檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)進(jìn)展血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南

1、血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,,血細(xì)胞分析儀技術(shù),一、Backman-Coulter公司(VCS)二、Sysmex(多通道阻抗+射頻，流式+核酸熒光染色)三、Abbott（MAPSS）四、Bayer(光散射+染色)五、Abx(DHSS),血液分析儀全面質(zhì)控,一、分析前質(zhì)量管理1、上崗培訓(xùn)2、選擇合適的工作環(huán)境3、儀器的鑒定與評(píng)價(jià)4、儀器的校準(zhǔn)與管理5、標(biāo)本的采集與運(yùn)送6、受檢者生理影響,二、分析中質(zhì)量管理1、試劑的合理使用

2、2、標(biāo)本要求3、室內(nèi)質(zhì)控4、病例因素對(duì)結(jié)果的影響5、回顧性質(zhì)量控制,血液分析儀全面質(zhì)控,三、分析后質(zhì)量管理1、WBC直方圖2、分析各參數(shù)之間的關(guān)系3、與臨床資料結(jié)合分析4、定期征求臨床對(duì)本室結(jié)果評(píng)價(jià),血液分析儀全面質(zhì)控,血液分析儀性能評(píng)價(jià),血液分析儀性能評(píng)價(jià),方法學(xué)評(píng)價(jià)參考文件,血液分析儀性能評(píng)價(jià),血液分析儀性能評(píng)價(jià)內(nèi)容,1.稀釋效應(yīng)（線性范圍）2.精密度（批內(nèi)、批間和總精密度）3.攜帶污染率4.可比

3、性5.準(zhǔn)確度6.抗干擾能力7.標(biāo)本老化,血液分析儀性能評(píng)價(jià)方法,1. CLSI EP6-P2. CLSI EP5-A2 批準(zhǔn)指南第二版3. CLSI EP9-A2 批準(zhǔn)指南 EP15-A4.干擾能力--------CLSI EP7-A2,術(shù)語與定義,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,血液分析儀（Hematology analyzer）,主要用于檢測(cè)人體血液標(biāo)本，是能對(duì)血液中有形成分進(jìn)行

4、定性、定量分析，并提供相關(guān)信息的儀器。,校準(zhǔn)（Calibriation）,在規(guī)定的條件下，為確定測(cè)量?jī)x器或測(cè)量系統(tǒng)所指示的量值，或?qū)嵨锪烤呋騾⒖嘉镔|(zhì)所代表的量值，與對(duì)應(yīng)的由標(biāo)準(zhǔn)所復(fù)現(xiàn)的量值之間的關(guān)系的一組操作。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,術(shù)語與定義,準(zhǔn)確性（accuracy）,一個(gè)測(cè)量值與可接受的參考值之間的一致程度。,重復(fù)性（repeatability）,在相同測(cè)量條件下，對(duì)同一被測(cè)量物進(jìn)行連續(xù)多次測(cè)量所得結(jié)果之間的一致性。,偏移（b

5、isa）,試驗(yàn)結(jié)果的期望值與可接受的參考值之間的差異。,2、對(duì)每一臺(tái)血液分析儀定期進(jìn)行校準(zhǔn)。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,校準(zhǔn)總則,1、實(shí)驗(yàn)室需建立適合本實(shí)驗(yàn)室使用的血細(xì)胞分析校準(zhǔn)程序并寫成文件。 內(nèi)容包括： ①校準(zhǔn)物的來源、名稱、溯源性、及其保存方法； ②校準(zhǔn)的具體方法和步驟； ③何時(shí)要求進(jìn)行校準(zhǔn)、由何人負(fù)責(zé)實(shí)施等。,4、血液分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)后，以為了監(jiān)測(cè)儀器的檢測(cè)結(jié)果是否發(fā)生漂移，應(yīng)開展室內(nèi)質(zhì)量控制。,血細(xì)胞分析

