日本血吸蟲22.6kda抗原不同劑型免疫小鼠誘導cd4cd25t細胞產(chǎn)生的差異

1、南京醫(yī)科大學碩士學位論文日本血吸蟲22.6kDa抗原不同劑型免疫小鼠誘導CD4+CD25+T細胞產(chǎn)生的差異姓名：張蕙申請學位級別：碩士專業(yè)：病原生物學指導教師：王勇20060520南京醫(yī)科大學碩士學位論文C D 4 + C D 2 5 + T 細胞數(shù)量、功能相關(guān)基因、抑制功能及其機制的了解，進而探討不同劑型疫苗免疫小鼠免疫應答及保護力上的差異，為進一步研究疫苗劑型對C D 4 + C D 2 5 + T 細胞的影響和疫苗的實際運用提供實

2、驗證據(jù)。首先建立不同劑型r s j 2 2 ．6 ／2 6 G S T 抗原分子免疫小鼠模型，并設(shè)立對照組。以三色流式細胞術(shù)檢測不同實驗組小鼠脾臟組織中，C D 4 + C D 2 5 + T 細胞相對比例上的變化，同時運用實時熒光定量P C R方法檢測相關(guān)基因C D 2 5 和轉(zhuǎn)錄因子F o x p 3 在C D 4 + T 細胞m R N A 中的變化。運用免疫磁珠分離純化獲得各實驗組小鼠脾臟組織的C D 4 + C D 2 5 +

3、 T 細胞，在有絲分裂原C o n A ( 刀豆蛋白A ) 和特異性抗原( 日本血吸蟲r S j 2 2 ．6 ／2 6 G S T 抗原) 刺激下，采用同位素3 H —T d R摻入細胞增殖試驗分析C D 4 + C D 2 5 + T 細胞對r s j 2 2 ．6 ／2 6 G S T 抗原致敏小鼠脾臟C D 4 + C D 2 5 ～T 細胞增殖的抑制作用，并且探討了C D 4 +C D 2 5 + T 細胞與其抑制作用的量效關(guān)

4、系。然后研究不同劑型r S i 2 2 ．6 ／2 6 G S T 抗原免疫小鼠T h l ／T h 2 極化反應以及對攻擊感染的保護力的影響。本實驗獲得如下主要實驗結(jié)果：1 ． 可溶性抗原較顆粒性抗原更易誘導出C D 4 + C D 2 5 + F o x p 3 + T 細胞顆粒性r S i 2 2 ．6 ／2 6 G S T 和可溶性r S { 2 2 ．6 ／2 6 G S T 免疫組小鼠的C D 4 + C D 2 5 + T

5、 細胞占C D 4 + T 細胞和C D 3 + T 細胞的比例均高于單純S e p h a r o s e 4 B 顆?；蜃魟┳⑸浣M和正常組小鼠( p0 ．0 5 o 實時熒光定量P C R 檢測各實驗組基因C D 2 5 和轉(zhuǎn)錄因子F o x p 3 的m R N A 表達水平，顆粒性抗原和可溶性抗原免疫紐C D 2 5 水平較其它組顯著增高( p < 0 ．0 5 ) ，前者是正常組的2 ．1 4 + 0 ．1 7 6 倍，