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1、目的:觀察1,8-桉葉素對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠的治療作用,探討背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)P2X3受體在其中的作用及機(jī)理。
方法:1、建立坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷(CCI)神經(jīng)病理痛大鼠模型。2、將所有大鼠無(wú)規(guī)則劃分五組:假手術(shù)組(Sham)、慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎損傷組(CCI)、二甲亞砜對(duì)照組(CCI+DMSO)、低劑量1,8-桉葉素治療組(CCI+50mg/kg)、高劑量1,8-桉葉素治療組(CCI+100mg/kg)。3、在實(shí)驗(yàn)大鼠手術(shù)后第7天
2、和第14天都分別檢測(cè)其機(jī)械縮足反射閾值(MWT)和熱縮足反射潛伏期(TWL)。4、在實(shí)驗(yàn)大鼠手術(shù)后第7天和第14天,取各組大鼠L4-5背根神經(jīng)節(jié)使用原位雜交技術(shù)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)技術(shù)檢測(cè)P2X3受體mRNA水平的變化。5、使用免疫組織化學(xué)染色法和蛋白印跡法(Western-Blot)于實(shí)驗(yàn)大鼠手術(shù)后第7天和第14天分別檢測(cè)L4-5背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體蛋白的表達(dá)變化。
結(jié)果:1、術(shù)后第7d和14d CCI組
3、大鼠MWT和TWL明顯低于Sham組(P<0.05);CCI+50mg/kg組和CCI+100mg/kg組較CCI組MWT、TWL均明顯升高( P<0.05);CCI+DMSO組與CCI組比較無(wú)明顯差異( P>0.05);而CCI+100mg/kg組較CCI+50mg/kg組MWT、TWL升高更明顯(P<0.05);2、術(shù)后第7d和14d L4-5背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體mRNA原位雜交及qRT-PCR結(jié)果表明:CCI組明顯高于Sham組
4、(P<0.05);CCI+50mg/kg組和CCI+100mg/kg組較CCI組均明顯降低(P<0.05);CCI+DMSO組與CCI組比較無(wú)明顯差異(P>0.05);其中CCI+100mg/kg組較CCI+50mg/kg組更低(P<0.05);3、術(shù)后第7d和14d L4-5背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體蛋白的免疫組化和蛋白印跡結(jié)果表明:CCI組明顯高于Sham組(P<0.05);CCI+50mg/kg組和CCI+100mg/kg組較CCI組
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