實驗二 淀粉質(zhì)原料中粗淀粉的測定

1、發(fā)酵分析酵分析實驗實驗指導(dǎo)西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院第1頁實驗二實驗二淀粉質(zhì)原料中粗淀粉的測定淀粉質(zhì)原料中粗淀粉的測定一、實驗?zāi)康囊?、實驗?zāi)康?、掌握廉愛農(nóng)（LaneEynon）法測定還原糖的原理和方法；2、熟悉容量滴定過程。二、實驗原理二、實驗原理葡萄糖(或還原糖)能還原銅鹽類(以酒石酸鉀鈉銅為最顯著)為Cu2O紅色沉淀。主要反應(yīng)如下：1、淀粉經(jīng)水解成葡萄糖，葡萄糖中的醛基易被氧化，可用費林試劑測定葡萄糖的含量。(C6H10O5)

2、nnH2O酸或酶nC6H12O62、費林(Fehling)試劑是一種氧化劑，由甲液和乙液組成，甲液為硫酸銅(CuSO4)溶液，乙液為氫氧化鈉(NaOH)和酒石酸鉀鈉(NaKC4H4O6)溶液，平時甲液、乙液分別貯存，使用時等體積混合?；旌虾?，CuSO4和NaOH反應(yīng)，生成藍色的氫氧化銅(Cu(OH)2)沉淀。CuSO42NaOHCu(OH)2(藍色)Na2SO4生成的Cu(OH)2沉淀與酒石酸鉀鈉反應(yīng)，生成天藍色的酒石酸鉀鈉銅配合物，使

3、Cu(OH)2溶解。NaKC4H4O6Cu(OH)2NaKCuC4H2O6(天藍色)2H2O3、NaKCuC4H2O6配合物中的Cu2具有氧化性，當與還原糖共熱時，能使還原糖中的羰基氧化，而Cu2被還原生成一價的Cu2O(紅色)沉淀。2NaKCuC4H2O6C6H12O62H2O2NaKC4H4O6C6H12O7Cu2O(紅色)4、反應(yīng)終點用次甲基藍(藍色)指示劑顯示。因次甲基藍氧化能力較Cu2弱，故待Cu2全部還原后，過量一滴還原糖立

4、即使次甲基藍還原成次甲基藍隱色體(無色)，溶液藍色消失以示終點。C6H12O6次甲基藍（藍色）H2OC6H12O7次甲基藍隱色體（無色）HCl三、實驗材料與試劑三、實驗材料與試劑1、樣品玉米粉2、器材電子天平；電熱恒溫水浴鍋；回流裝置；酸堿滴定裝置；調(diào)溫電熱套；pH試紙；三角瓶。3、試劑CuSO45H2O，酒石酸鉀鈉，NaOH，HCl溶液；次甲基藍；葡萄糖。發(fā)酵分析酵分析實驗實驗指導(dǎo)西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院第3頁6、計算：1)費林

5、試劑校正值先求得10ml費林試劑相當?shù)钠咸烟琴|(zhì)量F（g）:F=cV式中：c標準葡萄糖濃度，gml；V消耗標準葡萄糖溶液的總體積，ml；再從附表1中查得Vml時相當?shù)钠咸烟琴|(zhì)量F0(g)，費林試劑校正值f為：f=FF0=cVF02)水解液中所含葡萄糖量從附表1中查得10mL費林試劑消耗的水解糖液體積V2相當于100mL水解糖液中所含葡萄糖量G(mg)，則1ml水解液中所含葡萄糖量為G100，再乘以費林試劑校正值，即為1ml水解液中實際含葡

6、萄糖量(g)。1ml水解液中實際含葡萄糖量=G10011000f3)粗淀粉含量粗淀粉=G10011000f5001W0.9100%式中：W樣品質(zhì)量，g；500樣品稀釋體積，ml；0.9葡萄糖與淀粉的換算系數(shù)。五、注意事項五、注意事項1、谷物、薯類等淀粉質(zhì)原料宜用鹽酸水解法；而含多縮戊糖、半纖維素較高的殼皮原料，如麩皮、稻殼、谷糠、高粱等宜用酶法水解。2、滴定必須在沸騰條件下進行，因為這樣可加快還原糖與Cu2的反應(yīng)速度，同時防止空氣進入。

7、沸騰后繼續(xù)滴定至終點的毫升數(shù)應(yīng)控制在0.51mL內(nèi)，否則應(yīng)重新滴定。3、試樣經(jīng)酸水解后應(yīng)立即冷卻，并用堿中和，因在強酸性或強堿性溶液中，會有部分糖被分解。4、樣品液中的還原糖濃度不宜過高或過低，根據(jù)預(yù)備試驗結(jié)果，應(yīng)將樣品液稀釋至還原糖的含量在1左右為宜。5、滴定至終點藍色褪去后，就不應(yīng)再滴定，因次甲基藍指示劑被還原褪色后，當接觸空氣時，又會被氧化重現(xiàn)藍色。6、次甲基藍也是一種氧化還原性物質(zhì)，過早加入與過量加入均會造成滴定誤差。7、滴定速