有機磷殺蟲劑毒死蜱經(jīng)氧化脅迫誘導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜細胞凋亡及維生素C和E的聯(lián)合保護作用.pdf

1、有機磷殺蟲劑毒死蜱(CPF)在全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和公共衛(wèi)生項目中的廣泛使用，已經(jīng)引起了嚴(yán)重的環(huán)境污染和健康危害，包括急、慢性人類中毒。視網(wǎng)膜也是CPF作用的靶器官之一。但目前對其中毒機制還不十分明了。以前的研究主要側(cè)重于CPF對視網(wǎng)膜細胞中乙酰膽堿酯酶活性的抑制作用。本研究主要是探討CPF能否誘導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜細胞產(chǎn)生氧化脅迫并致其凋亡，而聯(lián)合應(yīng)用維生素C和E對CPF的視毒性是否有抑制作用。 試驗小鼠被隨機分成4組(每組20只)：對照組(

2、Control)；維生素C加維生素E處理組(VC+VE)；毒死蜱處理組(CPF)：和CPF加維生素C和維生素E處理組(CPF+VC+VE)。VC+VE組和CPF+VC+VE組用維生素C 250 mg/kg和維生素E150mg/kg預(yù)處理，皮下注射，每天1次，持續(xù)6天。其它組同時皮下注射生理鹽水。之后，CPF組和CPF+VC+VE組通過強迫飼喂給予CPF(63 mg/kg)，該劑量為半致死劑量的1/4。 在CPF處理24小時后，所

3、有的鼠麻醉后被殺死，摘除視網(wǎng)膜。部分視網(wǎng)膜被用來做電鏡標(biāo)本，觀察其細胞的形態(tài)學(xué)改變，以及用共聚焦顯微鏡檢測鈣離子濃度。部分視網(wǎng)膜被分離成單細胞懸液進行彗星電泳，AO/EB雙重染色，以及用流式細胞儀檢測細胞凋亡。剩余的視網(wǎng)膜被制成勻漿用來檢測丙二醛(MDA)含量，超氧化物歧化酶(SOD)活性，過氧化氫酶(CAT)活性，谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)活性和乙酰膽堿酯酶(AChE)活性。 結(jié)果顯示：CPF組小鼠視網(wǎng)膜細胞中產(chǎn)生了脂質(zhì)過氧

4、化，DNA損害程度增強，部分細胞發(fā)生凋亡，同時抗氧化酶SOD、CAT和GPX的活性降低，而抗氧化劑維生素C和E的聯(lián)合使用則可以明顯抑制CPF的這些細胞毒作用，這說明CPF所誘導(dǎo)的小鼠視網(wǎng)膜細胞凋亡確實是由氧化脅迫造成的。我們還觀察到，CPF還可以抑制小鼠視網(wǎng)膜細胞中的AChE活性，并促進其胞內(nèi)鈣離子濃度增加，而聯(lián)合應(yīng)用維生素C和E，對這些作用具有明顯和有效的抑制效果。 我們的結(jié)果說明：①有機磷殺蟲劑CPF可經(jīng)由氧化脅迫途徑誘導(dǎo)小