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1、1生物選修三知識(shí)點(diǎn)生物選修三知識(shí)點(diǎn)專題一基因工程一、基因工程的概念及基本工具1、概念:操作環(huán)境:體外操作水平:原理:優(yōu)點(diǎn):定向改造生物性狀2、基因工程的基本工具(1)“分子手術(shù)刀”:1)來(lái)源:主要是從生物中分離純化出來(lái)的。2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的斷開(kāi),因此具有專一性。3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:2.“分子縫合針”——DNA連接酶常用類
2、型EcoliDNA連接酶T4DNA連接酶來(lái)源T4噬菌體功能連接黏性末端連接結(jié)果縫合被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的3.“分子運(yùn)輸車”——載體(1)載體具備的條件:①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于之外,并具有能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、等二、基因工程的基本操作程序(一)
3、、目的基因的獲取1.目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2.獲取方法:從基因組文庫(kù)中獲取、利用擴(kuò)增目的基因、利用人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:(2)過(guò)程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。(二)、基因表達(dá)載體的構(gòu)建1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中
4、,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠和發(fā)揮作用。2.組成:目的基因、、、等3轉(zhuǎn)錄翻譯專題2細(xì)胞工程一、細(xì)胞工程的概念:1、原理和方法:應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法2、操作水平:水平或細(xì)胞器水平3、目的:按照人的意愿來(lái)改造細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得4、分類:根據(jù)操作對(duì)象的不同,分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程二、植物細(xì)胞工程1.理論基礎(chǔ)(原理):(1)原因:生物體的任何一個(gè)細(xì)胞都包含本物種的全能性表達(dá)的難易程度:受精卵>生殖細(xì)胞>干
5、細(xì)胞>體細(xì)胞;分化程度低的﹥分化程度高的細(xì)胞分裂能力強(qiáng)的﹥細(xì)胞分裂能力弱的幼嫩的細(xì)胞﹥衰老的細(xì)胞植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞(2)全能性表達(dá)的條件:處于狀態(tài),提供一定的營(yíng)養(yǎng)、、適宜的溫度和酸堿度、無(wú)菌條件等2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)過(guò)程:(2)用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(3)地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程:(1)去壁:酶解法所用酶為(2
6、)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?;瘜W(xué)法一般是用作為誘導(dǎo)劑。(3)、植物體細(xì)胞雜交成功的標(biāo)志:(4)優(yōu)點(diǎn):克服了。(5)變異類型:4、植物細(xì)胞工程的應(yīng)用再生再生融合的原生質(zhì)體融合的原生質(zhì)體雜種植株雜種植株胚狀體胚狀體愈傷組織愈傷組織雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞去壁去壁植物細(xì)胞植物細(xì)胞A植物細(xì)胞植物細(xì)胞B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B融合融合激素、光激素、光根、芽根、芽完整植株完整植株愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體離體的植物器離體
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