血細(xì)胞分析儀的歷史

1、血細(xì)胞分析儀的歷史,檢驗(yàn)科 楊創(chuàng)杰,原始階段,1665年羅伯特·胡克（Robert Hooke，1635—1703）是英國著名的物理學(xué)家、生物學(xué)家。胡克于1635年7月18日出生于英格蘭懷特島弗雷什沃特村的一個(gè)牧師家庭。1665年，羅伯特·胡克根據(jù)一會(huì)員提供的資料設(shè)計(jì)了結(jié)構(gòu)相當(dāng)復(fù)雜的顯微鏡。有一次，他切了一塊軟木薄片，放在自己制造的顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)軟木片是由很多小室構(gòu)成的，各個(gè)小室之間都有壁隔開，像蜂房似的。胡克

2、給這樣的小室取名為“細(xì)胞”。,血液細(xì)胞的分類,原始的分類方法：最早的分類是血液離心后，血漿于紅細(xì)胞之間白色區(qū)域的細(xì)胞稱為白細(xì)胞。紅色部分稱為紅細(xì)胞。簡單的說就是根據(jù)顏色判別。,白細(xì)胞人體和動(dòng)物血液及組織中的無色細(xì)胞,白細(xì)胞還可以細(xì)分為五種類型。也可根據(jù)胞漿顆粒分為有顆粒和無顆粒兩類，顆粒白細(xì)胞（粒細(xì)胞）中含有特殊染色顆粒，用瑞氏染料染色可分辨出三種顆粒白細(xì)胞即中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。無顆粒白細(xì)胞無細(xì)胞質(zhì)顆粒，但有圓形細(xì)胞

3、核，包括單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。,紅細(xì)胞,在所有的脊椎動(dòng)物及若干無脊椎動(dòng)物，其血紅素（無脊椎動(dòng)物也有時(shí)是蚯蚓紅血朊）包含在特定的細(xì)胞中來進(jìn)行其機(jī)能活動(dòng)，這種血球稱為紅細(xì)胞,血小板的發(fā)現(xiàn),直到1882年意大利醫(yī)師J．B．比佐澤羅發(fā)現(xiàn)它們?cè)谘軗p傷后的止血過程中起著重要作用，才首次提出血小板的命名。 激活的血小板。血小板的主要功能是凝血和止血，修補(bǔ)破損的血管。在炎癥時(shí)也會(huì)升高。,細(xì)胞計(jì)數(shù),最早的計(jì)數(shù)是用計(jì)數(shù)板（最常用是牛鮑氏計(jì)數(shù)板）。1%鹽酸

4、破壞紅細(xì)胞后計(jì)數(shù)白細(xì)胞。沙里氏比色計(jì)計(jì)算血色素。血色素乘以3.3大約計(jì)數(shù)紅細(xì)胞。紅細(xì)胞、血小板最簡單都用生理鹽水稀釋后沖入計(jì)數(shù)池肉眼計(jì)數(shù)。,白細(xì)胞分類,,傳統(tǒng)方法評(píng)價(jià),手工計(jì)數(shù)是最經(jīng)典的計(jì)數(shù)方法。特別是涂片顯微鏡白細(xì)胞分類被視為金標(biāo)準(zhǔn)。再先進(jìn)的設(shè)備都不可能替代手工分類。缺點(diǎn)是：操作過程過于繁瑣，不適宜大批量檢測。,細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器,庫爾特兄弟發(fā)明了第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。其經(jīng)典的計(jì)數(shù)原理也被稱為庫爾特原理。,庫爾特細(xì)胞分析儀的誕生過程,自從2

5、0世紀(jì)50年代中期發(fā)明庫爾特原理后，庫爾特原理成為了行業(yè)的根基，響應(yīng)了對(duì)自動(dòng)化血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器的需求。華萊士·H. 庫爾特和他的兄弟小約瑟夫·R. 庫爾特提出了一種使細(xì)胞通過一個(gè)感測小孔的簡單想法以來，此行業(yè)的發(fā)展經(jīng)歷了三個(gè)階段。在第一個(gè)階段，華萊士希望將常規(guī)的紅血球計(jì)數(shù)工作變?yōu)樽詣?dòng)操作的愿望，促成了上述簡單想法的提出、庫爾特原理的定義、此原理的專利獲得、其被美國國立衛(wèi)生研究院認(rèn)可、以及在一次美國國家級(jí)研討會(huì)上對(duì)此原理

