作用于FGFR1的4-溴-N-(3,5-二甲氧基苯基)苯甲酰胺類衍生物的設計、合成及生物活性評估.pdf

1、目的：SSR128129E無法與FGFR1結合區(qū)域的疏水口袋2、近溶劑端形成分子間作用，使得其激酶活性較差。課題組期望在2位氨基上進行修飾，篩選出一個細胞活性優(yōu)異、FGFR1結合力更強的化合物。
　　方法：⑴4-溴-2-硝基苯甲酸經EDC·HC l活化與3,5-二甲氧基苯胺反應，生成了4-溴-2-硝基-N-(3,5二甲氧基苯基)苯甲酰胺；使用鐵與氯化銨的還原體系將其中的硝基還原成氨基，再使用不同方法對氨基進行取代，得到不同的目標產

2、物。⑵選取FGFR1/2/3、EGFR1/2/4等激酶受體，采用Caliper Mobility Shift Assay方法篩選中間體2的靶點。⑶選取FGFR1擴增的五個細胞系H520、H1581、H226、H460和H1703，采用 MTT、CCK-8方法篩選目標化合物對5種肺癌細胞的抗增殖作用。⑷選取H1581和H1703兩種細胞，運用流式細胞儀收集化合物C9給藥后的細胞，檢測化合物C9對兩種細胞的細胞周期抑制作用。⑸選取H520細

3、胞，運用WB技術檢測化合物C9對FGFR1下游信號的抑制作用。⑹使用對接軟件 Autodock(版本4.2.6)將化合物分別對接到 FGFR1的結合位點，分析化合物與FGFR1的結合力強弱。
　　結果：①合成了A、B、C三個系列共35個化合物，SCIFinder數(shù)據(jù)庫查詢確認35個化合物皆為未報道的新化合物，并通過1HNMR、13CNMR、IR和MS確認結構正確。②中間體2只對FGFR1的抑制作用較強，抑制率為84.3％，對其他酪

4、氨酸激酶受體幾乎沒有作用。③所有目標化合物對H520、H1581和H226三種細胞系均有抑制作用，然而僅有部分化合物對H460和H1703兩種細胞系有抑制作用。④化合物C9能夠有效抑制H1581和 H1703細胞周期，且抑制作用強于先導化合物SSR128129E。⑤化合物C9能夠有效抑制FGF R1的下游信號，且對p-FGFR1的抑制作用強于先導化合物SSR128129E。⑥分子對接結果表明化合物C9與FGFR1蛋白的結合自由能大于SS