小鼠室旁核內雌激素受體與催產素、加壓素表達的免疫組化研究

1、1小鼠室旁核內雌激素受體與催產素、加壓素表達的免疫組化研究作者：趙承軍，鄧其躍，張東梅，蔡文琴，阮懷珍，張吉強【摘要】目的研究雌激素的核受體ERα和ERβ以及催產素、加壓素在成年雌性小鼠下丘腦室旁核內的表達。方法采用硫酸鎳銨增強顯色的免疫組化SP法檢測ERα、ERβ、催產素和加壓素在室旁核內的表達。結果雌激素的兩種核受體在室旁核內都有表達，但是以ERβ為主（P＜0.001），其免疫陽性產物均在細胞核內，未見核外免疫陽性反應。催

2、產素的免疫陽性產物主要在細胞核周圍的胞漿即核周質內，而加壓素的免疫陽性物質除了在核周質內有很強的反應外，在突起內也可見很強的免疫反應。ERα的免疫陽性胞體主要在大細胞部內側，而ERβ、催產素和加壓素的免疫陽性胞體主要在背側帽部或大細胞部的外側。結論室旁核內兩種雌激素受體可能都參與了對催產素和加壓素的調節(jié)，但ERβ可能發(fā)揮了主要的調節(jié)作用?！娟P鍵詞】雌激素受體；催產素；加壓素；室旁核；小鼠Abstract:ObjectiveTost

3、udytheexpressionsofthetwoestrogenrecepts(ERαERβ)oxytocinvasopressinintheparaventricularnucleus(PVN)ofmice.MethodsTheexpressionsofERαERβoxytocinvasopressinweredetectedusingnickelammoniumsulfateintensifiedimmunohistoch

4、emicalSPmethod.ResultsBothofthetwoERs(ERαERβ)immuneactivitiesweredetectedinthecellnucleiofthePVNwhileERβshowedstrongerstaining.Positivestainingofoxytocinvasopressinwereinthecytosoloftheneuronsthefmergavelessintensitym

5、anypositivevaricositiesfvasopressinwerealsonoticedinneurite.MostofERαwerefoundinthemagnocellularpartotherswerefoundoutthemagnocellularpartdsalcupofthePVN.ConclusionBothERsmightinvolvetheaccommodationofPVNbutERβmightbet

6、hepredominantERinmediatingthisER31.3免疫組化染色硫酸鎳銨增強顯色的免疫組化技術按文獻［5］進行。簡述如下：切片經(jīng)3%H2O2封閉15min，PBS漂洗后用正常血清封閉30min，然后加入一抗（ERα1∶1000；ERβ1∶1000；OT1∶8000；VP1∶8000）于37℃孵育1h后轉4℃孵育48h。PBS漂洗過夜后加入各自對應的二抗，室溫孵育1h，PBS漂洗后用SPHRP孵育1h，最后用硫酸

7、鎳銨DAB顯色5min，梯度酒精脫水，二甲苯透明后中性樹膠封片。1.4圖像分析與數(shù)據(jù)處理所有染色切片經(jīng)Leica顯微攝像系統(tǒng)采集后，用ImageProPlus軟件進行光密度（OD）分析，每只小鼠隨機測量5張切片，共計5只小鼠。用Excel軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析處理。2結果兩種雌激素受體在正常雌性小鼠PVN內的免疫陽性產物都位于細胞核內，未見核外陽性產物。ERα免疫陽性細胞數(shù)量較多但是染色淺，主要見于大細胞部的內側（圖1a）；ERβ