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1、1有關(guān)基因工程中的酶切問(wèn)題有關(guān)基因工程中的酶切問(wèn)題一、單選題:1已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn),如圖中箭頭所指,如果該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷,則會(huì)產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長(zhǎng)度的DNA片段?,F(xiàn)在多個(gè)上述線性DNA分子,若在每個(gè)DNA分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的DNA片段種類數(shù)是A3B4C9D122現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)
2、(bp)的DNA分子,用限制性核酸內(nèi)切酶EcI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp,用KpnI單獨(dú)酶切得到400bp和600bp兩種長(zhǎng)度的DNA分子,用EcI、KpnI同時(shí)酶切后得到200bp和600bp兩種長(zhǎng)度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是的3.現(xiàn)有一長(zhǎng)度為3000堿基對(duì)(bp)的線性DNA分子,用限制性核酸內(nèi)切酶酶切后,進(jìn)行凝膠電泳,使降解產(chǎn)物分開(kāi)。用酶H單獨(dú)酶切,結(jié)果如圖1;用酶B單獨(dú)酶切,結(jié)果如圖2;用酶H和酶B
3、同時(shí)酶切,結(jié)果如圖3。該DNA分子的結(jié)構(gòu)及其酶切圖譜是()4在DNA測(cè)序工作中,需要將某些限制性內(nèi)切核酸酶的限制位點(diǎn)在DNA上定位,使其成為DNA分子中的物理參照點(diǎn)。這項(xiàng)工作叫做“限制酶圖譜的構(gòu)建”。假設(shè)有以下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn):用限制酶HindⅢ,BamHⅠ和二者的混合物分別降解一個(gè)4kb(1kb即1千個(gè)堿基對(duì))大小的線性DNA分子,降解產(chǎn)物分別進(jìn)行凝膠電泳,在電場(chǎng)的作用下,降解產(chǎn)物分開(kāi),如右圖所示。據(jù)此分析,這兩種限制性內(nèi)切核酸酶在該DNA分
4、子上的限制位點(diǎn)數(shù)目是以下哪一組?AHindⅢ1個(gè),BamHⅠ2個(gè)BHindⅢ2個(gè),BamHⅠ3個(gè)CHindⅢ2個(gè),BamHⅠ1個(gè)DHindⅢ和BamHⅠ各有23引物序列,圖2為引物對(duì)與模板結(jié)合示意圖。請(qǐng)判斷哪一對(duì)引物可采用較高的退火溫度?__________。(3)圖1步驟③所用的DNA連接酶對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求?。(4)為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯,圖1步驟⑥轉(zhuǎn)基因所用的細(xì)菌B通常為。(5)對(duì)符合設(shè)計(jì)要求的重組質(zhì)粒T
5、進(jìn)行酶切,。假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開(kāi),請(qǐng)根據(jù)圖1中標(biāo)示的酶切位點(diǎn)和表2所列的識(shí)別序列,對(duì)以下酶切結(jié)果作出判斷。①采用EcⅠ和PstⅠ酶切,得到_________種DNA片斷。②采用EcⅠ和SmaⅠ酶切,得到_________種DNA片斷。3.3.(0909江蘇卷)江蘇卷)(7分)蘇云金桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲(chóng)能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過(guò)程示意圖(為抗氨芐青霉素基因),據(jù)圖回答下列問(wèn)題。ramp(1)將
6、圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反應(yīng)管中有種DNA片段。(2)圖中②表示HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過(guò)程,此過(guò)程可獲得種重組質(zhì)粒;如果換用Bstl與BamHⅠ酶切,目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得種重組質(zhì)粒。(3)目的基因插入質(zhì)粒后,不能影響質(zhì)粒的。(4)圖中③的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白,可以協(xié)助帶有目的基因的T—DNA導(dǎo)人植物細(xì)胞,并防止植物細(xì)胞中對(duì)T—DNA的降解。(5)已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)
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