藥物分析2分析

1、,,藥物分析技術(shù),第三章 藥物雜質(zhì)檢查技術(shù),雜質(zhì)的來源與雜質(zhì)檢查方法,一般雜質(zhì)的檢查,特殊雜質(zhì)的檢查,藥物雜質(zhì)檢查技術(shù),學(xué)習(xí)目標(biāo),1.掌握一般雜質(zhì)檢查的原理、方法及雜質(zhì)限量計(jì)算2.熟悉特殊雜質(zhì)的檢查方法3.了解藥物雜質(zhì)檢查的意義及藥物雜質(zhì)的來源和分類4.學(xué)會(huì)藥物中常見一般雜質(zhì)檢查和特殊雜質(zhì)檢查的操作,第一節(jié) 雜質(zhì)的來源與雜質(zhì)檢查方法,雜質(zhì)的來源與雜質(zhì)檢查方法,藥物的雜質(zhì)：是指藥物中存在的無治療作用或影響藥物的穩(wěn)定性和療效，甚

2、至對(duì)人體健康有害的物質(zhì),（一）雜質(zhì)的來源：主要有兩方面的來源一方面是由藥物生產(chǎn)過程中引入,一、雜質(zhì)的來源及分類,（一）雜質(zhì)的來源,另一方面是在貯藏過程中引入,（二）雜質(zhì)的分類,1.按來源可分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)（1）一般雜質(zhì)是指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)（2）特殊雜質(zhì)是指在藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中，根據(jù)藥物的性質(zhì)和生產(chǎn)工藝而引入的雜質(zhì),2.按性質(zhì)可分為信號(hào)雜質(zhì)和有害雜質(zhì)（1）信號(hào)雜質(zhì)本身一般無

3、害，但其含量的多少可以反映出藥物的純度水平（2）有害雜質(zhì)對(duì)人體有毒害或影響藥物的穩(wěn)定性，如重金屬、砷鹽等，在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)嚴(yán)格加以控制，以保證用藥安全,（二）雜質(zhì)的分類,（一）雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量是指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量通常用百分之幾或百萬分之幾來表示：如葡萄糖中氯化物的限量為0.01%,重金屬的限量為百萬分之五,二、雜質(zhì)限量與雜質(zhì)檢查方法,雜質(zhì)的限量檢查可分為以下3種方法：1.對(duì)照法 對(duì)照法是將供試品溶液與待檢雜質(zhì)對(duì)照溶液，

4、在相同條件下處理后，比較反應(yīng)結(jié)果，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否超過限量。特點(diǎn)：不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量,（二）雜質(zhì)檢查方法,雜質(zhì)的限量檢查可分為以下3種方法：2.靈敏度法 的方法。本法的特點(diǎn)是不需要對(duì)照物質(zhì)，而是以供試品不出現(xiàn)陽性反應(yīng)為限度。特點(diǎn)：不需對(duì)照物質(zhì),（二）雜質(zhì)檢查方法,雜質(zhì)的限量檢查可分為以下3種方法：3.比較法 比較法是指取供試品一定量依法檢查，測(cè)定與待檢雜質(zhì)含量相關(guān)的吸光度或旋光度等指標(biāo)，不得超過規(guī)定值，以此控制雜

5、質(zhì)的限量。特點(diǎn)：準(zhǔn)確測(cè)定雜質(zhì)的量，不需對(duì)照品,（二）雜質(zhì)檢查方法,（三）雜質(zhì)限量計(jì)算,,,1.藥物中的雜質(zhì)主要由 和 引入2.雜質(zhì)限量是指藥物中所含雜質(zhì)的 。通常用 或 來表示3.雜質(zhì)限量的檢查方法主要有 、 、 和 三種,點(diǎn)滴積累,第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查,（一）原理：對(duì)照法 （比濁法）

