臨床基因擴增實驗室驗收要求和要點ppt課件

1、臨床基因擴增檢驗實驗室驗收要求和要點,寧夏回族自治區(qū)人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗診斷中心 杜宗孝 2016.08,2,臨床基因擴增檢驗實驗室申報及驗收程序,二級以上醫(yī)院,,填寫《臨床基因擴增檢驗實驗室設(shè)置申請書》,,,,省衛(wèi)計委醫(yī)政處,相應(yīng)的衛(wèi)生行政部門,,省臨床檢驗中心初步技術(shù)審核,,合格者開始試運行（三個

2、月），同時報省衛(wèi)計委備案,,驗收合格后，授予驗收合格證書（證書有效期五年）,,（省級醫(yī)療機構(gòu)）,（地、市(縣)級醫(yī)療機構(gòu)）,3,驗收依據(jù),《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》 衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號臨床基因擴增檢驗實驗室（血站核酸檢測）工作導(dǎo)則《臨床基因擴增檢測實驗室技術(shù)驗收報告》,4,為什么要進行驗收？,方法敏感技術(shù)要求高存在問題

3、多假陰性、假陽性不規(guī)范人員素質(zhì),5,驗收要達到的目的,保證檢測質(zhì)量防止實驗室污染建立LAB內(nèi)部質(zhì)量管理模式嘗試強制性實驗室認可,6,9,PCR實驗室的空氣流向,臨床基因擴增檢驗實驗室的空氣流向可按照試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)進行，防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前的區(qū)域?？砂凑諒脑噭﹥Υ婧蜏?zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進行?？赏ㄟ^安裝排風(fēng)扇、負壓排風(fēng)裝置或其他可行的方

4、式實現(xiàn)。,10,PCR實驗室工作基本原則,進入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照單一方向進行 各工作區(qū)域必須有明確的標(biāo)記，不同工作區(qū)域內(nèi)的 設(shè)備、物品不得混用。不同工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出。實驗室的清潔應(yīng)當(dāng)按試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進行。不同的實驗區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具以防止交叉污染。,PCR實驗室工作基本原則,工作結(jié)束后，必須立即對工

5、作區(qū)進行清潔。實驗臺表面應(yīng)可耐受次氯酸鈉等化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應(yīng)當(dāng)方便有效。由于紫外照射的距離和能量對去污染的效果非常關(guān)鍵，因此可使用可移動紫外燈（254nm波長），在工作完成后調(diào)至實驗臺上60～90cm內(nèi)照射。由于擴增產(chǎn)物僅幾百或幾十堿基對（bp），對紫外線損傷不敏感，因此紫外照射擴增片段必須延長照射時間，最好是照射過夜。實驗室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序，所有操作符合《實驗室生物安全通用要求》（GB19

6、489-2008）。,12,PCR實驗室技術(shù)驗收內(nèi)容,實驗室設(shè)置和設(shè)備設(shè)施和環(huán)境人員設(shè)備管理和質(zhì)控物 檢測過程,標(biāo)本管理 記錄 報告 質(zhì)量控制 抱怨,等十章共三十七條,附件1 臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)驗收表,本片來自李金明教授,臨床基因擴增實驗室設(shè)置的一般原則,各區(qū)獨立注意風(fēng)向因地制宜方便工作,“十六字口訣”,本圖來自李金明教授 15,理想的PCR實驗室設(shè)置A,16,,理想的PCR實

7、驗室設(shè)置B,本圖來自李金明教授,17,本圖來自李金明教授,18,本圖來自李金明教授,本圖來自李金明教授,本圖來自李金明教授,A,B,錯誤的設(shè)置,21,臨床標(biāo)本的接收,應(yīng)在四個測定區(qū)域之外的地方或適合的地方。接收的標(biāo)本應(yīng)收集在原始容器中，不能接收從其它檢測如生化、免疫檢驗等分出來的標(biāo)本 在核酸提取時，由基因擴增檢驗實驗室人員將標(biāo)本帶入至標(biāo)本制備區(qū)。,23,試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū),功能：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應(yīng)混合液的準(zhǔn)備，以及離

