生物選修三知識點背誦_第1頁
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文檔簡介

1、專題專題1基因工程基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計,通過體外體外DNADNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?;蚬こ淌窃贒NADNA分子水平分子水平上進(jìn)行設(shè)計和施工的,又叫做DNADNA重組技術(shù)重組技術(shù)。(一)基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)限制性核酸

2、內(nèi)切酶(限制酶)(1)來源:主要是從原核生物原核生物中分離純化出來的。(2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性專一性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端黏性末端和平末端平末端。2.“分子縫合針”——DNADNA連接酶連接酶(1)兩種DNA連接酶(EcoliDNA連接酶和T4DNA連接酶)的比較:①

3、相同點:都縫合磷酸二酯磷酸二酯鍵。②區(qū)別:EcoliDNA連接酶來源于T4噬菌體噬菌體,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個核苷酸單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個兩個DNADNA片段片段的末端,形成磷酸二酯鍵。3.“分子運輸車”——載

4、體載體(1)載體具備的條件:①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點,供外源具有一至多個限制酶切點,供外源DNADNA片段插入片段插入。③具有標(biāo)記基因,供重組具有標(biāo)記基因,供重組DNADNA的鑒定和選擇的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細(xì)菌染色體之外,并具裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀D

5、NADNA分子分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動植物病毒。噬菌體的衍生物、動植物病毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的目的基因的獲取1.目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2.原核基因采取直接分離直接分離獲得,真核基因是人工合成人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法化學(xué)合成法_。3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:DNADNA雙鏈復(fù)制雙鏈復(fù)制(2)過程:第一步:加熱至

6、90~95℃DNADNA解鏈解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補(bǔ)引物結(jié)合到互補(bǔ)DNADNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNADNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步:基因表達(dá)基因表達(dá)載體的構(gòu)建體的構(gòu)建1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用達(dá)和發(fā)揮作用。2.組成:目的基因目的基因+啟動子啟動子+終止子終止子+

7、標(biāo)記基因標(biāo)記基因?qū)n}專題2細(xì)胞工程細(xì)胞工程(一)植物細(xì)胞工程1.理論基礎(chǔ)(原理):細(xì)胞全能性細(xì)胞全能性全能性表達(dá)的難易程度:受精卵>生殖細(xì)胞>干細(xì)胞>受精卵>生殖細(xì)胞>干細(xì)胞>體細(xì)胞體細(xì)胞;植物細(xì)胞>動物細(xì)胞植物細(xì)胞>動物細(xì)胞2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)過程:離體離體的植物器官、組織或細(xì)胞―→愈傷組織愈傷組織―→試管苗―→植物體(2)用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)

8、物的工廠化生產(chǎn)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(3)地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)過程:(2)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動、電刺激心、振動、電刺激等?;瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇(乙二醇(PEGPEG)作為誘導(dǎo)劑。(3)意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。礙。(二)動物細(xì)胞工程1.動物細(xì)胞培養(yǎng)(1)概念:動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出

9、相關(guān)的組織組織,將它分散成單個細(xì)胞單個細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和繁殖生長和繁殖.(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代傳代培養(yǎng)。(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸

10、液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互抑制相互抑制時,細(xì)胞就會停止分裂增殖停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑細(xì)胞的接觸抑制。(4)動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件:①無菌、無毒的環(huán)境無菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害代謝產(chǎn)物積累對

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