色譜法分離澤瀉降血糖活性成分的研究.pdf

1、作為最常用的中藥之一,澤瀉具有多種生物活性。本文以江西產(chǎn)澤瀉為對象,研究了其降血糖活性成分,并對澤瀉梗進(jìn)行了初步研究。本文的主要工作和結(jié)果如下:
　　1.采用國標(biāo)方法測定澤瀉梗的營養(yǎng)成分,用化學(xué)比分法和氨基酸比值系數(shù)法對其蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值進(jìn)行評價(jià),此外,還對其粗提物抑制α-葡萄糖苷酶的活性進(jìn)行了測定。結(jié)果表明:澤瀉梗(每100g干樣)含粗蛋白26.10 g、粗脂肪2.20 g、總膳食纖維27.56 g、灰分8.70 g、多糖4.2

2、2 g、還原糖4.87 g、維生素C406.30 mg、胡蘿卜素380.00μg。澤瀉梗蛋白質(zhì)組成中必需氨基酸/總氨基酸(EAA/TAA)為39.54％、必需氨基酸/非必需氨基酸(EAA/NEAA)為60.46%,鮮味氨基酸占總氨基酸含量的40%以上;其第一限制性氨基酸為含硫氨基酸(蛋氨酸和胱氨酸)。濃度為500μg/mL的澤瀉梗水提醇沉物、澤瀉梗醇提物的α-葡萄糖苷酶抑制率分別為43.75%、39.90%。
　　2.運(yùn)用常壓硅膠

3、柱層析、中壓制備柱和薄層層析等多種方法對澤瀉正丁醇萃取組分進(jìn)行純化,首次從澤瀉中分離得到了腺嘌呤和丁二酸,并得到了實(shí)驗(yàn)室前期工作中也得到的尿嘧啶;其中,尿嘧啶和腺嘌呤在澤瀉正丁醇萃取組分的不同洗脫液中均有發(fā)現(xiàn)。
　　3.應(yīng)用α-葡萄糖苷酶和豬胰腺α-淀粉酶活性的抑制實(shí)驗(yàn),考察了澤瀉提取物和單體物質(zhì)組合的降血糖活性。經(jīng)實(shí)驗(yàn)得出,丁二酸、腺嘌呤、Fr3.7具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性和較低的α-淀粉酶活性;尿嘧啶+胸苷、鳥苷+胸苷

4、、丁二酸+腺嘌呤間組合具有較高的α-葡萄糖苷酶抑制活性、而α-淀粉酶抑制活性較低。
　　4.利用Lineweaver-Burk直線和Dixon圖,研究了腺嘌呤和丁二酸的α-葡萄糖苷酶抑制作用類型。結(jié)果表明,腺嘌呤、丁二酸為在α-葡萄糖苷酶抑制實(shí)驗(yàn)的最佳反應(yīng)時(shí)間為10min、最佳添加體積為10μL、15μL;腺嘌呤、丁二酸對α-葡萄糖苷酶的抑制類型均為混合型,隨著腺嘌呤、丁二酸濃度的增加,α-葡萄糖苷酶與底物的親和力均升高,但α-葡