8、心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。試劑準(zhǔn)備區(qū)的儀器設(shè)備主要有冰箱、微量加樣器、混勻器、可移動紫外燈、專用工作服和鞋、消耗品（帶濾芯吸頭、一次性手套等）、專用記錄本和記錄筆。加樣器應(yīng)定期校準(zhǔn)。,24,標(biāo)本制備區(qū),功能：核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴增反應(yīng)管。對于涉及臨床樣本的操作，應(yīng)符合生物安全二級實驗室防護設(shè)備、個人防護和操作規(guī)范的要求。,25,標(biāo)本制備區(qū),標(biāo)本制備區(qū)內(nèi)的儀器設(shè)備主要有生物安全柜 、加樣器、高速臺式冷凍離心

9、機、水浴箱和/或加熱模塊、混勻器、冰箱、可移動紫外燈、專用工作服和鞋、消耗品（帶濾芯吸頭、一次性手套等）、專用記錄本和記錄筆。加樣器應(yīng)定期校準(zhǔn)。如需處理大分子DNA，應(yīng)當(dāng)具有超聲波水浴儀。 加熱模塊和水浴應(yīng)使用已經(jīng)校準(zhǔn)的溫度計定期對所設(shè)置的溫度進行校準(zhǔn)。,27,擴增區(qū),功能：cDNA合成、DNA擴增及檢測。擴增區(qū)的主要儀器就是核酸擴增熱循環(huán)儀，該儀器需進行校準(zhǔn)。,28,產(chǎn)物分析區(qū),功能：擴增片段的進一步分析測定，如雜交、酶切電泳、變

10、性高效液相分析、測序等。本區(qū)是唯一能打開擴增后反應(yīng)管的地方。由于本工作區(qū)應(yīng)設(shè)置為負壓狀態(tài)，空氣流向為由外向內(nèi)，以防止擴增產(chǎn)物氣溶膠流出，故本區(qū)可無緩沖間。本區(qū)所使用的儀器設(shè)備可能有酶標(biāo)儀、洗板機、加樣器和水浴箱、測序儀等。酶標(biāo)儀應(yīng)定期校準(zhǔn)，洗板機每次使用完都應(yīng)進行清洗，其它如加樣器和水浴箱可按有關(guān)方法進行校準(zhǔn)。,核酸擴增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法（放射性核素標(biāo)記或非放射性核素標(biāo)記）、直接或酶切后瓊脂

11、糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、Southern轉(zhuǎn)移、核酸測序方法、質(zhì)譜分析等。本區(qū)是最主要的擴增產(chǎn)物污染來源，因此必須注意避免通過本區(qū)的物品及工作服將擴增產(chǎn)物帶出。在使用PCR-ELISA方法檢測擴增產(chǎn)物時，必須使用洗板機洗板，廢液必須收集至1 mol/L HCl中，并且不能在實驗室內(nèi)傾倒，而應(yīng)當(dāng)至遠離PCR實驗室的地方棄掉。用過的吸頭也必須放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理，如焚燒。,30,規(guī)定應(yīng)具有的SOP

12、,儀器設(shè)備的維護保養(yǎng)程序、儀器設(shè)備的校準(zhǔn)程序、儀器設(shè)備的操作程序、臨床標(biāo)本的收集程序、臨床標(biāo)本的處理（核酸純化）程序、臨床標(biāo)本的保存程序、核酸擴增及產(chǎn)物分析檢測的操作程序、,試劑的質(zhì)檢操作程序、消耗品購置驗收質(zhì)檢程序、廢棄物的處理程序、內(nèi)務(wù)管理程序、室內(nèi)質(zhì)量控制程序、抱怨處理程序。,31,實驗室設(shè)置和設(shè)備檢查重點,實驗室的規(guī)范化分區(qū)及相應(yīng)標(biāo)識儀器設(shè)備及在用標(biāo)識保持實驗室空氣流向的措施各區(qū)物品的專用標(biāo)識,實驗室

