岷江百合liliumregalewils.懸浮細胞系的建立及耐鹽篩選

1、南京林業(yè)大學碩士學位論文岷江百合（Lilium regale Wils.）懸浮細胞系的建立及耐鹽篩選姓名：劉坤申請學位級別：碩士專業(yè)：園林植物與觀賞園藝指導教師：湯庚國20080601T h ee s t a b I i s h m e n t o f s u s p e n s i o nc e l ll i n e sa n d s a I t —t o I e r a n ts e l e c t i o no f 三f 豇“朋，

2、曙口跆W i I s ．A b s t r a c tO nt h e c o n d i t i o no fa l k a l e s c e n c e i n s o i l sa n dw a t e ri n N o r t hC h i n a ，t h e c u tn o w e r q u a l i t y o f l i l y d e c r e a s e d s e r i o u s l y a n d

3、t h e d e V e l o p m e n t o f 1 i l y w a sr e s t r i c t e d ．T h e r e f b r e ，b r e e d i n go f s a l tt o l e r a n tl i l yV a r i e t yw a s a e f f b c t i V ew a y t os o l V et h i s q u e s t i o n ．三f ，f

4、z f 冊 彤g 口彪 W i l s ． w a s t h e e x c e l l e n t m a t e r i a l f 6 r s a l t ．t o l e t a n ts e l e c t i o ni n L i l i u ms p e c i e s ．I n t h i s p a p e r ，t h e b u l b s c a l e s o f ￡，．e g 口把w e r e u s e

5、 d a se x p l a n t s t o i n d u c e c a l l u s ．S u s p e n s i o n c e l l l i n e s w e r e e s t a b l i s h e d a n d p l a n t sr e g e n e r a t e d f ．r o m t h e c e l l l i n e s ．B y p o s o t i v e s e l e

6、c t i o n m e t h o d s ，t h e c a l l u s w e r es e l e c t e d t o o b t a i n t h e s a l t ．t 0 1 e r a n t l i n e s w i t ht h e s e l e c t i v e p r e s s u r eo fN a C la n dH Y P ．T h em a i n r e s u l t sd e

7、 s c r i b e d a sf o U o w s ：1 ． T h eb u l b s c a l e s o f 三，．P 2 口，Pw e r e u s e da s e x p l a n t s t o i n d u c e c a l l u s i n d i f f ．r e n th o r m o n e s ．F i n a l l y ，t h er e s u l t ss h o w e d t

8、 h a tt h ee l i g i b l em e d i u m t oc a l l u si n d u c t i o n w a sM S + 6 一B A 2 ．0 m g ／L + N A A 0 ．1 m g ／L + 3 ％s u g a r ．L i g h t w a s s u i t a b l e f o r g r o w t h o fc a l l u s ：I tw a ss h o w e

9、dt h a t t h eo p t i m a lm e d i u mt o e a l l u s s u b c u l t u r ew a sM S + 6 ．B A2 ．O m g ／L + N A A O ．1m g ／L + 3 ％s u g a r i n t h e d a r k ．O n t h e c o n d i t i o n o f d a r k ，c a l l u sg r o w e dq

10、u i c k l ya n d t h ec o l o r o f c a l l u sw a s y e l l o V n O n t h ec o n d i t i o n o f 1 i g h t ，t h ec o l o ro f c a l l u sc h a n g e d t Og r e e na n d b r o w n d i f f e r e n t l y ．2 ． B yr e s e a

11、r c h i n gt h ei n o c u l u m d e n s i t i e s ，s u c r o s e c o n c e n t r a t i o n sa n d h o r m o n e s ，i ts h o w e dt h a t t h eo p t i m a lc o n d i t i o n s f o rt h e g r o w t ho f 三愆g 口抬c e l l l i n

12、 e sw e r ea sf o l l o w s ：2 ．0 9 ／4 0 m L ，3 0 - 6 0 9 ／L s u c r o s e ，o p t i m a l m e d i u m w a s M S + 1 ．0 m g ／L 6 - B A ．A c c o r d i n g t ot h eg r o w t h c u r V eo f c e l l ，i tw a s b e t t e rt os

13、u b c u l t u r ei ns e V e n ·d a yc y c l e s ．3 ． T h ec a l l u s w e r ep l a n t e d o n t ot h em e d i a c o n t a i n i n gm a i n t a i n e d d i f 五e r e n tN a C la n dH Y P c o n c e n t r a t i o n s ．

14、B y p o s o t i v e s e l e c t i o nm e t h o d s ，t h e s a l t ．t 0 1 e r a n t c a l l u s o fd i f f e r e n t s a l t c o n c e n t r a t i o n s w e r e o b t a i n e d ．H o w e v e r ，t h e s a l t ．t o l e r a n

15、 t c a l l u s o fh i g h e s t s a l t c o n c e n t a t i o n s ( 7 0 m m o l ／L N a C l a n d O ．15 m m o l ／L H Y P ) w e r e o n l yr e s e a r c h e d ．4 ． T h r o u g hp h y s i o l o g i c a l a n db i o c h e m

16、i c a l a n a l y s e ，t h e c o n t e n t s o fp r o l i n e a n ds 0 1 u b l e s u g a ro ft h es a l t ．t o l e r a n t c a l l u s o f O ．15 m m o l ／L H Y Pw e r e 1 ．8 8 ，1 ．5 4 t i m e sh i g h e rt h a nc o n t r

17、 o lr e s p e c t i v e l y ，t h ec o n t e n to fM D A o ft h es a l t ．t o l e r a n tc a l l u sw a s1 0 w e rt h a nc o n t r 0 1 ．I t w a si n c l u d e dt h a tt h e s a l t ．t O l e r a n tc a l l u s o f O ．15 m

18、m o l ／L H Y Ph a d s i g n i f i c a n ts a l tt 0 1 e r a n c e ，b u tt h es a l t ．t o l e r a n tc a l l u so f7 0 n l m o l ／L N a C ld i dn o th a v e ．S 0 t h e s a l t —t O l e r a n t c a l l u sv a r i a n t s