6、進(jìn)行了闡述。在第二個(gè)階段，庫爾特兄弟專注于商業(yè)化儀器的實(shí)用化，并專注于通過經(jīng)營公司來支持此儀器的生產(chǎn)和銷售。在第三個(gè)階段，針對(duì)感測孔功能特性引發(fā)的體積測定錯(cuò)誤，進(jìn)行了廣泛的研究；庫爾特兄弟不斷成長的公司找到了各種解決方案，從而開發(fā)了自動(dòng)化越來越高的血液分析儀。,最早的血細(xì)胞分析儀,,庫爾特兄弟后記,庫爾特兄弟最后將公司已一美元的價(jià)格出讓給了貝克曼公司，就一個(gè)條件就是貝克曼公司保留庫爾特的名字，最終叫貝克曼庫爾特公司。,血細(xì)胞計(jì)數(shù)現(xiàn)狀,現(xiàn)

7、在血細(xì)胞分析儀的優(yōu)點(diǎn)：1.速度快。2.項(xiàng)目多。（項(xiàng)目可以擴(kuò)展 CRP）3.易操作。4.精度高（血小板）,國產(chǎn)血細(xì)胞分析儀現(xiàn)狀,北京醫(yī)院1959年引入第一臺(tái)瑞典產(chǎn)細(xì)胞分析儀。上海工程師張根福仿照了第一臺(tái)國產(chǎn)血細(xì)胞分析儀。今年來邁瑞、優(yōu)利特、迪瑞等公司也在迎頭趕上。但是核心技術(shù)還是掌握在外國人手上。,第一臺(tái)真正五分類,1974年，一種名為HEMALOG D的具有初步白細(xì)胞分類功能的白細(xì)胞分析儀問世。 1982年Technico

8、n公司生產(chǎn)了H6000型血液細(xì)胞分析儀器， 應(yīng)該是首款具有白細(xì)胞五分類能力的儀器。同時(shí)代日本日立公司推出圖像分析法的白細(xì)胞分析儀HITACHI 8200型，僅僅是用于完成白細(xì)胞血片分類的儀器，沒有其他血細(xì)胞計(jì)數(shù)分析能力。 Technicon 公司1985 開發(fā)了比較成熟的具有白細(xì)胞五分類功能的Technicon H1 型血液細(xì)胞分析儀，隨后升級(jí)為H2型和H3型。 COULTER公司在1987 年開發(fā)研制其經(jīng)典VCS技術(shù)

9、，并推出持續(xù)具有多年影響力的、具有白細(xì)胞五分類功能的血液細(xì)胞分析儀MAXM 型。,,1990年前后，歐洲和日本許多廠家都陸續(xù)推出了各種類型的具有白細(xì)胞五分類功能的血細(xì)胞分析儀器。各廠家設(shè)計(jì)生產(chǎn)的此類血細(xì)胞分析儀，其在白細(xì)胞分類技術(shù)上原理各不相同，分析測定項(xiàng)目略有不同，且形式多樣，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，試劑種類和成分也趨。,vcs技術(shù),他V 代表體積測量，也就是傳統(tǒng)的電阻法原理，可將體積大小差異顯著的淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞 分開；C 代表高頻電導(dǎo)性，該技術(shù)

10、可直接測量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)間的差異，了解細(xì)胞內(nèi)部核漿比例和細(xì)胞內(nèi)化 學(xué)成分，可辨別細(xì)胞體積相同而內(nèi)部性質(zhì)不同的細(xì)胞，可將體積相近的淋巴細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞區(qū)分開，因 為他們的核質(zhì)比例明顯不同。S 代表激光散射，它可穿透細(xì)胞，探測細(xì)胞內(nèi)核分葉狀況和顆粒情況，通過 分析光散射信息對(duì)細(xì)胞內(nèi)顆粒性進(jìn)行分析，細(xì)胞內(nèi)顆粒粗的光反射強(qiáng)，因此可以用于單核細(xì)胞和三種粒細(xì) 胞的區(qū)分。通過綜合處理三個(gè)參數(shù)的特性，可全面對(duì)白細(xì)胞的各種特征進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)分析，得到五項(xiàng)白細(xì)

