短芽孢桿菌bacillusbrevisno.g1)幾丁質(zhì)酶的提純及性質(zhì)研究

1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文短芽孢桿菌（Bacillus brevis No.G1)幾丁質(zhì)酶的提純及性質(zhì)研究姓名：李盛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：黃偉達(dá);趙志安2002.5.27短芽孢桿菌( Bb r e v i s N o G I ) 中的幾丁質(zhì)酶的提純及性質(zhì)研究 第2 頁(yè)，共3 6 頁(yè)A b s t r a c tC h i t i n ，a l i n e a r p o l yp 一1 ，4 - N —a c

2、e t y l —D —g l u c o s a m i n e ，i st h e s e c o n dm o s t a b u n d a n tb i o p o l y m e ro n t h ee a r t h ．C h i t i n a s e sw i t ht h ea b i l i t yo f h y d r o l y z i n gc h i t i nh a v e aw i d ep r o s

3、 p e c ti nt h ef i e l do fb i o c o n t r o la n d u t i l i z a t i o no f t h er i c hs o u r c eo fc h i t i no nt h ee a r t h ．B a c i l l u s b r e v i sN o ．G 1 w a si s o l a t e d f r o ms o i l b yP r o f e s

4、 s o rG uZ h e n r o n g ( i nS h a n g h a iA g r i c u l t u r a l S c i e n c eA c a d e m y ) ，w h i c hc o u l de x c r e t ec h i t i n a s ei n t ot h ec u l t u r em e d i u m ．I nt h i s s t u d yw e p u r i f i

5、 e dt h ee x t r a c e l l u l a re n d o c h i t i n a s e t oh o m o g e n e i t yf r o mt h ec u l t u r em e d i a o fB a c i l l u sb r e v i sN o ．G 1 w i t h a c o m b i n a t i o no fa m m o n i u ms u l f a t ep

6、 r e c i p i t a t i o n ，P h e n y l —S e p h a r o s e h y d r o p h o b i ci n t e r a c t i o nc h r o m a t o g r a p h ya n dD E A Ea n i o n —e x c h a n g ec h r o m a t o g r a p h y ．T h ec h i t i n a s e i s

7、f o r m e d b y t w o i d e n t i c a l s u b u n i t sb y h y d r o p h o b i ci n t e r a c t i o na n dh a s am o l e c u l a rw e i g h to f8 5 k D a ．W h e nt r e a t e dw i t h8M u r e aa t5 5 ℃f o r 3 0r a i n ，t

8、h e e n z y m ew a s d e p o l y m e r i z e dw i t h t h e l o s s o fc b i t i n a s e a c t i v i t y ．T h ee n z y m e h a sa n i s o e l e c t r i cp o i n to f5 ．5 ，a n d i s m o s ta c t i v e a tp H8 ．0 w i t ha

9、n o p t i m a lt e m p e r a t u r ea t6 0 * ( 2 ．T h ec h i t i n a s ec a nb ei n h i b i t e db yA g + ．T h ee n z m a t i cc h a r a c t e r i s t i c sa n dt h eN - t e r m i n a la m i n oa c i d s e q u e n c e (

10、．A V S N S K I I G Y L ) o f t h e c h i t i n a s es h o w e dt h a tt h e e n d o c h i t i n a s ew ep u r i f i e d i s a n o v e l o n e C o m p a r e dw i t ho t h e rc h i t i n a s e s ，t h ec h i t i n a s e w e

11、p u r i f i e di su n u s u a lf o ri t s f o r m o fd i m e r a n d r e t a i n e dh i g he n z y m a t i c a c t i v i t yi n aw i d er a n g eo f t e m p e r a t u r ea n d r e s i s t e dp r o t e o l y s i sb yt r y

12、 p s i ni nt h e p r e s e n c e o f 5Mu r e a ．T h u s t h i sa d v a n t a g ep r o v i d e st h ee n z y m e ag o o dp r o s p e c tt ob eu s e da s an e w t o o lf o rb i o c o n t r 0 1 ．K e y w o r d s ：B a c i l l