新型親和色譜固定相的制備和性能評價.pdf

1、天津理工大學(xué)碩士學(xué)位論文新型親和色譜固定相的制備和性能評價姓名：駱紅琴申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：應(yīng)用化學(xué)指導(dǎo)教師：李乃瑄20070101A b s t r a c tW i t ht h e d e v e l o p m e n t o fs c i e n c ea n d t e c h n o l o g y , e s p e c i a l l y t h er a p i d l yd e v e l o p m e n t

2、 o f l i f es c i e n c e s ，p e o p l e m a d eh i g h e r r e q u e s t so nt h et e c h n o l o g y o fs e p a r a t i o n a n da n a l y s i s ，t h ea f f i n i t y c h r o m a t o g r a p h yw a sr e q u i r e dt o

3、h a v eh i i g h e r r e s o l u t i o n ，f a s t e rs e p a r a t i o nv e l o c i t y ．V v l I I c n t h e t r a d i t i o n a l s o f t g e l sw e r eu s e d a s t h em a t r i x i n a f f i n i t y c h r o m a t o g

4、r a p h y , t h eq u e s t i o n o f “s t a g n a n t m o b i l e p h a s e m a s s t r a n s f e r ' ’a p p e a r e d , t h e p e a k s h a p e o f t h ec h r o m a t o g r a m sw a s w i d e ，t h es e p a r a t i o

5、 nt i m ew a s l o n g ．T os o l v et h i sp r o b l e m ，i n v e s t i g a t o r sb r o u g h t f o r w a r dt h ea s s u m p t i o nt ou s en o n p o r o u s m a t r i x i n a f f i n i t yc h r o m a t o g r a p h y ．

6、D u e t ot h ef a c tt h a tt h e r e w e r e n o p o r o u so n t h es u r f a c eo f t h em a t r i x ，t h em a s st r a n s f e r t i m eb e t w e e nb i o m a c r o m o l e c n i ea n d t h es o l i dp h a s e w a s

7、s h o r t e n , t h e a n a l y s i st i m e W a s g r e a t l y s h o r t e n ；a l s ot h em e c h a n i c a ls t r e n g t ho f t h em a t r i x W a s g r e a t l ye n h a n c e d , w h i c h m a d e i t a p p r o p r

8、i a t et ob eu s e d u n d e r h i g h p r e s s u r e ．I n o r d e r t oc o m p r e h e n dt h e d e v e l o p m e n to fn o n p o r o u sm a t r i x ，e n o u g h l i t e r a t u r e sa th o m ea n d a b r o a d w e r e

9、 c o l l e c t e d ．B a s e d 0 nt h e s ed o c u m e n t s ，U r e a - F o r m a l d e h y d er e s i n- Z i r c o n i a ( U F - Z Ⅱ0 2 ) c o m p o s i t em i c r o s p h e r e sW e r Cc h o s e na st h ea f f i n i t ym

10、 a t r i x ，b a s e do nl e a r n i n gt h e p r e p a r a t i o n e x p e r i e n c e o f L e iS h n l e i ，t h em i c r o s p h e r e s w e r e p r e p a r e da n d u s e d a st h es o l i dp h a s e i nI m m o b i l i

11、 z e dM e t a l I o nM f m i t y C h r o m a t o g r a p h y ( I M A C ) a n d D y e L i g a n dA f f i n i t yC h r o m a t o g r a p h y ．T h e w o r k d o n e W a s a sf o l l o w s ：1 ．1 m i n o d i a c e t i ca c i

12、db o n d e dU F - Z r 0 2c o m p o s i t em i c r o s p h e r e sw e r es y n t h e s i z e d ．A f t e ru s i n ge p i c h i o r o h y d r i n t o a c t i v a t et h em a t r i x ，I D A W a s b o n d e du n d e r a l k a

13、 l e s c e n c ec o n d i t i o n ．A f t e r b a c k f i l l i n gt h es o l i dp h a s e i n c h r o m a t o g r a p h i cc o l u m n , t h eu n e h e l a t e ds o l i d p h a s e W a so b t a i n e d ；z i n c u m i o n

14、a n dc o p p e r i o nw e r e c h o s e nt o c h e l a t ew i t hI D A , t w ok i n d so fi m m o b i l i z e d m e t a l i o n s o l i d p h a s e s W a sp r e p a r e d ．B o v i n e S e r u m A l b u m i na n d L y s o

15、 z y m c w a su s e da st e s t i n gs a m p l e s ．T h e c h a n g eo f r e t e n t i o nt i m eo ft h et w op r o t e i n so nt h r e ed i f f e r e n ts o l i d p h a s e s u n d e r m o b i l e p h a s e w i t h d i

16、f f e r e n t p t I v a l u e ，a n d t h e i n f e c t i o n o f t h ec o n c e n t r a t i o no fs a l t i n t h em o b i l ep h a s eo nt h er e t e n t i o nt i m eo ft h et w op r o t e i n so nt h eu n c h e l a t e

17、 ds o l i dp h a s e a n d t h e s o l i dp h a s ec h e l a t e dw i t hc o p p e ri o nw e r ee x a m i n e d ．T h er e s u l to b t a i n e di n d i c a t e dt h a ta f t e rc h e l a t i n gt h em e t a l l i ci o n

18、，t h es o l i dp h a s em a i n t a i n e dt h ec h a r a c t e r i s t i co f u n c h e l a t e d s o l i dp h a s e ，a n da l s oi ts h o w e d t h ed i f f e r e n tp e r f o r m a n c e ．T ot h eu n c h e l a t e d s

19、 o l i dp h a s e ，t h er e t e n t i o no f p r o t e i nd e p e n d e d o nt h e s t a t i ce l e c t r i f i c a t i o nb e t w e e np r o t e i n a n dt h el i g a n d ，w h i l et ot h ec h e l a t e d s o l i d p h

20、a s e , t h e r e t e n t i o no f p r o t e i nd e p e n d e do nt h ec h o r u so f t h e s t a t i ce l e c t r i f i c a t i o nb e t w e e np r o t e i na n dt h el i g a n da n dt h ec o o r d i n a t i o nb e t w

21、e e np r o t e i n a n d t h em e t a l l i ci o n ；W h e n s a l tW a sa d d e d t ot h em o b i l ep h a s e ，t h er e t e n t i o nt i m e o f p r o t e i n sr e d u c e dw i t h t h e t h i c k e no ft h es a l t , w