6、校準(zhǔn)指南,校準(zhǔn)總則,3、同一臺(tái)血液分析儀使用不同吸樣模式時(shí)，應(yīng)分別進(jìn)行校準(zhǔn)。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,校準(zhǔn)前的性能要求,1．背景計(jì)數(shù)：應(yīng)符合儀器說明書標(biāo)示的性能要求。,2．?dāng)y帶污染率：應(yīng)符合儀器說明書標(biāo)示的性能要求。,3．精密度：應(yīng)符合儀器說明書標(biāo)示的性能要求，同時(shí) 應(yīng)滿足臨床需要。,4．線性要求：應(yīng)符合儀器說明書標(biāo)示的性能要求，同 時(shí)應(yīng)滿足臨床需要。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,校準(zhǔn)的環(huán)境條件,1、環(huán)

7、境溫度在18℃-25 ℃范圍內(nèi)（在開展日常檢測(cè)工作時(shí)溫度亦應(yīng)控制在范圍內(nèi)）,2、不管是校準(zhǔn)，還是日常檢測(cè)均因注意電源、濕度、防震、防磁等環(huán)境條件的影響。,校準(zhǔn)物,一、校準(zhǔn)物的來源,2．校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室提供的定值新鮮血 (要求直接或間接地溯源至參考方法),1．制造商推薦使用的校準(zhǔn)物,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,校準(zhǔn)物,二、校準(zhǔn)物的選擇,1．使用配套檢測(cè)系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室，可以使用制造商推薦使用的校準(zhǔn)物，也可使用新鮮血作為校準(zhǔn)物。,

8、2．使用非配套檢測(cè)系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室，只能使用新鮮血進(jìn)行儀器的校準(zhǔn)。,1．直接溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)的定值方法： 可使用血細(xì)胞分析的參考方法定值，但要求建立參考方法的難度較大，在臨床實(shí)驗(yàn)室難以實(shí)施。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,校準(zhǔn)物,新鮮血作為校準(zhǔn)物的定值,規(guī)范操作的檢測(cè)系統(tǒng)：使用配套試劑，用配套校準(zhǔn)物定期進(jìn)行儀器校準(zhǔn)，規(guī)范地開展室內(nèi)質(zhì)量控制，參加室間質(zhì)量評(píng)價(jià)成績(jī)優(yōu)良，人員經(jīng)過培訓(xùn)。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,2．間接溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)的定值方法：,校準(zhǔn)物,

9、新鮮血作為校準(zhǔn)物的定值,取新鮮血用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng) 或規(guī)范操作的檢測(cè)系統(tǒng) 對(duì)其進(jìn)行定值，用定值的新鮮血作為常規(guī)校準(zhǔn)物。要求在8小時(shí)內(nèi)（溫度條件為18℃-25℃）完成定值及儀器的校準(zhǔn)。,二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)：直接溯源至參考方法，具備較完善的質(zhì)量保證措施，與國外具有權(quán)威性的參考實(shí)驗(yàn)室定期進(jìn)行比對(duì)的檢測(cè)系統(tǒng)。,非指南內(nèi)容,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,校準(zhǔn)項(xiàng)目,WBC,RBC,Hb,Plt,Hct/MCV,校準(zhǔn)方法,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,1、按儀器說明書規(guī)定

10、的程序進(jìn)行校準(zhǔn)，如說明書規(guī)定的程序不完善時(shí)，也可按照如下程序進(jìn)行校準(zhǔn)。,2、儀器的準(zhǔn)備：用清潔劑對(duì)儀器內(nèi)部各通道及測(cè)試室處理30分鐘。確認(rèn)儀器的背景計(jì)數(shù)、精密度在說明書規(guī)定的范圍內(nèi)時(shí)，才可進(jìn)行校準(zhǔn)，否則須查找原因，必要時(shí)請(qǐng)維修人員進(jìn)行檢修。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,3、校準(zhǔn)物的準(zhǔn)備3.1 使用制造商提供的配套校準(zhǔn)物①將校準(zhǔn)物從冰箱內(nèi)（2-8℃）取出后，要求在室溫（18-25℃）條件下放置15分鐘，使其溫度恢復(fù)至室溫。②檢查校

