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文檔簡介
1、目的:通過監(jiān)測血清GnRH、LH、T及垂體組織LHβmRNA、LHβprotein在低血糖應激后的動態(tài)變化,探討低血糖應激(acute hypoglycemia stress)對大鼠下丘腦-垂體-性腺軸(HPG)的影響。
方法:42只8周齡雄性Sprague Dawley大鼠,體重280-320g,隨機分為0分鐘組(只進行置管而不給予低血糖應激,即為對照組)、15分鐘組、30分鐘組、60分鐘組、90分鐘組。實驗大鼠均于麻醉狀態(tài)
2、下行頸動靜脈插管術,鉗夾試驗于插管術后16-24小時內進行,對照組不行鉗夾試驗直接進行標本采集,實驗組通過鉗夾試驗建立低血糖動物模型(血糖2.2~2.8mmol/L),分別于低血糖持續(xù)15分鐘、30分鐘、60分鐘、90分鐘后行心臟采血,采血后立即斷頭,迅速分離并取出垂體。采用ELISA法測定各組大鼠血清GnRH、LH、T水平,實時熒光定量PCR法分析各組大鼠垂體組織LHβmRNA表達水平,Western Blot法分析各組大鼠垂體組織L
3、Hβprotein的表達。應用SPSS22.0軟件處理和分析數(shù)據(jù),實驗數(shù)據(jù)以(X)±SD表示,使用單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
結果:1、低血糖應激各組間血清GnRH水平無統(tǒng)計學差異。2、低血糖應激15分鐘后血清LH升高并達到高峰,較0分鐘組有顯著差異(p<0.05);60分鐘組血清LH較15分鐘組、30分鐘組均顯著降低(p<0.05),較0分鐘組輕度升高(無統(tǒng)計學差異);90分鐘組血清LH進一步下降,較0
4、分鐘組明顯降低(p<0.05)。3、低血糖應激15分鐘后血清T升高并達到高峰,較0分鐘組有顯著差異(p<0.05);30分鐘組血清T較15分鐘組輕度降低(無統(tǒng)計學差異),較0分鐘組顯著升高(p<0.05);90分鐘組血清T進一步下降,較15分鐘組、30分鐘組顯著降低(p<0.05),但基本恢復基線水平。4、低血糖應激15分鐘后垂體LHβmRNA表達水平升高并達到高峰,較0分鐘組有顯著差異(p<0.05);60分鐘組LHβmRNA表達水平
5、較15分鐘組、30分鐘組均顯著降低(p<0.05),較0分鐘組輕度降低(無統(tǒng)計學差異);90分鐘組LHβmRNA表達水平較15分鐘顯著降低(p<0.05),但基本恢復基線水平(無統(tǒng)計學差異)。5.垂體LHβprotein變化與垂體LHβmRNA變化基本一致。
結論:1、低血糖應激能影響大鼠HPG軸。2、低血糖應激對血中GnRH水平無明顯影響。3、低血糖應激可引起大鼠血清LH水平先上升后下降。4、低血糖應激可引起大鼠血清T水平先
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