11、 胞分類結(jié)果,阻抗、激光散射和熒光染色技術(shù),采用阻抗、激光散射和熒光染色技術(shù)進(jìn)行五分類的儀器 這種技術(shù)主要應(yīng)用在 Sysmex 研制和開發(fā)的 SF-3000、SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血 液分析儀中。直流電阻抗法（DC）用于測量細(xì)胞體積大小。激光散射產(chǎn)生的前向散射光、側(cè)向散射光可用 于探測白細(xì)胞體積大小、細(xì)胞內(nèi)含物的情況（細(xì)胞核以及顆粒情況） ，側(cè)向熒光則可以反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)脫氧核糖 核酸（DNA）和

12、核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒細(xì)胞檢測溶血?jiǎng)?Strmatolyzer-EO 可將除了嗜酸 細(xì)胞以外的所有細(xì)胞溶解或萎縮，含有完整嗜酸細(xì)胞的液體通過小孔可以按照電阻法計(jì)數(shù)技術(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。 在嗜堿細(xì)胞通道中，使用特殊溶血?jiǎng)?Strmatolyzer-BA 可將除了嗜堿細(xì)胞以外的所有細(xì)胞溶解或萎縮，含 有完整嗜堿細(xì)胞的液體通過小孔可以按照電陽法計(jì)數(shù)技術(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，幼稚細(xì)胞檢查通道（IMI）可以根據(jù)幼 稚細(xì)胞膜比成熟細(xì)胞膜表面含有脂質(zhì)較

13、少的現(xiàn)象，在細(xì)胞稀釋懸液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，結(jié) 合在幼稚細(xì)胞表現(xiàn)氨基酸較多，對(duì)溶血?jiǎng)┯械挚棺饔?，?dāng)加人溶血?jiǎng)┖蟪墒旒?xì)胞易被溶解，而幼稚細(xì)胞不 易被破壞，可通過電阻法檢測出來。綜合各個(gè)測量方法，得到白細(xì)胞五分類的圖形和數(shù)據(jù),更加方便、更加適用、更多功能、更加準(zhǔn)確、更加 速度和更多參數(shù)的血液分析儀，已經(jīng)是各血液分析儀生產(chǎn)廠商的目標(biāo)。,1.血常規(guī)檢驗(yàn)多參數(shù)化 近年來許多儀器都在增加新的參數(shù)以滿足臨床在診斷和鑒別診斷方面的需求。最早

14、加入并得到公認(rèn)的 參數(shù)是紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW） 。目前該參數(shù)已經(jīng)成為許多型號(hào)血細(xì)胞分析儀的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)，在各種貧血 的診斷和治療中起著重要作用，而該參數(shù)是很難應(yīng)用人工方法測定的。以后有關(guān)血平均小板體積（MPV） 、 血小板體驗(yàn)積分布寬度（PDW） 、血小板壓積（PCT） 、大血小板比率、血紅蛋白濃度分布寬度、異常淋巴細(xì) 胞提示、幼稚細(xì)胞提示等各種參數(shù)和功能也不斷的添加到一些品牌的儀器上，目前有的儀器甚至可以提供 40～50種測量或計(jì)算

15、參數(shù)。但很多的新參數(shù)目前仍不能應(yīng)用于臨床，僅限于實(shí)驗(yàn)室或供研究使用。,更加方便、更加適用、更多功能、更加準(zhǔn)確、更加 速度和更多參數(shù)的血液分析儀，已經(jīng)是各血液分析儀生產(chǎn)廠商的目標(biāo)。,2.多功能合成擴(kuò)展 血細(xì)胞分析儀已經(jīng)不僅僅局限在進(jìn)行常規(guī)血細(xì)胞分析，它增加了許多擴(kuò)展功能。例如將網(wǎng)織紅細(xì)胞的 計(jì)數(shù)和分析功能加人其中， 一些儀器另外增加了幼稚細(xì)胞分析和有核紅細(xì)胞分析功 能，例如 SYSMEXSF-3000/SE-9000/SE-9500/XE

16、-2100；BAYETRADVLA120；ABBOTTCELL－DYN/3500/4000等。 更有一些儀器把流式細(xì)胞分析儀的某些簡單功能進(jìn)行了合并，這樣在常規(guī)血液分析儀上就可以得到某些淋 巴細(xì)胞亞群的分析結(jié)果，例如在 COULTERSTKS 上可以同時(shí)測定 CD4TCD8，在 ADVLAZ120G 型血液細(xì)胞分析儀 上又將腦脊液的細(xì)胞分析功能加人進(jìn)來，使用特殊的試劑和程度，可對(duì)腦脊液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞和分類 進(jìn)行測定。 3檢測速度的提