11、準(zhǔn)物是否超出效期，是否有變質(zhì)或污染。③輕輕地將校準(zhǔn)物反復(fù)顛倒混勻，并置于兩手掌間慢慢搓動(dòng)，使校準(zhǔn)物充分混勻。④打開瓶塞時(shí)，應(yīng)墊上紗布或軟紙，使濺出的血液被吸收。⑤將兩瓶校準(zhǔn)物合在一起，混勻后再分裝于2個(gè)瓶?jī)?nèi)。,3.2 使用新鮮血作為校準(zhǔn)物時(shí)①用EDTA-K2為抗凝劑的真空采血管取健康人新鮮血，將新鮮血分裝于3個(gè)管內(nèi)。②取其中1管，用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)或規(guī)范操作的檢測(cè)系統(tǒng)連續(xù)檢測(cè)11次，計(jì)算第2-11次檢測(cè)結(jié)果的均值，以此

12、均值為新鮮血的定值。③其他2管新鮮血作為定值的校準(zhǔn)物，用于儀器的校準(zhǔn)及結(jié)果的驗(yàn)證。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,4、對(duì)校準(zhǔn)物進(jìn)行檢測(cè)取1瓶校準(zhǔn)物，連續(xù)檢測(cè)11次，第1次檢測(cè)結(jié)果不用，以防止攜帶污染。,5、儀器若無自動(dòng)校準(zhǔn)的功能，則將第2-11次的各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果用手工記錄在工作表格中，計(jì)算出均值，均值的小數(shù)點(diǎn)后數(shù)字保留位數(shù)較日常報(bào)告結(jié)果多一位。有自動(dòng)校準(zhǔn)功能的儀器可直接得出均值。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,6、均值與校準(zhǔn)物定值比較以判別是否需

13、要調(diào)整儀器 6.1計(jì)算各參數(shù)的均值與定值相差的百分?jǐn)?shù)（不計(jì)正負(fù)號(hào)），計(jì)算公式： （均值-定值）/定值×100% 與下表的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,6.2 判定：各參數(shù)均值與定值的差異全部等于或小于表中的第一列數(shù)值時(shí)，儀器不需進(jìn)行校準(zhǔn)，記錄檢測(cè)數(shù)據(jù)即可； 若各參數(shù)均值與定值的差異大于表中的第二列數(shù)值時(shí)，需請(qǐng)維修人員核查原因并進(jìn)行處理； 若各參數(shù)均值與定值的差異在表中第一列與第二列數(shù)

14、值之間時(shí)，需對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)整，調(diào)整方法可按說明書的要求進(jìn)行。 若儀器無自動(dòng)校準(zhǔn)功能，則將定值除以所測(cè)均值，求出校準(zhǔn)系數(shù)，將儀器原來的系數(shù)乘以校準(zhǔn)系數(shù)即為校準(zhǔn)后的系數(shù)，將校準(zhǔn)后的系數(shù)辦事入儀器更換原來的系數(shù)。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,7、校準(zhǔn)結(jié)果的驗(yàn)證 將第2管未用的校準(zhǔn)物充分混勻，在儀器上重得檢測(cè)11次，去除第1次結(jié)果，計(jì)算第2-11次檢測(cè)結(jié)果的均值，再次與表中的數(shù)值對(duì)照。如各參數(shù)的差異全部等于或小于第一列數(shù)值，

15、證明校準(zhǔn)合格。如達(dá)不到要求，須請(qǐng)維修人員進(jìn)行檢修。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,①血液分析儀在投入使用前（新安裝或舊儀器重新啟用）；②更換部件進(jìn)行維修后，可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性有影響；③儀器搬動(dòng)后，需要確認(rèn)檢測(cè)結(jié)果的可靠性；④室內(nèi)質(zhì)量控制顯示系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果有漂移時(shí)（排除儀器故障和試劑的影響因素后）；⑤比對(duì)結(jié)果超出允許范圍；⑥實(shí)驗(yàn)室認(rèn)為需要進(jìn)行校準(zhǔn)的其他情況。,血細(xì)胞分析校準(zhǔn)指南,復(fù)校時(shí)間間隔,1、對(duì)于開展常規(guī)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室，要求每半