情況；

2、免疫組化方法檢測星形膠質(zhì)細胞特異性蛋白-膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)的表達，以觀察星形膠質(zhì)細胞的活化狀態(tài)；抗磷酸化P38MAPKs抗體免疫印跡(IB)、免疫組化(IH)方法檢測P38MAPKs的活化；抗P38MAPKs抗體IB方法檢測P38MAPKs的表達。 結果: 1、HE染色結果顯示，Aβ作用21天后，大鼠海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)神經(jīng)元與sham組相比有明顯減少；IH結果顯示，Ap組海馬CAl區(qū)和CA3區(qū)GFAP表達

3、明顯增加。 2、IB顯示，Aβ作用3天至21天后，海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)P38MAPKs磷酸化水平與sham組相比有顯著升高，在第7天其升高為一峰值，而P38MAPKs蛋白表達量無顯著變化。 3、IB、IH顯示，P38MAPKs的抑制劑SB239063(SB)抑制P38MAPKs磷酸化水平的升高；HE染色結果顯示，SB抑制Aβ誘導的CA1區(qū)和CA3區(qū)神經(jīng)元的丟失；IH結果顯示，SB抑制Aβ誘導的海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)GF

4、AP表達的增加。 4、NMDA受體的拮抗劑Amantadine(Aman)、NMDA受體亞基NR2A、NR2B拮抗劑NVP-AAM077(NVP)和R025-6981(Ro)、非NMDA受體拮抗劑CNQX均可顯著抑制P38MAPKs磷酸化水平的升高。 5、Aman、NVP、Ro和CNQX抑制了Aβ誘導的大鼠海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)神經(jīng)元的丟失。 結論: 1、Aβ誘導大鼠海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)神經(jīng)元的丟失、星