武漢大學(xué)-微生物實(shí)驗(yàn)大綱

1、三.教學(xué)學(xué)時(shí)分配與安排本課程講授按每周4學(xué)時(shí)安排，全學(xué)期共16周。實(shí)驗(yàn)一：1.本學(xué)期教學(xué)計(jì)劃安排及要求；2.環(huán)境微生物的檢測(cè)；3.滅菌器皿的準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)二：1.微生物菌落形態(tài)的觀察；2.細(xì)菌簡(jiǎn)單染色及個(gè)體形態(tài)的觀察實(shí)驗(yàn)三：1.酸奶的制作；2.革蘭氏染色(革蘭氏陽(yáng)性菌、陰性菌)實(shí)驗(yàn)四：培養(yǎng)基的配制實(shí)驗(yàn)五：神農(nóng)架自然保護(hù)區(qū)土壤樣品中微生物的分離與純化實(shí)驗(yàn)六：1.放線菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)（試管法）；2.霉菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察(壓片法等)實(shí)驗(yàn)七：1.酵母菌死活

2、染色及形態(tài)觀察；2.細(xì)菌的鞭毛染色與運(yùn)動(dòng)性觀察實(shí)驗(yàn)八：1.平板計(jì)數(shù)法；2.光電計(jì)數(shù)法；3.直接計(jì)數(shù)法(顯微鏡)實(shí)驗(yàn)九：1.大分子物質(zhì)的水解試驗(yàn)；2.糖發(fā)酵試驗(yàn)；3.IMViC試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十：1.化學(xué)因素；2.生物因素；3.物理因素實(shí)驗(yàn)十一十二：1.東湖水體中微生物的檢測(cè)；2.純凈水中微生物的檢測(cè)；3.自來(lái)水中微生物的檢測(cè)；4.酸奶中細(xì)菌的檢查實(shí)驗(yàn)十三：DNA轉(zhuǎn)化(固體轉(zhuǎn)化法)實(shí)驗(yàn)十四：Ames試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十五：1.實(shí)驗(yàn)問(wèn)題解答；2.本學(xué)期教學(xué)總

3、結(jié)實(shí)驗(yàn)十六：期末考試四教學(xué)內(nèi)容和要求實(shí)驗(yàn)一[目的要求]1.證明實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與體表存在微生物。2.比較來(lái)自不同場(chǎng)所與不同條件下細(xì)菌的數(shù)量和類型。3.觀察不同類群微生物的菌落形態(tài)特征。4.體會(huì)無(wú)菌操作的重要性。[實(shí)驗(yàn)原理]平板培養(yǎng)基含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)成分，當(dāng)取自不同來(lái)源的樣品接種于培養(yǎng)基上，在合宜溫度下培養(yǎng)，12天內(nèi)每一菌體即能通過(guò)很多次細(xì)胞分裂而進(jìn)行繁殖，形成一個(gè)可見的細(xì)胞群體的集落，稱為菌落。每一種細(xì)菌所形成的菌落都有它自己的特點(diǎn)，

4、例如菌落的大小，表面干燥或濕潤(rùn)、隆起或扁平、粗糙或光滑，邊緣整齊或不整齊，菌落透明或半透明或不透明，顏色以及質(zhì)地疏松或緊密等。因此，可通過(guò)平板培養(yǎng)來(lái)檢查環(huán)境中細(xì)菌的數(shù)量和類型。[教學(xué)內(nèi)容]實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和人體表面微生物的檢查實(shí)驗(yàn)二[目的要求]1.明確培養(yǎng)基的配制原理。2.通過(guò)對(duì)基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配制，掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟。[實(shí)驗(yàn)原理]牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基，由于這種生蒸汽。從而使

5、沸點(diǎn)增高，得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。[教學(xué)內(nèi)容]高壓蒸汽滅菌實(shí)驗(yàn)七[目的要求]了解紫外線滅菌的原理和方法[實(shí)驗(yàn)原理]紫外線滅菌是用紫外線燈進(jìn)行的。波長(zhǎng)為200300nm的紫外線都有殺菌能力，其中以260nm的殺菌力最強(qiáng)。在波長(zhǎng)一定的條件下，紫外線的殺菌效率與強(qiáng)度和時(shí)間的乘積成正比。紫外線殺菌機(jī)制主要是因?yàn)樗T導(dǎo)了胸腺嘧啶二聚體的形成和DNA鏈的交聯(lián)，從而抑制了DNA的復(fù)制。另一方面，由于輻射能使空氣

6、中的氧電離成［O］，再使O2氧化生成自臭氧(O3)或使水(H2O)氧化生成過(guò)氧化氫(H2O2)。O3和H2O2均有殺菌作用。[教學(xué)內(nèi)容]紫外線滅菌實(shí)驗(yàn)八[目的要求]了解過(guò)濾除菌的原理；掌握微孔濾膜過(guò)濾除菌的方法。[實(shí)驗(yàn)原理]過(guò)濾除菌是通過(guò)機(jī)械作用濾去液體或氣體中細(xì)菌的方法。根據(jù)不同的需要選用不同的濾器和濾板材料。此法除菌的最大優(yōu)點(diǎn)是可以不破壞溶液中各種物質(zhì)的化學(xué)成分，但由于濾量有限，所以一般只適用于實(shí)驗(yàn)室中小量溶液的過(guò)濾除菌。[教學(xué)內(nèi)容

7、]微孔濾膜過(guò)濾除菌實(shí)驗(yàn)九[目的要求]掌握倒平板的方法和幾種常用的分離純化微生物的基本操作技術(shù)。[實(shí)驗(yàn)原理]從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過(guò)程稱為微生物的分離與純化。常用的方法有：1).簡(jiǎn)易單細(xì)胞挑取法2).平板分離法。土壤是微生物生活的大本營(yíng)，它所含微生物無(wú)論是數(shù)量還是種類都是極其豐富的。因此土壤是微生物多樣性的重要場(chǎng)所，是發(fā)掘微生物資源的重要基地，可以從中分離、純化得到許多有價(jià)值的菌株。[教學(xué)內(nèi)容]微生物的分離與