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1、,,第2節(jié) 基因工程及其應(yīng)用,,,轉(zhuǎn)基因獼猴(左)和普通獼猴外觀上沒有什么區(qū)別。,中國(guó)首例轉(zhuǎn)基因獼猴,在紫外線照射下,轉(zhuǎn)基因獼猴(左)通體呈現(xiàn)綠色,這是由它體內(nèi)的綠色熒光蛋白所致。,,,綠色熒光蛋白基因,,,基因工程:又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說,就是按照人們的意愿,把一種生物的某種基因提取出來,加以修飾改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞里,定向地改造生物的遺傳性狀。,原 理:,操作水平:,結(jié) 果:,一、基因工程
2、,基因重組,DNA分子水平,定向改造生物性狀的新技術(shù),定向地改造生物的遺傳性狀,獲得人類所需要的品種。,想一想需要做哪些關(guān)鍵工作?,水母體細(xì)胞,綠色熒光蛋白基因,獼猴受精卵,,,(目的基因),(受體細(xì)胞),想一想需要做哪些關(guān)鍵工作?,水母體細(xì)胞,綠色熒光蛋白基因,,,,獼猴受精卵,(目的基因),(受體細(xì)胞),想一想需要做哪些關(guān)鍵工作?,,,水母體細(xì)胞,綠色熒光蛋白基因,獼猴受精卵,(目的基因),(受體細(xì)胞),培育轉(zhuǎn)基因獼猴的關(guān)鍵步驟:,
3、基因的“針線”,基因的運(yùn)載體,基因的“剪刀”,,,1、基因的剪刀—限制性內(nèi)切酶 (簡(jiǎn)稱限制酶),二、基因操作的工具,限制酶是在生物體(主要是微生物)內(nèi)的一種酶,能將外來的DNA切斷,由于這種切割作用是在DNA分子內(nèi)部進(jìn)行的,故名限制性內(nèi)切酶。,,,例:大腸桿菌的一種EcoRI限制酶識(shí)別 GAATTC序列,并在G和A之間切開。,模型構(gòu)建1,使用Ec
4、oRI 剪切目的基因,,,,,黏性末端,,,,,思考:用同一種限制酶剪切2個(gè)不同的DNA, 是否具有相同的黏性末端?,,CAGGAATTCTAG,AATGAATTCGTC,GTCCTTAAGATC,,TTACTTAAGCAG,,,特點(diǎn):一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。,(專一性),,,需要運(yùn)輸工具——運(yùn)載體,目的基因怎樣才能導(dǎo)入受體細(xì)胞?,常用的運(yùn)載體: 1)細(xì)菌的質(zhì)粒
5、 2)噬菌體或某些動(dòng)植物病毒,2、基因工程的工具——運(yùn)載體,,,大腸桿菌的質(zhì)粒,運(yùn)載體應(yīng)該具有什么特點(diǎn)呢?,?,1.能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存。2.具有限制酶切割位點(diǎn), 便與外源基因相連。3.具有標(biāo)記基因,便于進(jìn)行篩選。,將目的基因和運(yùn)載體結(jié)合,需要如何處理質(zhì)粒?,用同種限制酶切割質(zhì)粒,,,3、基因的針線──DNA連接酶,DNA連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來,使之成為一個(gè)完整的DNA分子。,模型構(gòu)建
6、2,使用DNA連接酶制作重組DNA分子,甲片段,重組DNA分子,,,使用DNA連接酶制作重組DNA分子,,,,,四個(gè)基本步驟:,(三)基因操作的基本步驟,1)提取目的基因2)目的基因與運(yùn)載體結(jié)合3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4)目的基因的檢測(cè)和表達(dá),設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn):如何培育能生產(chǎn)胰島素的大腸桿菌。,,,對(duì)應(yīng)訓(xùn)練:,,⒈要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組,所需的兩種酶是( ) ①限制酶 ②連接酶?、劢庑?④還原酶 ?。?/p>
7、.①② B.③④ C.①④ D.②③,A,2.分析下圖,下列有關(guān)工具酶功能的敘述,不正確的是( ) A.切斷a處的酶為限制酶 B.連接a處的酶為DNA連接酶 C.切斷b處的酶為解旋酶 D.連接b處的酶為RNA聚合酶,D,3.實(shí)施基因工程的第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來,這要利用限制性內(nèi)切酶。一種限制性內(nèi)切酶能識(shí)別DN
8、A分子的GAATTC順序,切點(diǎn)在G和A之間,這是利用了酶的( )A.高效性 B.專一性 C.多樣性 ?。模呋钚砸资芡饨缬绊?B,4.基因工程的正確操作步驟是( )①使目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 ?、趯⒛康幕?qū)胧荏w細(xì)胞?、蹤z測(cè)目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求④提取目的基因A. ③②④① ?。拢?②④①③ ?。茫?④①②③ D. ③④①②,C,,,5.采用基因工程的方法培
9、育抗蟲棉,下列導(dǎo)入目的基因的做法正確的是( )①將毒素蛋白注射到棉受精卵中 ?、?將編碼毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中 ③將編碼毒素蛋白的DNA序列,與質(zhì)粒重組,導(dǎo)入 細(xì)菌,用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞,在進(jìn)行組織培養(yǎng)④將編碼毒素蛋白的DNA序列,與細(xì)菌質(zhì)粒重組, 注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵中 A.①② B. ②③ C. ③④
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