6、,一、氯化物檢查法,1.標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液的制備 2.供試品溶液的制備 3.對(duì)照溶液的制備4.比濁 5.記錄和結(jié)果判斷,（二）檢查方法,1.應(yīng)遵循平行操作原則 供試品管和對(duì)照液管的操作應(yīng)同時(shí)進(jìn)行，加入試劑順序要一致2.加入硝酸的目的3.如何觀察4.供試品溶液如帶顏色的處理5.供試液如不澄清的處理,（三）注意事項(xiàng),（一）原理：對(duì)照法 （比濁法）,二、硫酸鹽檢查法,硫酸鹽檢查法的操作流程與氯化物檢查法相同，包括：標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶

7、液的制備→供試品溶液和對(duì)照溶液的制備→加入沉淀試劑25%氯化鋇溶液→比濁→記錄和結(jié)果判斷等,（二）檢查方法,1.應(yīng)遵循平行操作原則：供試品管和對(duì)照液管的操作應(yīng)同時(shí)進(jìn)行，加入試劑順序要一致2.加入鹽酸的目的3.如何觀察4.供試品溶液如帶顏色的處理5.供試液如不澄清的處理,（三）注意事項(xiàng),（一）原理：對(duì)照法（比色法）,三、鐵鹽檢查法,標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液的制備→供試品溶液和對(duì)照溶液的制備→加入顯色劑30%硫氰酸銨溶液→比色→記錄和結(jié)果判斷

8、等,（二）檢查方法,1.反應(yīng)在鹽酸酸性溶液中進(jìn)行，可防止Fe3+水解，在中性或堿性溶液中，F(xiàn)e3+水解生成棕色或棕紅色的產(chǎn)物，影響檢查2.加入過硫酸銨的目的 將供試品可能存在的Fe2+氧化成Fe3+ ，同時(shí)可以防止紅色的硫氰酸鐵受光照還原或分解3.加入過硫酸銨的目的 將供試品可能存在的Fe2+氧化成Fe3+ ，同時(shí)可以防止紅色的硫氰酸鐵受光照還原或分解,（三）注意事項(xiàng),重金屬系指在試驗(yàn)條件下，能夠與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的

9、金屬雜質(zhì)。如銀、銻、汞、鉛、銅、鉍、鉻、錫、鋅等重金屬影響用藥安全或藥物的穩(wěn)定性，必須嚴(yán)格控制其限量,四、重金屬檢查法,《中國(guó)藥典》2010年版采用比色法檢查，共收載了3種檢查方法。主要講解第一法 第一法：硫代乙酰胺法（一）原理：對(duì)照法（比色法）,四、重金屬檢查法,1.標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備 2.檢查溶液的制備 對(duì)照溶液的制備（甲管）供試品溶液的制備（乙管）監(jiān)控管溶液的制備（丙管）3.比色 4.結(jié)果判斷,（二）檢查方法,1.

10、重金屬硫化物生成的最佳pH是3.0～3.5 2.標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液應(yīng)在臨用前精密量取鉛貯備液新鮮稀釋配制，以防止硝酸鉛水解而造成誤差,配制與貯藏用的玻璃容器均不得含鉛3.第一法中的丙管，也稱為監(jiān)控管，是為了防止出現(xiàn)假象,（三）注意事項(xiàng),砷的危害,五、砷鹽檢查法,第一法（古蔡氏法）檢砷裝置：,五、砷鹽檢查法,As3+ ＋ 3Zn ＋ 3H+ → 3Zn2+ ＋AsH3↑AsO33- ＋3Zn ＋ 9H+ → 3Zn2+ ＋3H2O ＋

11、AsH3↑AsO43- ＋4Zn ＋11H+ → 4Zn2+ ＋4H2O ＋AsH3↑砷化氫與溴化汞試紙作用生成色斑：AsH3 + 2HgBr2 → 2HBr +AsH(HgBr)2 （黃色）AsH3 + 3HgBr2 → 3HBr +As(HgBr)3 （棕色）,（一）原理：對(duì)照法（比較色斑顏色）,1.標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備 2.標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備 3.供試品砷斑的制備 4.比色 5.結(jié)果判斷,（二）檢查方法,1.在

