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1、專題1基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過(guò)_________________,賦予生物以_____________,創(chuàng)造出__________________________。基因工程是在_____________上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,又叫做_____________。(一)基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀”——__________________________(1)來(lái)源:主要是從__________
2、___中分離純化出來(lái)的。(2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種______的核苷酸序列,并且使每一條鏈中_______部位的兩個(gè)核苷酸之間的_____________斷開(kāi),因此具有_____性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:_________和________2.“分子縫合針”——_________(1)兩種DNA連接酶(和)的比較:①相同點(diǎn):都縫合_________鍵。②區(qū)別:EcoliDNA連接酶來(lái)源
3、于_________,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的_______之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái);而T4DNA連接酶能縫合_______,但連接平末端的之間的效率較_。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將_________加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_________的末端,形成磷酸二酯鍵。3.“分子運(yùn)輸車”——_________(1)載體具備的條件:①_______________________
4、____。②___________________________。③___________________________。(2)最常用的載體是_____它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于,并具有_________能力的________DNA分子。(3)其它載體:___________________________(二)基因工程的基本操作程序第一步:__________________1.目的基因是指:。2.原核基因采取獲得,真核基
5、因是_________。人工合成目的基因的常用方法有_________和_________。3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:_________(2)過(guò)程:第一步:加熱至90~95℃使________;第二步:冷卻到55~60℃,______________;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定酶從起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步:_______________1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中______,并且可以,使目的基因能夠。2.組成:
6、__________+__________+__________+__________(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的,位于基因的__________,是__________酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因,最終獲得所需的。(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的,位于基因的。(3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中,從而將篩選出來(lái)。常用的標(biāo)記基因是__________。第三步:____________________1.轉(zhuǎn)化的概念:是進(jìn)入內(nèi)
7、,并且在受體細(xì)胞內(nèi)_____和_____的過(guò)程。2.常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是_______,其次還有______和____等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是。此方法的受體細(xì)胞多是___。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是、、,最常用的原核細(xì)胞是__________,其轉(zhuǎn)化方法是先用_____處理細(xì)胞,使其成為_(kāi)_______,再將_________溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,
8、在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。3.重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含的依據(jù)是。第四步:____________________1.首先要檢測(cè)上是否插入了,方法是采用2.其次還要檢測(cè)_____________,方法是采用作探針雜交。3.最后檢測(cè),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取,用相應(yīng)的__________進(jìn)行____________________。4.有時(shí)還需進(jìn)行水平的鑒定。如。(四)蛋白質(zhì)工程的概念蛋白質(zhì)工程是指以的
9、結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過(guò)____________________,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行,或制造一種__________,以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)的蛋白質(zhì))A為_(kāi)_________B為。專題2細(xì)胞工程(一)植物細(xì)胞工程1.理論基礎(chǔ)(原理):__________與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有__________、、等。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了________________
10、______,成為研究、、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。(4)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:比項(xiàng)目細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合方法誘導(dǎo)手段用法植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動(dòng)性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動(dòng),聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合植物細(xì)胞雜交,滅活的病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)之一4.單克隆抗體(1)抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一______
11、____。從血清中分離出的抗體、、。(2)單克隆抗體的制備過(guò)程:(3)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能___________,又能產(chǎn)生___________。(4)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):_________________________________。(5)單克隆抗體的作用:①作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟發(fā)生特異性結(jié)合,具有、、、的優(yōu)點(diǎn)。②用于治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于治療,可制成“”,也有少量用于治療其它疾病。專題3胚胎工程(
12、一)動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程1、胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物______________________所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),如___________、___________、___________、___________等技術(shù)。經(jīng)過(guò)處理后獲得的,還需移植到___________生產(chǎn)后代,以滿足人類的各種需求。2、動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程(1)受精場(chǎng)所是母體的___________。(2)卵裂期:特點(diǎn):細(xì)胞有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎
13、的總體體積______________。(3)桑椹胚:特點(diǎn):胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí),胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán),形似桑椹。是___________(全能或者已分化)細(xì)胞。(4)囊胚:特點(diǎn):細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)_______(該時(shí)期細(xì)胞的___________)。聚集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞稱為_(kāi)________,將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織。中間的空腔稱________。(5)原腸胚:特點(diǎn):有了___(幾層)胚層的分化,具有腔和腔。(二)胚胎干細(xì)胞
14、1、哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞,來(lái)源于______________________中分離出來(lái)。2、具有胚胎細(xì)胞的特性,在形態(tài)上表現(xiàn)為_(kāi)__________小,___________大,___________明顯;在功能上,具有發(fā)育的,可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以而不發(fā)生,可進(jìn)行保存,也可進(jìn)行。3、胚胎干細(xì)胞的主要用途是:①可用于研究哺乳動(dòng)物;②是在體外條件下研究的理想材料,在培養(yǎng)液中加
15、入,如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí),就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化,這為揭示的機(jī)理提供了有效的手段;③可以用于治療人類的某些,如帕金森綜合癥、少年糖尿病等;④利用可以被誘導(dǎo)分化形成新的的特性,移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能;⑤隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展,通過(guò)ES細(xì)胞,定向培育出___________,用于___________,解決供體器官不足和器官移植后________的問(wèn)題。(三)胚胎工程的應(yīng)用1.體外受精和胚
16、胎的早期培養(yǎng)(1)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng):主要方法:用___________處理,使其排出更多的卵子,然后,從___________中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。第二種方法:從剛屠宰母畜的中采集卵母細(xì)胞;第三種方法是借助超聲波探測(cè)儀、腹腔鏡等直接從___________中吸取卵母細(xì)胞。采集的卵母細(xì)胞,都要在體外經(jīng)后,才能與受精。(2)精子的采集和獲能:在體外受精前,要對(duì)精子進(jìn)行___________處理。(3)受精:獲能的精子和
17、培養(yǎng)成熟的卵細(xì)胞在___________溶液或?qū)S玫娜芤褐型瓿墒芫^(guò)程。(4)胚胎的早期培養(yǎng):精子與卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查_(kāi)__________和___________。培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外,還需添加、、、等營(yíng)養(yǎng)成分,以及___________等物質(zhì)。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí),可將其取出向___________。不同動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不同。(牛、羊一般要培育到_________或_____
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