新型離子液體對簡單節(jié)桿菌及催化膽固醇的影響.pdf

1、新型離子液體DESs用于生物催化研究不斷取得創(chuàng)新性的成果，成為該領域研究熱點。新型離子液體DESs由環(huán)境友好的氨鹽和氫供體組成，因此通常被認為是“綠色溶劑”，但關于新型離子液體對于菌體細胞毒性及全細胞生物催化的研究報道較少。本論文以簡單節(jié)桿菌催化膽固醇生成膽甾烯酮為研究模型，系統(tǒng)分析不同DESs對簡單節(jié)桿菌的細胞毒性，考察膽固醇在DESs中的溶解度及生物轉(zhuǎn)化效率，在此基礎上揭示含DESs介質(zhì)的轉(zhuǎn)化體系對甾體藥物生物催化性能的影響規(guī)律。<

2、br>　　通過考察含DESs體系中簡單節(jié)桿菌的生長曲線、活菌數(shù)、胞外葡萄糖消耗量及細胞膜完整性，研究不同離子液體對于簡單節(jié)桿菌的影響。結(jié)果表明，新型離子液體對細胞的毒性隨離子液體濃度的增加而增加，且與氫供體的摩爾比呈正相關。與對照相比，經(jīng)ChCl∶Eg、ChCl∶Gly和ChCl∶U處理后的簡單節(jié)桿菌延遲期依次增長。當DESs濃度為8％時，ChCl∶U處理的菌體細胞存活率下降至45.9％，而ChCl∶Gly和ChCl∶Eg分別下降至16

3、.7％和14.4％，說明ChCl∶U雖然延長了菌體的延遲期，但仍表現(xiàn)出較好的生物相容性。此外，延遲期的延長也相應影響簡單節(jié)桿菌對體系中胞外葡萄糖的消耗能力，從小到大依次為ChCl∶U＜ ChCl∶Gly＜ ChCl∶Eg。而不同氫供體的DESs對簡單節(jié)桿菌細胞膜損傷程度，從小到大依次是ChCl∶U＜ ChCl∶Gly＜ ChCl∶Eg，同樣顯示出離子液體ChCl∶U對菌體較小的細胞毒性。
　　簡單節(jié)桿菌細胞經(jīng)ChCl∶U處理后，通

4、過掃描電鏡發(fā)現(xiàn):隨著ChCl∶U濃度的增加，菌體細胞表面凹陷，細胞膜變薄、變模糊。利用GC-MS進一步研究了ChCl∶U作用前后簡單節(jié)桿菌胞內(nèi)代謝水平的差異，并通過多元統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)琥珀酸、谷氨酰胺、鳥氨酸、脯氨酸、延胡索酸等物質(zhì)在ChCl∶U作用下變化明顯，表明ChCl∶U導致簡單節(jié)桿菌代謝水平降低。
　　研究了不同濃度DESs對膽固醇溶解度及膽固醇生物轉(zhuǎn)化的影響。與對照組相比，DESs對膽固醇溶解度有一定的增溶效應，但離子液體的