12、反應(yīng)液中加入碘化鉀和酸性氯化亞錫的目的2.在檢砷裝置的導(dǎo)氣管中裝入醋酸鉛棉花的目的3.醋酸鉛棉花的裝填要求4.所用儀器和試液等照本法檢查，均不應(yīng)生成砷斑，或至多生成僅可辨認(rèn)的斑痕,（三）注意事項(xiàng),主要檢查檢查藥物中的酸性、堿性雜質(zhì)（一）指示劑法 在供試品溶液中加入規(guī)定的指示液，根據(jù)指示液的顏色變化來控制酸性、堿性雜質(zhì)的限量（二）酸堿滴定法 在一定指示液條件下，以消耗一定量的酸或堿滴定液來控制藥物中的堿性、酸性雜質(zhì)的限量,

13、六、酸堿度檢查法,主要檢查檢查藥物中的酸性、堿性雜質(zhì)（三）pH測(cè)定法 按照《中國(guó)藥典》2010年版通則中的規(guī)定用電位法（使用酸度計(jì)）測(cè)定溶液的pH，以控制其酸堿性雜質(zhì)的限量,六、酸堿度檢查法,干燥失重系指藥物在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失重量的百分率，該法主要檢查吸濕水、結(jié)晶水及在該條件下能揮發(fā)減失的物質(zhì)(如乙醇等),七、干燥失重測(cè)定法,常用的干燥方法有： 1.恒溫常壓干燥法（烘箱干燥法） 2.干燥劑干燥法 3.恒溫減壓干燥

14、法,（一）操作方法,,,（二）記錄和結(jié)果計(jì)算,1.供試品干燥時(shí)應(yīng)注意的問題2.從干燥器中取出供試品后應(yīng)注意的問題3.干燥器中常用的干燥劑為硅膠、五氧化二磷或無水氯化鈣。干燥劑應(yīng)及時(shí)更換,使其保持有效狀態(tài),,（三）注意事項(xiàng),氯化物檢查 、硫酸鹽檢查 、鐵鹽檢查 、重金屬檢查 、砷鹽檢查常用的沉淀（顯色）劑、標(biāo)準(zhǔn)溶液分別是什么？反應(yīng)的現(xiàn)象是什么？,點(diǎn)滴積累,第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查,特殊雜質(zhì)檢查,特殊雜質(zhì)是指該藥物在生產(chǎn)和貯藏過程中，因

15、藥物本身的性質(zhì)或生產(chǎn)工藝條件，有可能引入的雜質(zhì)。如阿司匹林中的游離水楊酸、腎上腺素中的酮體、硫酸阿托品中的莨菪堿等,一、利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異進(jìn)行檢查二、利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異進(jìn)行檢查三、利用藥物和雜質(zhì)在色譜行為上的差異進(jìn)行檢查,常用檢查方法,三、利用藥物和雜質(zhì)在色譜行為上的差異進(jìn)行檢查（一）薄層色譜法（TLC）,常用檢查方法,利用各成分對(duì)同一吸附劑吸附能力不同，在流動(dòng)相（又叫展開劑）流過固定相（又叫吸附劑）的

16、過程中，各成分連續(xù)的產(chǎn)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，形成差速遷移，從而達(dá)到各成分互相分離的目的,（一）薄層色譜法（TLC）,（二）高效液相色譜法（HPLC）,高效液相色譜法,1.不加校正因子的主成分自身對(duì)照法 《中國(guó)藥典》2010年版規(guī)定，按各品種項(xiàng)下規(guī)定，取一定量的供試品溶液稀釋成與雜質(zhì)限量相當(dāng)?shù)娜芤?，作為?duì)照溶液，然后取供試品溶液和對(duì)照溶液適量，分別進(jìn)樣，除另有規(guī)定外，供試品溶液的分析時(shí)間應(yīng)為主成分色譜峰保留時(shí)間的2倍，測(cè)量供

