膽固醇的測定

1、中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GBT1520694食品中膽固醇的測定方法Methodfdeterminationofcholesterolinfoods────────────────────────────────────1主題內(nèi)容與適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用分光光度計測定各類動物性食品中膽固醇的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類動物性食品中膽固醇的測定。2原理當(dāng)固醇類化合物與酸作用時，可脫水并發(fā)生聚合反應(yīng)，產(chǎn)生顏色物質(zhì)。因此可先對食品樣品進(jìn)行提取和皂化，用

2、硫酸鐵銨試劑作為顯色劑，測定食品膽固醇的含量。3試劑全部試劑除注明外均為分析純，試驗用水為蒸餾水。3.1石油醚。3.2無水乙醇。3.3濃硫酸。3.4冰乙酸：優(yōu)級純。3.5磷酸。3.6膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。管內(nèi)加入冰乙酸使總體積皆達(dá)4mL。沿管壁加入2mL鐵釩顯色液，混勻，在15～90min內(nèi)，在560～575nm波長下比色。以膽固醇標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，吸光度之為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。5.2樣品測定5.2.1食品脂肪的提取與測定根據(jù)食品種類分別用索氏

3、脂肪提取法、研磨浸提法和羅高氏法提取脂肪。并計算出每100g食品中的脂肪含量。5.2.2食品膽固醇的測定將提取的油脂3～4滴（約含膽固醇300～500mg），置于25mL試管內(nèi)，準(zhǔn)確記錄其重量。加入4mL無水乙醇，0.5mL50%氫氧化鉀溶液，在65℃恒溫水浴中皂化1h。皂化時每隔20～30min振蕩一次使皂化完全。皂化完畢，取出試管，冷卻。加入3mL5％氯化鈉溶液，10mL石油醚，蓋緊玻塞，在電動振蕩器上振搖2min，靜置分層（一般約