以四唑?yàn)榕潴w的新型色譜固定相的合成及色譜性能研究.pdf

1、生物大分子分離與純化的液相色譜方法有多種，離子交換色譜(IEC)和固定金屬離子親合色譜(IMAC)是其中廣為應(yīng)用的兩種方法。本論文設(shè)計(jì)合成了兩種以四唑?yàn)榕潴w的新型IEC和IMAC固定相，并對(duì)生物大分子進(jìn)行了分離與純化，所取得的主要成果如下： 1.采用-縮甘油醚基丙基三甲氧基硅烷活化的大孔硅膠與3.羥基丙腈反應(yīng)，在氯化銨的催化下再與疊氮鈉通過3+2環(huán)加成反應(yīng)制得了一種以四唑?yàn)榕潴w的硅膠基弱陽離子交換色譜固定相。系統(tǒng)的考察了生物大分

2、子在固定相上的分離能力、保留行為、負(fù)載容量及柱效穩(wěn)定性等色譜性能。結(jié)果表明，5種標(biāo)準(zhǔn)蛋白可以被很好的分離，保留行為符合離子交換色譜模式；該固定相具有負(fù)載量高，穩(wěn)定性好，不可逆吸附小等優(yōu)點(diǎn)。將四唑配體固定相色譜柱用于雞蛋清中溶菌酶的一步純化，純化的溶菌酶純度為89.6％，活性可達(dá)66.823 IU/mg。 2.采用Y-氨基丙基三乙氧基硅烷活化的大孔硅膠與3-氯丙腈反應(yīng)得到腈基硅膠，再在氯化銨的催化下與疊氮鈉通過3+2環(huán)加成反應(yīng)首次