白蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白自組裝納米凝膠的研究以及在藥物包埋方面的初步探索.pdf

1、第一部分是利用綠色化學(xué)的方法將兩種等電點(diǎn)非常接近的球狀蛋白——等電點(diǎn)在pH4.8的白蛋白和等電點(diǎn)在pH6.4的卵轉(zhuǎn)鐵蛋白——在特定的pH值下加熱，通過(guò)二者的靜電和疏水相互作用、氫鍵以及二硫鍵自組裝制備納米水凝膠，整個(gè)制備過(guò)程沒(méi)有其它溶劑和化學(xué)試劑，除了調(diào)節(jié)pH時(shí)使用了HCl和NaOH。對(duì)這兩種蛋白質(zhì)通過(guò)加熱變性進(jìn)行自組裝的條件進(jìn)行了詳細(xì)的研究，包括溶液的pH、反應(yīng)物濃度和組成、反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間對(duì)組裝形成的納米凝膠的粒徑大小、分布和穩(wěn)定

2、性的影響，找到了最佳的制備條件。用透射電鏡、原子力顯微鏡和動(dòng)態(tài)/靜態(tài)光散射觀察了所制備的納米粒子的大小和形貌，證明粒子在溶液中和干燥以后都是球形，根據(jù)制備條件的不同，粒徑在100-220 nm之間變化，并且具有很大的溶脹比，即我們所制備的球形納米粒子是一種納米水凝膠。我們用ζ電位分析了納米凝膠所帶的電荷，證明納米凝膠具有兩性電荷，當(dāng)pH<5.5時(shí)，粒子帶正電荷；當(dāng)pH>5.5時(shí)，粒子帶負(fù)電荷。納米凝膠由于粒子表面所帶的電荷趨于零在pH

3、5-6時(shí)會(huì)形成可以再分散的二次聚集體。為了解決此問(wèn)題，我們用安全無(wú)毒的Maillard反應(yīng)，將葡聚糖的末端羥基與白蛋白分子表面的氨基進(jìn)行偶聯(lián)，然后將接有葡聚糖的卵白蛋白與卵轉(zhuǎn)鐵蛋白進(jìn)行組裝，得到了在全部pH條件下都可穩(wěn)定分散的納米凝膠。我們以苯甲酸為藥物模型，利用納米凝膠內(nèi)部具有疏松的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)和電荷性質(zhì)以及蛋白質(zhì)分子變性后暴露在分子表面的大量疏水基團(tuán)研究了該納米凝膠體系對(duì)帶電荷和疏水基團(tuán)的小分子藥物的包埋。 第二部分我們研究了兩

4、種不同結(jié)構(gòu)的蛋白，球蛋白卵白蛋白和鏈狀蛋白酪蛋白，與茶多酚的相互作用，在蛋白和茶多酚形成不溶性復(fù)合物的pH范圍內(nèi)，通過(guò)Maillard反應(yīng)將親水鏈段葡聚糖接枝到蛋白質(zhì)上，然后和茶多酚混合，可以有效阻止蛋白一茶多酚不溶性復(fù)合物的形成。我們研究了不同分子量的葡聚糖，蛋白多糖的比例和Maillard反應(yīng)時(shí)間對(duì)蛋白質(zhì)和茶多酚相互作用的影響。對(duì)兩種蛋白的研究表明蛋白多糖接枝物可以有效結(jié)合茶多酚，提高水溶液中茶多酚的含量，其中最有效的蛋白多糖接枝物