背根神經(jīng)節(jié)中介素及其受體在CCI大鼠神經(jīng)病理痛中的作用研究.pdf

1、目的:研究背根神經(jīng)節(jié)中介素及其受體在坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷(Chronicconstriction injure，CCI)大鼠神經(jīng)病理痛中的作用及影響。
　　方法:采用CCI神經(jīng)病理痛大鼠模型，成年健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為五組:空白對(duì)照組（Control），假手術(shù)對(duì)照組(Sham)，神經(jīng)病理痛模型+生理鹽水組(CCI+NS)，CCI模型+中介素(IMD1-53)處理組(CCI+IMD1-53)，CC

2、I模型+中介素抑制劑(IMD14-47)處理組(CCI+ IMD14-47)五組。應(yīng)用Von Frey細(xì)絲法測(cè)定機(jī)械痛敏閾值(mechanical withdrawal threshold，MWT)，同時(shí)采用全自動(dòng)熱痛刺激儀測(cè)定各組大鼠的熱縮足反射潛伏期(thermalwithdrawal latency，TWL)，觀察中介素(IMD1-53)和中介素抑制劑(IMD14-47)對(duì)坐骨神經(jīng)痛大鼠機(jī)械痛敏閾值和熱痛閾值的影響，并應(yīng)用免疫組化

3、，免疫熒光，蛋白印跡，RT-PCR，免疫共沉淀等方法觀察各組大鼠L4/L5背根神經(jīng)節(jié)中P2X3受體和中介素及其受體的表達(dá)變化，以及蛋白印跡檢測(cè)各組大鼠DRG中p38和ERK1/2的磷酸化程度。
　　結(jié)果:CCI術(shù)后14天，CCI+NS組、CCI+ IMD14-47組和CCI+ IMD1-53組大鼠手術(shù)側(cè)后肢的MWT和TWL明顯低于Control和Sham組，且有顯著性意義(p＜0.01)，顯示CCI造模成功。鞘內(nèi)置管給藥處理后7天

4、，CCI+NS組、CCI+ IMD1-53組大鼠手術(shù)側(cè)仍維持明顯的機(jī)械痛敏和熱敏痛，而CCI+IMD14-47組大鼠手術(shù)側(cè)MWT和TWL明顯升高，機(jī)械痛敏和熱痛敏有所緩解。同時(shí)免疫組化，免疫熒光，蛋白印跡，RT-PCR結(jié)果表明:和Control、Sham組相比較，CCI+NS組、CCI+ IMD1-53組L4/L5背根神經(jīng)節(jié)中P2X3受體和中介素及其受體的表達(dá)明顯升高，CCI+ IMD1-53組升高更為顯著;應(yīng)用中介素抑制劑IMD14-

5、47后，L4/L5背根神經(jīng)節(jié)中P2X3受體和中介素及其受體的表達(dá)出現(xiàn)明顯下降(P＜0.05);免疫熒光結(jié)果表明IMD和P2X3受體在DRG神經(jīng)元上存在共表達(dá)。此外，免疫共沉淀結(jié)果表明IMD和P2X3受體存在相互關(guān)系。蛋白印跡結(jié)果還表明CCI+NS和CCI+IMD1-53組大鼠L4/L5背根神經(jīng)節(jié)p38和ERK1/2的磷酸化程度明顯高于Control組、Sham組(p＜0.05)，而CCI+ IMD14-47組背根神經(jīng)節(jié)p38和ERK1/