焦慮抑郁行為學(xué)實驗方法

1、一、 曠場實驗（Open Open field field test test）又稱敞箱實驗，是評價實驗動物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。例如動物對新開闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動，在 中央?yún)^(qū)域活動較少，但動物的探究特性又促使其產(chǎn)生在中央?yún)^(qū)域活動的動機。1 .開口的木盒底部形成16個等大的方格。場地中央置一彩色瓶子以激發(fā)小鼠的好奇心。 照明來自一高出場地中央2. 80 m的40 W白熾燈。2 .預(yù)適應(yīng)：每只小鼠放

2、入場地中央自由活動3min3 .每只小鼠面朝墻放入同一個拐角方格，并讓其自由探索環(huán)境5 min。4 .每只小鼠測試結(jié)束后，濕布洗擦場地并用干布擦干。5 .數(shù)據(jù)分析：跨越方格總數(shù)（以雙后肢跨出作為標(biāo)準(zhǔn)，時間也以后肢為算。）第一格的 潛伏期、周邊時間、抬腿次數(shù)（雙腿離地）。二、 高架十字迷宮（elevated plus-maze, EPM）是非條件反射模型，以動物自發(fā)的恐懼樣反應(yīng)為行為學(xué)基礎(chǔ)。高架十字迷宮實驗就是由于動物對新環(huán)境的探究和對

3、高懸開放臂的恐 懼而形成的矛盾沖突狀態(tài)，從而反映出動物的焦慮情緒，所以高架十字迷宮既可以建立非 條件反射焦慮動物模型，也可以作為測量動物焦慮反應(yīng)的方法。1 .將實驗動物放入迷宮中央?yún)^(qū)，頭朝開臂，并注意此后每只實驗動物均放在同一位置。2 .同時開啟攝像監(jiān)控器記錄5min內(nèi)實驗動物開臂和閉臂的進入次數(shù)及進入各臂的時間。 實驗過程中實驗者需距離迷宮1米的距離。3 .記錄結(jié)束后將實驗動物放回飼養(yǎng)籠具內(nèi)。同時清理迷宮，并用5%的醋酸水溶液或75%

4、 的酒精擦拭迷宮，借以消除動物氣味對后繼實驗動物的影響。4 .分析：（1）開臂進入次數(shù)百分比=開臂進入次數(shù)/開臂進入次數(shù)+閉臂進入次數(shù)（2）開臂滯留時間百分比=開臂滯留時間/開臂滯留時間+閉臂滯留時間進入開放臂時間百分比和進入開放臂次數(shù)百分比反映了動物的焦慮狀態(tài)；進入開放臂和 封閉臂總次數(shù)反映動物的運動能力，向下探究次數(shù)反映了動物在非保護區(qū)內(nèi)的探索行為，與 焦慮程度有一定相關(guān)性。。三、 明暗穿梭實驗：回避實驗是利用動物的好暗避光（明暗穿

5、梭）而建立起來的。1 .將小鼠放入明箱，讓小鼠進行自由穿梭，觀察5min。2 .每只小鼠測試結(jié)束后，濕布洗擦場地并用干布擦干。3 .分析：穿梭次數(shù)、潛伏期、明箱活動時間、明箱活動時間百分比、暗想活動時間、暗箱 活動時間百分比、總路程、明箱活動路程、暗箱活動路程。藥物抗抑郁作用的動物模型。該實驗方法是一種行為絕望實驗法，其基本原理 是當(dāng)大鼠或小鼠放進一個有限的空間使之游泳，開始時拼命游泳力圖逃脫，很快就變成漂浮 不動狀態(tài)，僅露出鼻孔保持呼

6、吸，四肢偶爾劃動以保持身體不至于沉下去，實際是動物放 棄逃脫的希望，屬于行為絕望。經(jīng)典的強迫游泳實驗分兩天進行。第一天讓大鼠或小鼠在2 5 ℃的深水中強迫游泳1 5 min ,取出后在犯℃溫室烘干，歸籠。第二天，在同樣的條件下進行強迫游泳5 min , 記錄不動時間。Mirua H等將強迫游泳的時間改為（1 0 — 3 0） mini 1。張中 啟等在實驗第2天直接觀察小鼠強迫游泳6 min內(nèi)后4 m i n的不動時間圖。這些都是對經(jīng)

7、 典實驗方法所做的修改。大鼠或小鼠的不動時間是判斷抗抑郁藥物作用的指標(biāo)。不動時間越 短，抗抑郁作用越強。Detke等將強迫游泳中的行為分成4類：游泳（動物在水中四處游動）、攀爬（動物前爪劃 動水面，碰觸缸壁）、潛水（動物整個身體沉于水下）和不動（動物四肢不動漂浮于水面，僅 頭部露出水面呼吸）。經(jīng)實驗證明不同機制的抗抑郁藥影響不同的行為，如地昔帕明和馬普 替林（N E再攝取抑制劑）可選擇性增加大鼠的攀爬行為，而氟西汀（5-HT再攝取抑制劑

8、） 選擇性增加大鼠的游泳行為川。六、懸尾實驗（Tail suspension test, TST）是一種經(jīng)典而又能快速評價抗抑郁藥物、興奮藥物、 鎮(zhèn)靜藥物藥效的方法。其原理是利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無法逃脫，從而放棄掙扎，進 入特有的抑郁不動狀態(tài)，實驗過程中記錄動物不動時間來反映抑郁狀態(tài)，抗抑郁藥物、興奮 藥物能明顯地縮短改變其狀態(tài)。末次給藥lh后，將小鼠尾部距末端約1cm處用夾子固定, 使其倒吊于距地面15 cm左右的橫桿上，動物

9、為克服不正常體位而掙扎活動，但活動一段時 間后，出現(xiàn)間斷性不動，顯示失望狀態(tài)，累計各組8 min內(nèi)的不動時間七、新環(huán)境進食抑制實驗（Novelty Novelty suppressed suppressed feeding feeding test, test, NSF NSF）： ）：使用邊長50cm>高40cm箱底鋪勻2cm高木削的試驗箱，箱底中央放置糖丸或小塊食物于白紙上。試驗前 動物禁食24h,試驗時從任意的箱角放大/小