安神定志靈調控ADHD模型動物多巴胺D1-D2受體信號通路及脫敏-復敏的機制研究.pdf

1、第一部分中醫(yī)藥治療ADHD實驗研究進展及規(guī)范化探討
　　目的:通過檢索相關文獻，對中醫(yī)藥治療ADHD實驗方法進行總結，結合國外的最新研究，對實驗中存在的問題進行分析、討論，并提出相對合理的解決方案。希望通過此途徑規(guī)范中醫(yī)藥治療ADHD實驗研究，使中醫(yī)藥探討ADHD實驗結果能更加被國際社會認同。
　　方法:中文檢索中國知網(wǎng)(CNKI)、維普中文期刊數(shù)據(jù)庫(VIP)和萬方數(shù)據(jù)庫;英文檢索Pubmed等數(shù)據(jù)庫，檢索時間為建庫至20

2、17年3月，中文檢索主題詞為“注意缺陷多動障礙”或“注意缺陷”或“ADHD”或“輕微腦功能障礙”，“大鼠”或“小鼠”或“實驗”或“動物”，“中醫(yī)”;英文檢索詞為“ADHD”or“hyperactivity”or“attention deficit” or“minimal brain dysfunction”,“Chinese medicine”,“rats” or“mouse”or“experiment”，搜索國內中醫(yī)藥學者發(fā)表的相關論

3、文。
　　結果:通過檢索、篩選、去重等過程，本研究共納入中醫(yī)藥治療ADHD實驗相關文章44篇，另有博士論文4篇，碩士論文6篇，外文期刊未見相關文章。文獻報道了中醫(yī)藥及針灸治療ADHD動物模型行為學實驗及作用機制的相關研究，通過瀏覽文獻，我們發(fā)現(xiàn)這些報道在實驗的設計、研究方法上存在不足。
　　結論:盡管國內中醫(yī)藥治療ADHD實驗文章存在一些問題，但仍然為中醫(yī)藥探索治療ADHD的作用機制奠定了一些基礎。從文章內容來看，實驗的動物

4、模型、檢測方法、檢測內容、檢測儀器越來越與國際接軌。在后期的相關研究中，我們需要進一步嚴謹?shù)剡M行實驗設計并規(guī)范化操作，提高中醫(yī)藥治療ADHD的國際認可度。
　　第二部分安神定志靈調控ADHD模型動物多巴胺D1/D2受體信號通路及脫敏/復敏的機制研究
　　目的:研究安神定志靈對注意缺陷多動障礙動物模型自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneouslyhypertensive rat，SHR)前額葉和紋狀體中多巴胺D1/D2受體信號通

5、路及受體脫敏/復敏相關因子的影響，探討安神定志靈治療注意缺陷多動障礙的作用機制。
　　方法:將50只SHR大鼠運用隨機區(qū)組設計分為模型組、利他林組（2 mg·kg-1）、安神定志靈低劑量組、中劑量組、高劑量組(6.7、13.4、26.7 g·kg-1)，每組10只，另將Wistar京都大鼠(Wistar Kyoto rat，WKY)設為正常組。每日灌胃2次，治療4周后取大鼠腦組織。分別用酶聯(lián)免疫吸附法、蛋白質印跡法、免疫組織化學法

6、及實時定量熒光PCR檢測各組大鼠前額葉和紋狀體中Gαs、Golf、 Gαi、AC、cAMP、CDK5、p35、DARPP32、PP1、 CREB、Akt、GSK-3β、β-catenin、PKA、GRK-6、β-arrestin2、NCS-1、PP2A和 PSD-95的表達水平。結果:(1)安神定志靈可以上調前額葉皮質和紋狀體中Gαs、Gαolf和Gαi蛋白和mRNA的表達水平。(2)安神定志靈可升高SHR大鼠前額葉及紋狀體多巴胺受體下

7、游信號通路中AC、cAMP的含有量，且增加程度與中藥劑量相關。(3)安神定志靈可以上調SHR大鼠前額葉及紋狀體中p35、CDK5及CREB蛋白和mRNA的表達水平，下調PP1和DARPP32的表達水平。(4)安神定志靈可以降低（或有降低趨勢）GSK-3β的相關表達，增加（或有增加趨勢）PP2A、Akt和β-catenin相關表達。(5)安神定志靈可以提高β-arrestin2、NCS-1、PSD-95、PP2A、PKA表達的同時能降低G

8、RK-6的表達。(6)柴胡皂苷A能夠增加SHR大鼠前額葉DA的含有量，減少SHR大鼠的自發(fā)性活動，并且增加其對空間記憶、學習的能力，并且能夠降低DAT的相關表達，提高BDNF的相關表達。
　　結論:(1)安神定志靈可以上調前額葉皮質和紋狀體中Gαs、Gαolf和Gαi的相關表達，進而影響多巴胺受體下游的信號通路，提高AC、cAMP的表達水平，升高PKA進一步影響核內基因的表達;與此同時，安神定志靈能夠上調SHR大鼠前額葉及紋狀體中

9、CDK5、p35的相關表達，從而抑制及PP1和DARPP32的表達水平，提高CREB表達水平影響細胞核內基因的轉錄。
　　(2)安神定志靈可以通過骨架蛋白β-arrestin2對SHR大鼠非G蛋白介導多巴胺的信號通路產生影響。通過降低GSK-3β的相關表達，增加PP2A、Akt和β-catenin相關表達，從而有效地將胞外信號傳至胞內，影響細胞核內靶基因的表達從而達到治療目的。
　　(3)安神定志靈可以對多巴胺受體脫敏/復敏

10、相關指標產生影響，通過提高β-arrestin2、NCS-1、PSD-95、PP2A、PKA的相關表達，降低GRK-6的相關表達從而減少多巴胺受體脫敏的發(fā)生，保持多巴胺受體的數(shù)量和活性，保證其與DA的結合并發(fā)揮相應的生物效應。
　　(4)柴胡皂苷A具有改善SHR大鼠自發(fā)性活動的作用，其潛在的作用機制在于降低DAT的相關表達，保持DA的濃度，并增加BDNF的相關表達。
　　附篇基于270例臨床研究探討兒童多動癥中醫(yī)證型分布及演

11、變規(guī)律
　　第三部分目的:基于270例臨床病例探索兒童多動癥的中醫(yī)證型分布特點及治療過程中的證型變化，為辨證治療兒童多動癥提供依據(jù)。
　　方法:觀察全國9家單位收集的270例多動癥患兒的證型變化，運用SPSS22.0進行分析，總結兒童多動癥中醫(yī)證型的分布及變化特點。
　　結果:270例患兒中，初診時以心肝火旺證居多，占40.4％，治療后期以肝腎陰虛證多見，占47.8％?！毒裾系K診斷與統(tǒng)計手冊》第5版(DSM-V)西醫(yī)