分子生物學(xué)常用溶液配制

1、1分子生物學(xué)常用溶液配制分子生物學(xué)常用溶液配制一、分子生物學(xué)常用一、分子生物學(xué)常用貯存液的配制存液的配制130%丙烯酰烯酰胺溶液胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1gN，N’亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補(bǔ)加水至終體積為100ml。用濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫。【注意】丙烯酰胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性并可以通過皮膚吸收，其作用具累積性。稱量丙烯酰胺

2、和亞甲雙丙烯酰胺時(shí)應(yīng)戴手套和面具?？烧J(rèn)為聚丙烯酰胺無毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)樗€可能會(huì)含有少量未聚合材料。一些價(jià)格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子，在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂（MB1Mallinckrodt），攪拌過夜，然后用Whatman1號(hào)濾紙過濾以純化之。在貯存期間，丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會(huì)緩慢轉(zhuǎn)化成丙烯酰和雙丙烯酸。240%丙烯酰烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA測(cè)序級(jí)）和20gN，

3、N’亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中。繼續(xù)按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理，但加熱溶解后應(yīng)以蒸餾水補(bǔ)足至終體積為1L?！咀⒁狻恳娚鲜雠渲?0%丙烯酰胺的說明40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測(cè)定。3放放線菌素菌素D溶液溶液【配制方法】把20mg放線菌素D溶解于4ml100%乙醇中，1:10稀釋貯存液，用100%乙醇作空白對(duì)照讀取OD440值。放線菌素D（分子量為1255）純品在水溶液中的摩爾消化系數(shù)為21，900，故而

4、1mgml的放線菌素D溶液在440nm處的吸光值為0.182，放線菌素D的貯存液應(yīng)放在包有箔片的試管中，保存于20℃?！咀⒁狻糠啪€菌素D是致畸劑和致癌劑配制該溶液時(shí)必須戴手套并在通風(fēng)櫥內(nèi)操作而不能在開放在實(shí)驗(yàn)桌面上進(jìn)行謹(jǐn)防吸入藥粉或讓其接觸到眼睛或皮膚。藥廠提供的作治療用途的放線菌素D制品常含有糖或鹽等添加劑。只要通過測(cè)量貯存液在440nm波長(zhǎng)處的光吸收確定放線菌素D的濃度，這類制品便可用于抑制自身引導(dǎo)作用。40.1molL腺苷三磷酸（

5、腺苷三磷酸（ATP）溶液）溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mgATP用0.1molLNaOH調(diào)至pH值至7.0，用蒸餾水定容1ml，分裝成小份保存于70℃510molL乙酸乙酸酰溶液溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后過濾除菌。610%過硫酸硫酸銨溶液溶液3130.5mollEDTA(pH8.0)溶液溶液【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉（EDTANa2H2O），在

6、磁力攪拌器上劇烈攪拌，用NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH值至8.0（約需20gNaOH顆粒）然后定容至1L，分裝后高壓滅菌備用?！咀⒁狻縀DTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調(diào)至接近8.0才能完全溶解。14溴化乙溴化乙錠（10mgml溶液）溶液）【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙錠，磁力攪拌數(shù)小時(shí)以確保其完全溶解，然后用鋁箔包裹容器或轉(zhuǎn)移至棕色瓶中，保存于室溫。【注意】小心：溴化乙錠是強(qiáng)誘變劑并有中度毒性，使用含有這種染料的溶液時(shí)務(wù)必

7、戴上手套，稱量染料時(shí)要戴面罩。152HEPES緩沖鹽溶液溶液【配制方法】用總量為90ml的蒸餾水溶解1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2PO42H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mollNaOH調(diào)節(jié)pH值至7.05，再用蒸餾水定容至100ml。用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成5ml小份，貯存于20℃。16IPTG溶液溶液【配制方法】IPTG為異丙基硫代βD半乳糖苷（分子量為238.3），在8ml蒸餾水

8、中溶解2gIPTG后，用蒸餾水定容至10ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于20℃。171molL乙酸乙酸鎂溶液溶液【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸鎂，用水定容至1L過濾除菌。181molLMgCl2溶液溶液【配制方法】在800ml水中溶解203.4gMgCl26H2O，用水定容至1L，分裝成小份并高壓滅菌備用?！咀⒁狻縈gCl2極易潮解，應(yīng)選購小瓶（如100g）試劑，啟用新瓶后勿長(zhǎng)期存放。19