13、清潔SOP要點,目的:為了使實驗室臺面、地面和儀器設(shè)備在使用后，處于潔凈和無感染性狀態(tài)，以防止出現(xiàn)因儀器設(shè)備不潔影響檢測或儀器使用壽命；防止因?qū)嶒炇遗_面、地面和儀器設(shè)備的生物傳染危險性造成實驗室人員感染，以及防止實驗室交叉污染而出現(xiàn)假陽性結(jié)果等。 適用范圍應(yīng)包括實驗室地面、臺面和儀器設(shè)備等的清潔。 按實驗室臺面、地面和儀器設(shè)備分開來寫各自的具體清潔方法，要具體而又有可操作性。 應(yīng)規(guī)定工作人員在清潔時，必須按試劑準(zhǔn)備區(qū)?標(biāo)本制備區(qū)?

14、擴增(及產(chǎn)物分析)區(qū)方向進行，不得逆行 規(guī)定每一工作區(qū)域的清潔必須使用專用的清潔用具，不得混用 規(guī)定有潛在生物傳染危險性材料濺出時的消毒清潔方法,34,檢測技術(shù)人員要求---人員培訓(xùn)及能力評估,培訓(xùn)：符合資質(zhì)的人員還要接受實驗室生物安全以及廠家的上崗前儀器設(shè)備操作、維護及校準(zhǔn)等的培訓(xùn)。技術(shù)培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)覆蓋工作人員所涉及的所有工作范疇，培訓(xùn)的評估結(jié)果是確定人員是否適合其崗位的依據(jù)。能力評估：實驗室應(yīng)建立操作人員能力評估機制。每年至少實

15、施一次人員的能力評估，以評估其臨床基因擴增檢測工作的勝任程度。參照評估結(jié)果制定人員持續(xù)培訓(xùn)計劃。操作人員的操作誤差分析、檢測過程變更可作為培訓(xùn)需求納入培訓(xùn)活動，需記錄人員的能力評估過程。,35,應(yīng)有培訓(xùn)和能力評估的記錄,37,設(shè)備管理,所有設(shè)備應(yīng)得到正確維護，應(yīng)有設(shè)備維護程序文件；加樣器、溫度計、擴增儀等設(shè)備應(yīng)有明顯標(biāo)識表明其校準(zhǔn)狀態(tài)；實驗室應(yīng)保存每一臺儀器設(shè)備的檔案材料，對檔案材料的具體內(nèi)容作詳細規(guī)定。,檢測系統(tǒng)的確認、運行與維護

16、,檢測系統(tǒng)的確認 實驗室必須實施檢測系統(tǒng)的確認活動。確認活動包括檢測系統(tǒng)購置前的設(shè)計確認，使用前的安裝確認、運行確認和性能確認，檢測系統(tǒng)使用后的性能監(jiān)控及再確認。除應(yīng)提供廠商的安裝確認報告之外，實驗室還應(yīng)對每個檢測系統(tǒng)進行分析靈敏度、重復(fù)性等性能進行驗證。,38,性能驗證：按檢測系統(tǒng)（包括試劑）說明書進行各指標(biāo)的復(fù)現(xiàn),40,檢 測 方 法,標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）：儀器設(shè)備操作和校準(zhǔn)程序；標(biāo)本收集處理程序；擴增檢測工作程

17、序；儀器試劑的選購和質(zhì)檢程序；消耗性材料的購買、驗收、質(zhì)檢和貯存程序。必須使用經(jīng)國家有關(guān)部門批準(zhǔn)的試劑和儀器.SOP應(yīng)現(xiàn)行有效及便于使用。,41,儀器設(shè)備的維護和校準(zhǔn)SOP,責(zé)任人維護和校準(zhǔn)的基本方面：光路、濾光片、波長、加熱模塊的清潔、具體的校準(zhǔn)點選擇（如加樣器的校準(zhǔn)體積點選擇、溫度計的校準(zhǔn)溫度點選擇等）、維護和校準(zhǔn)的具體方法。校準(zhǔn)合格的判斷標(biāo)準(zhǔn) 維護和校準(zhǔn)的間隔時間,42,試劑和消耗品的質(zhì)檢 SOP,試劑質(zhì)檢的基本方面，

