高載藥量的貝沙羅汀-磷脂偶聯(lián)物納米制劑的研究.pdf

1、貝沙羅汀(Bexarotene)是一種新型的合成維甲酸類似物，能選擇性激活維甲酸X受體，具有廣譜的體外抗腫瘤活性。它可以誘導(dǎo)非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌細(xì)胞和胰腺癌細(xì)胞的凋亡。但是，貝沙羅汀水溶性非常差，在藥劑學(xué)常用溶劑中也不易溶解，限制了它的臨床應(yīng)用。為了改善貝沙羅汀水溶性，本論文將貝沙羅汀連接到甘油磷酰膽堿上，構(gòu)建一種兩親性前藥，并自組裝成納米囊泡，對其理化性質(zhì)、細(xì)胞攝取和細(xì)胞毒性行為進(jìn)行探索。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　(1)首先

2、，貝沙羅汀與甘油磷酰膽堿(L-α-Glycerophosphor lcholine，GPC)，通過酯化反應(yīng)偶聯(lián)得到雙貝沙羅汀-磷脂偶聯(lián)物(Dual bexarotene-tailed phospholipid，DBTP)。催化體系是N，N'-羰基二咪唑/1，8-二氮雜二環(huán)十一碳-7-烯(CDI/DBU)，反應(yīng)溫度是37℃。通過高效液相色譜、質(zhì)譜和核磁對產(chǎn)物的純度和結(jié)構(gòu)進(jìn)行考察。通過電導(dǎo)率法測定DBTP偶聯(lián)物的臨界聚集濃度(CAC)，初步

3、研究偶聯(lián)物的自組裝能力。利用逆向蒸發(fā)法制備DBTP納米囊泡，以動(dòng)態(tài)光散射(DLS)和透射電子顯微鏡(TEM)分別考察DBTP納米囊泡的粒徑、zeta電位和微觀形貌。結(jié)果表明，DBTP納米囊泡的粒徑約為138.7nm，具有類脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)，載藥量(Bexarotene的含量)達(dá)到76％。此外，DBTP納米囊泡在中性環(huán)境中穩(wěn)定性良好，但在弱酸性環(huán)境中易降解并釋放出原藥。利用激光共聚焦以及液質(zhì)色譜聯(lián)用技術(shù)證明DBTP納米囊泡能被腫瘤細(xì)胞攝取并在胞

4、內(nèi)釋放出原藥。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)(MTT)和細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)顯示，DBTP納米囊泡能引起癌細(xì)胞凋亡并抑制癌細(xì)胞增殖，經(jīng)過72小時(shí)作用后，DBTP納米囊泡顯示出比原藥更好的抗腫瘤效果。
　　(2)其次，為了提高貝沙羅汀-磷脂納米囊泡的降解率和藥物釋放速率，將貝沙羅汀與甘油磷酰膽堿通過己二醇和丁二酸酐連接，得到產(chǎn)物貝沙羅汀-己二醇半琥珀酸酯-磷脂偶聯(lián)物(Dual bexarotene-hexandiolsuccinat phospholipid

5、，DB-ES-TP)，通過高效液相色譜、質(zhì)譜和核磁對產(chǎn)物的純度和結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。利用逆向蒸發(fā)法制備DB-ES-TP納米囊泡，以動(dòng)態(tài)光散射和透射電子顯微鏡分別考察DB-ES-TP納米囊泡的粒徑、zeta電位和微觀形貌，并研究了納米囊泡的穩(wěn)定性和藥物釋放。結(jié)果表明，DB-ES-TP納米囊泡在中性環(huán)境中穩(wěn)定性良好，但在弱酸性環(huán)境中易降解并釋放出原藥。最后，利用激光共聚焦以及液質(zhì)色譜技術(shù)證明DB-ES-TP納米囊泡能被腫瘤細(xì)胞攝取并在胞內(nèi)釋放原藥