東方百合離體誘變和耐鹽突變體的篩選.pdf

1、本試驗(yàn)采用60Coγ射線急性輻照，X射線慢性輻照，X射線急性輻照三種方法對(duì)東方百合索邦（Sorbonne）組織培養(yǎng)形成的不定芽進(jìn)行輻照處理，研究了不同輻照方法的輻射生物學(xué)效應(yīng)。并將輻射后的百合不定芽采用逐步提高鹽濃度的方法進(jìn)行耐鹽突變體的篩選，獲得了百合耐鹽突變體，對(duì)耐鹽突變體進(jìn)行同工酶分析，測(cè)定了鹽環(huán)境中耐鹽突變體生理指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化，結(jié)果表明： 1．60Coγ射線輻照對(duì)東方百合不定芽的生長(zhǎng)有抑制作用，60COγ射線處理東方百合

2、索邦（Sorbonne）組培不定芽的適宜輻照劑量在2．0～4．0Gy之間，其半致死劑量為6．07Gy，半致矮劑量為5．21Gy。高劑量處理（≥4．0Gy） POD同工酶酶譜與對(duì)照差異大。 2．東方百合不定芽受X射線慢性輻照3個(gè)月后，輻照處理對(duì)東方百合不定芽的生長(zhǎng)有顯著性抑制作用，對(duì)不定芽增殖影響不明顯，隨著輻照劑量的增大，不定芽死亡率增大。不定芽POD同工酶發(fā)生了顯著的改變，活性增強(qiáng)，條帶數(shù)增多，X射線慢性輻照處理對(duì)東方百合不定

3、芽誘變作用明顯。 3．用X射線對(duì)東方百合組培不定芽進(jìn)行了急性輻照處理，結(jié)果顯示X射線急性輻照劑量偏低，輻照效應(yīng)表現(xiàn)為刺激作用，促進(jìn)了東方百合不定芽生長(zhǎng)。 4．試驗(yàn)以百合健壯不定芽進(jìn)行了確定百合耐鹽臨界濃度的預(yù)試驗(yàn)，根據(jù)植株的受害情況確定了東方百合耐NaCl臨界濃度為0．75％。將百合輻照材料采取逐步提高鹽濃度的方法進(jìn)行耐鹽突變體的篩選，共篩選到耐0．75％NaCl的突變體（T1）329個(gè)、耐1．0％NaCl的突變體（T2

4、）139個(gè)、耐1．25％NaCl的突變體（T3）58個(gè)。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)三種輻照方法的耐鹽誘變效果為γ射線急性輻照>X射線慢性輻照>X射線急性輻照。耐鹽突變體同工酶分析發(fā)現(xiàn)突變體比對(duì)照多出了一些特異性同工酶帶。耐鹽突變體在鹽環(huán)境中通過(guò)調(diào)節(jié)POD酶和SOD酶酶活性，降低了鹽對(duì)細(xì)胞質(zhì)膜的傷害，從而表現(xiàn)為對(duì)鹽環(huán)境的適應(yīng)性。 5．本研究篩選到能耐1．25％NaCl的東方百合耐鹽突變體，遠(yuǎn)高于東方百合原品種的耐鹽臨界濃度（0．75％），耐鹽性高。