實驗4 微生物菌落的觀察

1、實驗四 微生物菌落的觀察,目的要求實驗原理實驗材料實驗程序結(jié)果與思考題,目 的 要 求,學(xué)會觀察、識別各種不同的微生物菌落的方法。 掌握平板菌落計數(shù)的方法，運用所學(xué)的知識詳細(xì)的描述所分離平板上的各種微生物菌落。學(xué)習(xí)并掌握斜面接種的操作技術(shù)。,實 驗 原 理,,對于一些難區(qū)別的菌落還應(yīng)該借助顯微鏡來觀察其細(xì)胞形態(tài)以進一步做出正確的判斷。,實 驗 材 料,實驗三所作的平板培養(yǎng)物： A，在細(xì)菌培養(yǎng)基上

2、生長的各種菌落； B，在霉菌培養(yǎng)基上生長的各種菌落。實驗二所作的試管斜面，酒精燈、接種環(huán)等。菌種：大腸桿菌E.coli枯草桿菌B.subtilis枯草桿菌B.subtilis,實 驗 程 序Ⅰ（觀察描述菌落特征）,運用所掌握的各種微生物菌落的特點，觀察、識別、描述所做樣品的兩個平板上的所有菌落,并將結(jié)果填入表1中。,常用的菌落描述詞語： 大?。捍蟆⒅?、小、針尖狀 形狀：圓形、隆起、扁平、

3、假根狀、不規(guī)則狀等； 邊緣情況：整齊、波形、裂葉狀、鋸齒狀等 表面情況：干燥、濕潤、光滑、皺褶、顆粒狀、龜裂狀等；,表1 平板菌落特征描述,某些有代表性的菌落圖片：,細(xì)菌,酵母菌,啤酒酵母,菌落一般較細(xì)菌菌落大且厚，表面濕潤，粘稠，易被挑起，多為乳白色、土黃色，少數(shù)呈紅色。,常見的酵母菌的菌落,菌落形態(tài)較大，質(zhì)地一般比放線菌疏松，外觀干燥，不透明，呈現(xiàn)或緊或松的蛛網(wǎng)狀、絨毛狀或棉絮狀；菌落與培

4、養(yǎng)基的連接緊密，不易挑取，菌落正反面的顏色和邊緣與中心的顏色常不一致等。,霉菌,霉菌的菌落,青霉屬 毛霉屬,定義:根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落是由一個單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征而設(shè)計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細(xì)胞。統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計數(shù)。 對土壤中的微生物進行計數(shù)

5、,將結(jié)果填入表2中。,實 驗 程 序Ⅱ（平板菌落計數(shù)）,表2 土壤中微生物計數(shù)結(jié)果,計數(shù)方法: 每克土壤的菌數(shù)=同一稀釋度幾次重復(fù)的菌落平均數(shù)×10×稀釋倍數(shù),計算結(jié)果時，常按下列標(biāo)準(zhǔn)從接種后的3個稀釋度中選擇一個合適的稀釋度，求出每克菌劑中的含菌數(shù)。    （1）同一稀釋度各個重復(fù)的菌數(shù)相差不太懸殊。    （2）細(xì)菌、放線菌、酵母菌以每

6、皿30—300個菌落為宜，霉菌以每皿10—100個菌落為宜。選擇好計數(shù)的稀釋度后，即可統(tǒng)計在平板上長出的菌落數(shù)，統(tǒng)計結(jié)果按下式計算。,實 驗 程 序Ⅲ（無菌操作技術(shù) ）,在酒精燈火焰旁操作，將所給的兩種菌種無菌操作，轉(zhuǎn)接到大試管斜面，并貼標(biāo)簽，培養(yǎng)。,點燃酒精燈左手夾住兩試管：斜面向上，45～0度角。灼燒接種環(huán)右手拔棉塞，管口過火取菌標(biāo)記培養(yǎng),,,將觀察到的菌落特征填入表1中。將平板菌落計數(shù)的結(jié)果填入表2中。斜面