17、試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積，并與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較，計(jì)算雜質(zhì)含量,（二）高效液相色譜法（HPLC）,2.面積歸一化法 《中國(guó)藥典》2010年版規(guī)定，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，配制供試品溶液，取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測(cè)量各峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計(jì)算各峰面積占總峰面積的百分率,（二）高效液相色譜法（HPLC）,藥物特殊雜質(zhì)的檢查方法有哪幾種？,點(diǎn)滴積累,目標(biāo)檢測(cè),一、單項(xiàng)選擇題（A型題）1.藥物雜質(zhì)

18、檢查的目的是（ ）A.控制藥物的純度 B.控制藥物療效 C.控制藥物的有效成分 D.控制藥物毒性 E. 檢查生產(chǎn)工藝的合理性2.藥物中雜質(zhì)的限量是指（ ）A.雜質(zhì)是否存在 B.雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量 C.雜質(zhì)的最低量 D.雜質(zhì)的最大允許量 E.確定雜質(zhì)的數(shù)目,目標(biāo)檢測(cè),一、單項(xiàng)選擇題（A型題）3.雜質(zhì)檢查一般為（ ）　　A.限度檢查　 B.含量檢查　

19、 　C.檢查最低量　　 D.檢查最大允許量　 E.用于原料藥檢查4.藥物中硫酸鹽檢查時(shí)，所用的對(duì)照溶液 為（ ）A.標(biāo)準(zhǔn)氯化鋇  B.標(biāo)準(zhǔn)醋酸鉛溶液 C.標(biāo)準(zhǔn)硝酸銀溶液 D.標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液 E.以上都不對(duì),一、單項(xiàng)選擇題（A型題）5.古蔡氏法檢測(cè)砷時(shí)，砷化氫氣體與下列哪種物質(zhì)作用生成砷斑（ ）A.氯化汞 B. 溴化汞 C. 碘化汞 D.硫化汞

20、E.硝酸汞,目標(biāo)檢測(cè),一、單項(xiàng)選擇題（A型題）6.關(guān)于藥品中重金屬檢查，下列說法不正確的是（ ）A.在酸性溶液中，要以硫代乙酰胺作顯色劑 B.在堿性溶液中，要以硫化鈉作顯色劑 C.調(diào)整供試液為酸性時(shí)，用醋酸鹽緩沖液 D.標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液通常使用醋酸鉛配制 E.比色時(shí)應(yīng)將試管置白色襯底上觀察,目標(biāo)檢測(cè),一、單項(xiàng)選擇題（A型題）7.用硫代乙酰胺法檢查重金屬，其pH范圍應(yīng)控制在（ ）A.2.0

21、～3.5 B.3.0～3.5 C.6.0～6.5D.7.0～8.5 E. 9.0～10.58.在古蔡氏法中，加入碘化鉀及氧化亞錫試液的主要作用是還原（ ）A. 五價(jià)砷成砷化氫 B. 三價(jià)砷成砷化氫 C. 五價(jià)砷成三價(jià)砷 D. 硫成硫化氫 E. 銻成銻化氫,目標(biāo)檢測(cè),一、單項(xiàng)選擇題（A型題）9.檢砷裝置導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花，是為了吸收（

22、 ）A.氫氣 B.溴化氫 C.硫化氫 D.砷化氫 E.銻化氫10.檢查鐵鹽雜質(zhì)，《中國(guó)藥典》2010年版 使用的顯色劑是（ ）A.硫氰酸銨 B.水楊酸鈉 C.高錳酸鉀 D. 過硫酸銨 E. 巰基醋酸,目標(biāo)檢測(cè),一、單項(xiàng)選擇題（A型題）11.《中國(guó)藥典》2010年版 中用硫氰酸鹽法檢查鐵鹽雜質(zhì)時(shí)，將供試品中的Fe2+氧化成Fe3+，使用的氧化劑