18、如試劑的抗干擾能力（主要是針對提取試劑），即對溶血、脂血標(biāo)本擴增抑制作用的了解。可通過自行制備含已知量病毒核酸的不同程度溶血或脂血的標(biāo)本進行質(zhì)檢。如為定量檢測試劑，還應(yīng)包括檢測的重復(fù)性、線性范圍等的質(zhì)檢。如為定性檢測試劑，則應(yīng)重點考察測定下限，可用系列稀釋的含已知量靶核酸的血清標(biāo)本進行。 核酸提取用離心管質(zhì)檢的基本方面。 帶濾心吸頭的質(zhì)檢主要是濾心的密封性和抑制反應(yīng)的因素。,44,標(biāo) 本 管 理,本章包括五條。建立唯一編號識別系統(tǒng)

19、，避免標(biāo)本混淆；標(biāo)本接收時的狀態(tài)記錄；標(biāo)本的適用性和充分性；標(biāo)本貯存的標(biāo)準(zhǔn)操作程序及貯存溫度控制措施;標(biāo)本接收及安全處置程序；維護實驗室誠實性的必要措施。,臨床標(biāo)本的采集、運送、接收和保存 SOP,特定標(biāo)本采集的具體方法步驟 明確規(guī)定標(biāo)本的采集容器要求 明確標(biāo)本的采集量 明確標(biāo)本采集后送到實驗室檢測所能容許的最大時間間隔，亦即標(biāo)本采集后，應(yīng)在多長時間內(nèi)送至實驗室 明確標(biāo)本采集后，在送至實驗室檢測前的保存方式和條件 明

20、確標(biāo)本從采集處運送至實驗室過程中所要求的運送條件 明確標(biāo)本接收時，簽收的程序、拒收的標(biāo)準(zhǔn)和標(biāo)本唯一編號的規(guī)則 規(guī)定標(biāo)本在實驗室內(nèi)的短期（應(yīng)有具體時間）和長期（應(yīng)有具體時間）保存條件和要求,46,47,實驗記錄及其管理 SOP,日常檢驗過程中應(yīng)記錄的基本內(nèi)容的規(guī)定，如儀器設(shè)備操作、維護和校準(zhǔn)過程及有關(guān)數(shù)據(jù)；檢驗試劑來源和批號；檢驗標(biāo)本的來源和唯一編號；試劑的配制；實驗環(huán)境條件的控制記錄；實驗室清潔的記錄；質(zhì)控的記錄；原始檢測數(shù)據(jù)及其推

21、導(dǎo)記錄等 對實驗記錄者的簽名方式的規(guī)定和要求 實驗記錄管理的基本方面：指定專門的管理人；有專門的保存處如柜子等；記錄的登記歸檔方法；記錄的借閱及銷毀記錄；記錄保存的時間；電子記錄的備份保存具體方法及保存時間等,報 告,檢測結(jié)果的報告應(yīng)準(zhǔn)確、清晰和客觀；定性測定報告“陰性”或“陽性”；定量測定則以拷貝數(shù)/ml或IU/ ml報告；避免二者之間的混淆；每份報告應(yīng)包括以下信息：標(biāo)題、唯一標(biāo)識、檢測標(biāo)本說明、標(biāo)本特性和狀態(tài)、標(biāo)本接收

22、日期和檢測日期、檢測方法、檢測和校核人員簽字及發(fā)出日期、參考結(jié)果或范圍；如對報告有效性有疑問，實驗室應(yīng)立即通知臨床相關(guān)科室予以改正；用電話、傳真、電子郵件報告結(jié)果時的保密原則。,50,報 告？,通常報告存在的問題： 唯一標(biāo)識、標(biāo)本特性和狀態(tài)、標(biāo)本接收日期、檢測方法、校核人員簽字,51,52,室內(nèi)質(zhì)量控制 SOP,明確室內(nèi)質(zhì)控物（陽性和陰性）的來源及濃度 明確所選用的質(zhì)控方法 明確失控的判斷標(biāo)準(zhǔn)或所采用的失控規(guī)則

