選修三知識(shí)點(diǎn)填空答案

1、1選修選修3《3《現(xiàn)代生物科技專題現(xiàn)代生物科技專題》專題專題1基因工程基因工程基因工程的概念概念基因工程是指按照人們的愿望（定向變異）（定向變異），進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，通過(guò)體外體外（體內(nèi)、體外）DNADNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?；蚬こ淌窃诜肿臃肿铀剿缴线M(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，又叫做DNADNA重組技術(shù)技術(shù)。基因工程技術(shù)的原理原理：基因重組基因工程的優(yōu)點(diǎn)：（優(yōu)

2、點(diǎn)：（1）目的性強(qiáng)，能夠定向的改變生物的品質(zhì)。（）目的性強(qiáng)，能夠定向的改變生物的品質(zhì)。（2）克服遠(yuǎn)緣雜交不親和）克服遠(yuǎn)緣雜交不親和。1.11.1基因工程的基本工具基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀”——限制酶限制酶（全稱：限制性核酸內(nèi)切酶）（1）主要來(lái)源：原核生物。（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定特定的核苷酸序列（被識(shí)別序列具反向?qū)ΨQ反向?qū)ΨQ特點(diǎn)），并且使每一條鏈中特定特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵

3、斷開(kāi)，因此具有專一專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性黏性末端末端和平末端末端。（4）與解旋酶的區(qū)別：解旋酶：斷開(kāi)堿基對(duì)間氫鍵氫鍵限制酶：斷開(kāi)兩個(gè)脫氧核苷酸之間（即磷酸與脫氧核糖之間）的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵2.“分子縫合針?lè)肿涌p合針”——DNADNA連接酶連接酶(1)兩種DNA連接酶（EcoliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點(diǎn)：都連接磷酸二酯磷酸二酯鍵。②區(qū)別：EcoliDNA連接酶來(lái)

4、源于T4噬菌體噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái)；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶：只能將單個(gè)核苷酸單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶：連接兩個(gè)兩個(gè)DNADNA片段片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3.“分子運(yùn)輸車”——運(yùn)載體載體（1）運(yùn)載體具備的條件：①具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源具有

5、一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNADNA片段插入片段插入。②能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。③具有標(biāo)記基因，供重組具有標(biāo)記基因，供重組DNADNA的鑒定和選擇的鑒定和選擇。④能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存（對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害），大小合適。（2）最常用的載體是質(zhì)粒質(zhì)粒它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的很小的雙鏈環(huán)狀環(huán)狀DNADNA分子分子。（3）其它

6、載體：λ噬菌體的衍生物噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒動(dòng)植物病毒。3（1）啟動(dòng)子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNADNA片段片段，位于基因的首端首端（編碼區(qū)上游的非編區(qū)），含有RNARNA聚合酶聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，有助于RNA聚合酶驅(qū)動(dòng)基因的編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNADNA片段片段，位于基因的尾端尾端（編碼區(qū)下游的非編區(qū)）。（3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將

7、含有目的基因的將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因抗生素基因，此外還有熒光蛋白基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1.轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進(jìn)入進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定維持穩(wěn)定和表達(dá)表達(dá)的過(guò)程。2.常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化（該方法主要針對(duì)雙子葉植雙子葉植物植物和裸子裸子植物，而對(duì)大多數(shù)單子葉單子葉植物無(wú)效。利用農(nóng)桿菌Ti

8、質(zhì)粒上的TDNA可整合到受全細(xì)胞染色體DNA上的特性）。其次還有基因槍法基因槍法（又稱微彈轟擊法），以及花粉管通花粉管通道等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射法顯微注射法。此方法的受體細(xì)胞多是受精卵受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因原因是：繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用鈣離子鈣離子處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載重

9、組表達(dá)載體DNADNA分子分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。3.重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞的成功率很低，需利用標(biāo)記基因篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞。第四步：目的基因的檢測(cè)和鑒定第四步：目的基因的檢測(cè)和鑒定1.分子水平的檢測(cè)（1）首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNADNA上是否插入了目的基因上是否插入了目的基因方法技術(shù)：DNADNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)基因探針：用放射

10、性同位素或熒光分子等標(biāo)記的目的基因單鏈。檢測(cè)對(duì)象：DNA存在標(biāo)志：出現(xiàn)雜交帶。（2）其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNAmRNA方法技術(shù)：DNADNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)基因探針：用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的目的基因單鏈。檢測(cè)對(duì)象：mRNAmRNA。存在標(biāo)志：出現(xiàn)雜交帶。（3）最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)方法技術(shù)：抗原抗原抗體雜交抗體雜交存在標(biāo)志：出現(xiàn)雜交帶。目的基因翻譯成的蛋