23、是（ ）A.硫酸 B.過硫酸銨 C.硫代硫酸鈉 D.過氧化氫 E.高錳酸鉀12.檢查重金屬雜質(zhì)，加入硫代乙酰胺試液，其作用是（ ）A.穩(wěn)定劑 B.顯色劑 C. 掩蔽劑 D.絡(luò)合劑 E.增溶劑,目標(biāo)檢測(cè),一、單項(xiàng)選擇題（A型題）13.常壓恒溫干燥法中，《中國(guó)藥典》2010年版規(guī)定的干燥溫度一般為（ ）A.80℃ B.90℃ C.

24、100℃ D.105℃ E.120℃,目標(biāo)檢測(cè),二、配位選擇題（B型題）[14～18] 以下各項(xiàng)雜質(zhì)檢查中所使用的試劑為：A.硫代乙酰胺試液 B.氯化鋇試液 C.硝酸銀試液 D.氯化亞錫試液 E.硫氰酸銨試液14.藥物中鐵鹽檢查（ ） 15. 藥物中砷鹽檢查 （ ） 16. 藥物中硫酸鹽檢查（ ） 17. 葡萄糖中重金屬檢查（ ） 18. 藥物中氯化物檢

25、查（ ）,目標(biāo)檢測(cè),二、配位選擇題（B型題）[19～23] 以下各項(xiàng)雜質(zhì)檢查中要求在酸性條件下進(jìn)行，所用的酸為：A.鹽酸 B.硫酸 C.硝酸 D.醋酸鹽緩沖液 E.磷酸19.氯化物的檢查（ ） 20.硫酸鹽的檢查（ ） 21.鐵鹽的檢查（ ） 22.重金屬的檢查（ ） 23.砷鹽的檢查（ ）,目標(biāo)檢測(cè),三、多項(xiàng)選擇題（X型題）24.藥物中引入雜質(zhì)的途徑有（ ） A.生產(chǎn)過程中 

26、;  B.服用過程中  C.使用過程中 D.儲(chǔ)藏過程中  E.運(yùn)輸過程中25.檢查藥物中的氯化物雜質(zhì)，需要用下列哪些試劑（ ）A.稀鹽酸 B.稀硫酸 C.稀硝酸 D.硝酸銀試液 E.標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液,目標(biāo)檢測(cè),三、多項(xiàng)選擇題（X型題）26.檢查重金屬雜質(zhì)，常用的顯色劑是（ ）A.硫化鈉 B.硫酸鈉 C.硫化鐵 D.硫代乙

27、酰胺 E.硫化銨,目標(biāo)檢測(cè),三、多項(xiàng)選擇題（X型題）27.《中國(guó)藥典》2010年版規(guī)定的一般雜質(zhì)檢查中包括的項(xiàng)目有（ ）A.硫酸鹽檢查 B.氯化物檢查 C.溶出度檢查 D.重金屬檢查 E.鐵鹽檢查28.藥物干燥失重檢查法有（ ）A.干燥劑干燥法　B.吸附指示劑法 C.常壓恒溫干燥法 D.費(fèi)休氏水分測(cè)定法 E.減壓干燥法,目標(biāo)檢測(cè),四、計(jì)算題1.對(duì)乙酰氨基酚中氯化物檢查：取供

28、試品2.0g，加水100ml，加熱溶解，冷卻，過濾，取濾液25ml，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（10μg/ml）5.0ml制成的對(duì)照品溶液比較，不得更濃。計(jì)算氯化物的限量。2.檢查維生素C中重金屬，若取樣量為1.0g，要求含重金屬不得超過百萬分之十，問應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（每1ml相當(dāng)于10μg的Pb）多少毫升？,目標(biāo)檢測(cè),四、計(jì)算題3.測(cè)定某藥物的干燥失重，在105℃干燥至恒重的稱量瓶重18.2650g，加入樣品后共重19.2816g，