23、 明確失控后的分析及處理措施,參加室間質(zhì)量評價 SOP,明確規(guī)定室間質(zhì)評樣本的接收記錄方式、保存條件及實驗編號規(guī)則 明確室間質(zhì)評樣本的檢測流程，要強調(diào)的是，室間質(zhì)評樣本應(yīng)以與臨床標(biāo)本相同的方式處理和檢測 明確室間質(zhì)評樣本的報告流程，即填寫、復(fù)核和簽發(fā)如何進行，由誰負責(zé) 明確對返回結(jié)果的分析流程和責(zé)任人 明確室間質(zhì)評檢測失敗的原因分析流程 明確如果測定準(zhǔn)確性出現(xiàn)問題后，如何針對性采取措施的流程,54,55,,,,56,,57,

24、投訴處理 SOP,明確投拆第一接觸人對投拆的處理流程，即如何記錄、如何針對相關(guān)投訴的進一步處理程序、是否需要報告和如何報告、以及如何向投拆人返回處理意見等。可將投訴分為不同類如對檢驗結(jié)果正確性、服務(wù)態(tài)度、報告單填寫錯誤等分別編寫處理流程 投拆有效時的如何改進和采取何種措施的具體流程。應(yīng)非常具體并具有可操作性,58,實驗室的日常工作管理,工 作 項 目 核 查 點水

25、浴箱、微量恒溫器（加熱模塊） □校準(zhǔn)及記錄溫度 次氯酸鈉溶液 □新鮮配制生物安全柜 □先起動運行30分鐘后再開始工作 室內(nèi)質(zhì)控 弱陽性質(zhì)控（定性）

26、 □有 低、中、高濃度質(zhì)控（定量） □有 陰性質(zhì)控：原樣本 □有 經(jīng)歷提取過程的空管 □有 僅含擴增反應(yīng)混合液管 □有實驗臺面

27、 □使用后用次氯酸鈉溶液消毒， 再用70%乙醇清潔 □紫外照射加樣器、離心機

28、 □使用后用次氯酸鈉溶液消毒， 再用70%乙醇清潔實驗室各區(qū) □遵循單一工作流向

29、 □紫外照射,59,臨床PCR檢驗流程記錄表 檢驗日期 檢驗項目： 擴增儀中保存文件名： 使用說明：1．本記錄表須嚴(yán)格遵循試劑準(zhǔn)備區(qū)?標(biāo)本制備區(qū)?擴增區(qū)（產(chǎn)物分析區(qū)）單一流向移動，嚴(yán)禁逆向移動。2．各項工作執(zhí)行后，在相應(yīng)敘述前的“?”內(nèi)打“?”。3．本記錄表最后與

30、相應(yīng)的標(biāo)本接收記錄等歸檔保存于擴增區(qū)的專用文件柜內(nèi)，以備查找。,實驗前準(zhǔn)備? 試劑在有效期內(nèi) ? 擴增儀、加樣器和溫度計在校準(zhǔn)的有效 1 期內(nèi)? 生物安全柜的濾膜在使用有效期內(nèi) ? 消毒溶液在有效期內(nèi)? 沖眼器內(nèi)無菌生理鹽水在有效期內(nèi) ? 離心管、帶濾心吸頭質(zhì)檢合格

31、 操作者：,60,試劑準(zhǔn)備區(qū)（1區(qū)）實驗前 ： ? 打開通風(fēng)設(shè)備 ? 實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭）? 冰箱溫度：冷藏室（2~8℃） ℃； 冷凍室（?18℃?2℃）

32、 ℃? 實驗室溫度： ℃（允許范圍：10~30℃）；相對濕度： （允許范圍：30%~70%）PCR試劑來源： （可直接列出有關(guān)廠家名稱） 批號： 檢驗項目： 本次實驗用量： 人份，剩余量： 人份。其他有關(guān)試劑配制：? 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制1%含氯消毒液 毫升

33、；? 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制4％NaOH溶液 毫升；? 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制0.1%焦磷酸二乙酯 毫升；? 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制 毫升；? 其他： 儀器設(shè)備使用：離心機：? 正常 ? 不正常 振蕩器：? 正常 ? 不正

