葉酸受體靶向的熒光硅納米載體的合成、表征及其細(xì)胞輸送研究.pdf

1、納米粒子（nanoparticles，NPs）可作為基因或藥物載體，并通過多種化學(xué)修飾，連接上靶向分子或熒光探針等，廣泛應(yīng)用于基因/藥物的靶向治療、病灶部位的光學(xué)成像等，已成近些年來納米生物醫(yī)學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。其中無機(jī)硅納米粒子應(yīng)用較為廣泛，具有結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、細(xì)胞毒性低、活體免疫原性低等特點(diǎn)。本研究對傳統(tǒng)的Stober法進(jìn)行了改進(jìn)，以3-巰丙基三亞基氧基硅烷（3-mercaptopropyltrimethoxysilane，MPS）作為唯一

2、硅源成功合成了無機(jī)硅納米粒子，改進(jìn)了傳統(tǒng)正硅酸乙酯（tetraethyl orthosilicate，TEOS）硅納米粒子不易化學(xué)修飾的缺點(diǎn)。通過控制反應(yīng)體系中硅源的濃度，可將粒子粒徑有效地控制在200~2000nm，同時異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）也可連接到粒子表面或摻雜在粒子內(nèi)部；利用修飾后的長鏈聚乙二醇（NH2-PEG-Mal）作為偶聯(lián)臂，將葉酸分子連接到粒子最外端，通過熒光分光

3、光度計(jì)和傅里葉紅外光譜的檢測證實(shí)了靶向配體的成功修飾和連接，從而制備了一種葉酸受體（folate receptor，F(xiàn)R）靶向的多功能納米載體。在離體條件下的細(xì)胞學(xué)水平對此靶向載體的輸送能力進(jìn)行評估，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，靶向粒子對KB細(xì)胞（FR高表達(dá)）的導(dǎo)入效率大概是A549細(xì)胞（FR低表達(dá)）的6倍，并且通過加入游離的葉酸分子對KB細(xì)胞表面的葉酸受體進(jìn)行拮抗，結(jié)果顯示葉酸受體被阻抗后能明顯抑制KB細(xì)胞的對納米載體的內(nèi)吞效果；最后應(yīng)用多種細(xì)胞內(nèi)