葉酸偶聯(lián)的納米鉆石靶向制劑的合成及體外實驗.pdf

1、在過去的幾十年中，隨著癌癥發(fā)病率的升高，惡性腫瘤已成為威脅人類健康的第二大殺手。而目前臨床上廣泛使用的傳統(tǒng)抗癌藥物治療效果差，且毒副作用較大。因此，尋找一種高效低毒的靶向藥物體系來治療癌癥是一個亟待解決的世界性難題。納米鉆石(ND)，作為一種新型碳納米材料，因其尺寸小，比表面積大，易于修飾，吸附能力高及生物相容性好等特點，被廣泛用作藥物載體。
　　本論文以ND為基礎(chǔ)材料，甲氨蝶呤（MTX）和阿霉素（DOX）為模型藥物，葉酸(FA)

2、作為靶向配體，成功合成了納米鉆石-聚乙二醇-葉酸/縮水甘油-甲氨蝶呤（ND-PEG-FA/GLY-MTX）和納米鉆石-聚乙二醇-葉酸/阿霉素（ND-PEG-FA/DOX）兩種新型的靶向藥物輸送體系，并就它們與細胞的生物效應(yīng)進行了系統(tǒng)的研究。主要工作分為以下三個部分：
　　1.以ND為基礎(chǔ)材料，將聚乙二醇（NH2-PEG-NH2）、葉酸（FA）及縮水甘油（GLY）通過化學(xué)鍵逐步連接到納米鉆石表面制得ND-PEG-FA/GLY納米載體

3、，MTX通過酯鍵負(fù)載到納米載體表面，成功合成了一種新型的納米藥物體系ND-PEG-FA/GLY-MTX,通過紫外分光光度計測定 MTX在納米載體ND-PEG-FA/GLY的偶聯(lián)量為123μg/mg。利用傅里葉變換紅外光譜儀（FTIR）及透射電鏡(TEM)對目標(biāo)產(chǎn)物進行了表征，結(jié)果表明目標(biāo)產(chǎn)物成功制得。由體外釋藥實驗可知，ND-PEG-FA/GLY-MTX納米藥物體系能夠在正常組織中保持很好的穩(wěn)定性，在腫瘤環(huán)境中釋放大量游離MTX。

4、>　　2.通過激光共聚焦及流式細胞術(shù)探究了 ND-PEG-FA/GLY-MTX納米藥物體系與人乳腺癌細胞（MCF-7）和小鼠海馬神經(jīng)元細胞（HT22）的生物效應(yīng)。由流式細胞術(shù)結(jié)果可知，細胞攝取ND-PEG-FA/GLY-MTX納米顆粒具有能量和溫度依賴性，并以網(wǎng)格蛋白和小窩蛋白依賴的受體介導(dǎo)及葉酸受體介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑進入細胞，且其進入細胞的量與細胞表面的受體表達量有關(guān)。流式細胞術(shù)結(jié)果還表明ND-PEG-GLY納米載體與 ND-PEG-FA

5、/GLY納米載體均有良好的生物相容性， ND-PEG-FA/GLY-MTX納米藥物的對癌細胞的殺傷力大于游離 MTX及ND-PEG-GLY-MTX納米藥物，且主要作用于細胞周期的G2期。激光共聚焦結(jié)果顯示，ND-PEG-FA/GLY-MTX納米藥物主要存在于細胞質(zhì)中,并且進入細胞的量具有時間依賴性。
　　3.利用物理吸附作用將 DOX負(fù)載到 ND-PEG-FA納米載體表面制得ND-PEG-FA/DOX納米藥物，采用熒光光譜法測定了