34、常實驗后：? 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面、加樣器和離心機，并進行紫外照射30分鐘以上。? 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。 操作者：,61,標(biāo)本制備區(qū)（2區(qū)）實驗前： ? 打開通風(fēng)設(shè)備 ? 實驗臺面清潔（水或70

35、%酒精擦拭）? 冰箱（柜）溫度：冷藏室（2~8℃） ℃； 冷凍室（?18℃?2℃） ℃? 實驗室溫度： ℃（允許范圍：10~30℃）；相對濕度： （允許范圍：30%~70%）陽性室內(nèi)質(zhì)控物來源： 濃度及批號： 擴增位置： 陰性室內(nèi)質(zhì)控物來源： 批號：

36、 擴增位置： 所取理的標(biāo)本（對應(yīng)標(biāo)本接收的唯一編號）及擬擴增位置：1917252101826311192741220285132129614223071523318162432核酸提取及加樣過程：按XXX（列出編號）SOP進行。儀器設(shè)備使用： 生物安全柜：? 正常 ? 不正常

37、 恒溫儀溫度校準(zhǔn)： ℃離心機：? 正常 ? 不正常 振蕩器：? 正常 ? 不正常實驗后：? 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面及儀器設(shè)備。? 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。 操作者：,62,63,64,姓 名

38、 性 別 病歷號 采集時間 接收時間 標(biāo)本特性 拒收原因 ?男 ?女 月 日 時 月 日 時 ?全血 ? （列出原因號） ?男 ?女

39、 月 日 時 月 日 時 ?全血 ? （列出原因號） ? ? ?

40、?男 ?女 月 日 時 月 日 時 ?全血 ? （列出原因號） 標(biāo)本拒收原因：1．患者姓名不符。 2．標(biāo)本容器為非不含任何添加劑的真空采血管。3．采血量低于2 ml。 4． 標(biāo)本采用肝素抗

41、凝。5. 容器破損。 6．標(biāo)本采集后送檢時間超過6小時。7．標(biāo)本重度溶血。 8．標(biāo)本脂血。9．標(biāo)本不正確。 10．其他：,臨床PCR實驗室標(biāo)本拒收記錄,65,分析你已做的,每次實驗結(jié)果的分析 表象與真象多次實驗結(jié)果的綜合分析 趨勢的內(nèi)在含義儀器設(shè)備的使用情況分析 維護與校準(zhǔn)周期的有效性,66,技術(shù)驗收的其它內(nèi)容,就有關(guān)實驗室質(zhì)量管理方面與具體工作有關(guān)的內(nèi)容進

42、行口試和/或筆試；現(xiàn)場測試多為已知HBV DNA和/或HCV RNA血清盤，看實際檢測和結(jié)果報告。,67,驗收基本程序,材料初審：實驗室設(shè)置、人員、儀器設(shè)備、試劑、標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）文件驗收準(zhǔn)備：給擬委派專家發(fā)出技術(shù)驗收任務(wù)書、被驗收單位發(fā)出驗收通知，由省臨床檢驗中心協(xié)調(diào)?，F(xiàn)場驗收,68,實驗室技術(shù)人員資格審定,衛(wèi)生技術(shù)人員資格證書 有資質(zhì)單位培訓(xùn)證書,69,70,實驗室的日常工作管理,工 作 項 目

43、 核 查 點水浴箱、微量恒溫器（加熱模塊） □校準(zhǔn)及記錄溫度 次氯酸鈉溶液 □新鮮配制生物安全柜 □先起動運行30分鐘后再開始工作 室內(nèi)質(zhì)控 弱陽性質(zhì)控（

44、定性） □有 低、中、高濃度質(zhì)控（定量） □有 陰性質(zhì)控：原樣本 □有 經(jīng)歷提取過程的空管 □有 僅含擴增反應(yīng)混合液管

45、 □有實驗臺面 □使用后用次氯酸鈉溶液消毒， 再用70%乙醇清潔

46、 □紫外照射加樣器、離心機 □使用后用次氯酸鈉溶液消毒， 再用70%乙醇清潔實驗室各區(qū)

47、 □遵循單一工作流向 □紫外照射,71,驗收原則－抽樣,對實驗室技術(shù)人員采用抽樣問詢對實驗室的記錄采取抽樣檢查的方法進行抽取有代表性的部份進行檢查,抽樣存在有不全面的風(fēng)險,72,驗收方法,觀察（實驗室設(shè)置、儀器設(shè)備、環(huán)境和實驗操作等是否規(guī)范）； 審核文件（實驗室SOP的規(guī)范和可操作性）

48、 詢問（考核實驗室工作人員對實驗室工作規(guī)范化的熟悉程度）或筆試（現(xiàn)場筆試） 現(xiàn)場實驗（要求其按常規(guī)檢測臨床標(biāo)本的程序進行，看其是否按實驗室所制定的程序進行和記錄）。,73,觀 察,實驗室設(shè)置實驗室環(huán)境儀器、用具實驗操作制度措施落實等,74,審核－文件,制度程序（包括SOP）檔案記錄,75,詢問－溝通,有關(guān)硬件有關(guān)軟件,76,考核－口試或筆試,對實驗室制度、程序等熟悉程度，如 有患者家屬要求電話告知

49、XXX丙肝的PCR檢測結(jié)果，你會怎樣去做？,對實驗技術(shù)的熟悉程度，如 為什么在HCV RNA檢測中要加水對照？,77,現(xiàn)場實驗,考核過程考核結(jié)果,78,現(xiàn)場驗收核心,實驗室設(shè)置及儀器設(shè)備配備的科學(xué)性、合理性和充分性；文件制定的科學(xué)性、合理性和可操作性；實際運行情況和相關(guān)記錄；,79,其它有關(guān)技術(shù)驗收表格,驗收評審意見匯總表整改要求需要說明的其它問題,80,現(xiàn)場驗收后的意見交換,對于在驗收過程中發(fā)現(xiàn)的問題與實驗

50、室負責(zé)人交換意見驗收組將擬定的最后結(jié)論向被驗收實驗室通報。,81,缺陷分布表,1.實驗室設(shè)置和設(shè)備4.4%2.設(shè)備和環(huán)境18.1%3.人員7.8%4.設(shè)備管理19.9%5.檢測方法12.5%,6.標(biāo)本管理14.5%7.記錄9.3%8.報告3.7%9.質(zhì)量控制5.9%10.抱怨3.9%,82,主要缺陷,2.1 工作區(qū)，能源，溫控，通風(fēng)等占22項2.5 試劑管理，生物防護等占31項4.2 加樣器，擴增儀和酶標(biāo)儀等無標(biāo)識

51、占37項4.3 加樣器，擴增儀和酶標(biāo)儀等檔案不全占34項5.1 質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)程序不完善占31項6.2 標(biāo)本收集、處理、儲存或安全處置程序不健全占31項7.1 適合自身實際困難規(guī)章制度不完善占27項9.1 質(zhì)量控制操作程序不健全占23項,83,存在的問題,對設(shè)置要求理解不夠深入文件準(zhǔn)備不夠充分文件容易出現(xiàn)雷同文件寫的“太好”，給實施帶來困難,84,解決方法,統(tǒng)一認識改進認可方式規(guī)范工作程序跟蹤技術(shù)發(fā)展,85,統(tǒng)一認識,實

52、驗室分區(qū)－使用全自動擴增檢測儀的原則上有獨立的三間房即可；冰箱主要控制適宜溫度；不同區(qū)域的溫濕度監(jiān)測、能源保證要與實驗要求相一致；紫外燈的目的是保證有效消毒；,86,改進認可方式,實驗室可試運行3個月后，再派專家組現(xiàn)場審核由原有審核實驗室設(shè)置和文件基礎(chǔ)上，增加對實驗室運行狀態(tài)的審核；,87,缺陷分類,嚴(yán)重缺陷1、實驗室設(shè)置不符合要求2、人員未經(jīng)過培訓(xùn)3、儀器、試劑未經(jīng)批準(zhǔn)4、未參加室間質(zhì)量評價5、未開展室內(nèi)質(zhì)量控制,8