血細胞分析儀的歷史

1、血細胞分析儀的歷史,檢驗科 楊創(chuàng)杰,原始階段,1665年羅伯特·胡克（Robert Hooke，1635—1703）是英國著名的物理學家、生物學家。胡克于1635年7月18日出生于英格蘭懷特島弗雷什沃特村的一個牧師家庭。1665年，羅伯特·胡克根據(jù)一會員提供的資料設計了結(jié)構相當復雜的顯微鏡。有一次，他切了一塊軟木薄片，放在自己制造的顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)軟木片是由很多小室構成的，各個小室之間都有壁隔開，像蜂房似的。胡克

2、給這樣的小室取名為“細胞”。,血液細胞的分類,原始的分類方法：最早的分類是血液離心后，血漿于紅細胞之間白色區(qū)域的細胞稱為白細胞。紅色部分稱為紅細胞。簡單的說就是根據(jù)顏色判別。,白細胞人體和動物血液及組織中的無色細胞,白細胞還可以細分為五種類型。也可根據(jù)胞漿顆粒分為有顆粒和無顆粒兩類，顆粒白細胞（粒細胞）中含有特殊染色顆粒，用瑞氏染料染色可分辨出三種顆粒白細胞即中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞。無顆粒白細胞無細胞質(zhì)顆粒，但有圓形細胞

3、核，包括單核細胞和淋巴細胞。,紅細胞,在所有的脊椎動物及若干無脊椎動物，其血紅素（無脊椎動物也有時是蚯蚓紅血朊）包含在特定的細胞中來進行其機能活動，這種血球稱為紅細胞,血小板的發(fā)現(xiàn),直到1882年意大利醫(yī)師J．B．比佐澤羅發(fā)現(xiàn)它們在血管損傷后的止血過程中起著重要作用，才首次提出血小板的命名。 激活的血小板。血小板的主要功能是凝血和止血，修補破損的血管。在炎癥時也會升高。,細胞計數(shù),最早的計數(shù)是用計數(shù)板（最常用是牛鮑氏計數(shù)板）。1%鹽酸

4、破壞紅細胞后計數(shù)白細胞。沙里氏比色計計算血色素。血色素乘以3.3大約計數(shù)紅細胞。紅細胞、血小板最簡單都用生理鹽水稀釋后沖入計數(shù)池肉眼計數(shù)。,白細胞分類,,傳統(tǒng)方法評價,手工計數(shù)是最經(jīng)典的計數(shù)方法。特別是涂片顯微鏡白細胞分類被視為金標準。再先進的設備都不可能替代手工分類。缺點是：操作過程過于繁瑣，不適宜大批量檢測。,細胞計數(shù)儀器,庫爾特兄弟發(fā)明了第一臺血細胞計數(shù)儀。其經(jīng)典的計數(shù)原理也被稱為庫爾特原理。,庫爾特細胞分析儀的誕生過程,自從2

5、0世紀50年代中期發(fā)明庫爾特原理后，庫爾特原理成為了行業(yè)的根基，響應了對自動化血細胞計數(shù)儀器的需求。華萊士·H. 庫爾特和他的兄弟小約瑟夫·R. 庫爾特提出了一種使細胞通過一個感測小孔的簡單想法以來，此行業(yè)的發(fā)展經(jīng)歷了三個階段。在第一個階段，華萊士希望將常規(guī)的紅血球計數(shù)工作變?yōu)樽詣硬僮鞯脑竿?，促成了上述簡單想法的提出、庫爾特原理的定義、此原理的專利獲得、其被美國國立衛(wèi)生研究院認可、以及在一次美國國家級研討會上對此原理

6、進行了闡述。在第二個階段，庫爾特兄弟專注于商業(yè)化儀器的實用化，并專注于通過經(jīng)營公司來支持此儀器的生產(chǎn)和銷售。在第三個階段，針對感測孔功能特性引發(fā)的體積測定錯誤，進行了廣泛的研究；庫爾特兄弟不斷成長的公司找到了各種解決方案，從而開發(fā)了自動化越來越高的血液分析儀。,最早的血細胞分析儀,,庫爾特兄弟后記,庫爾特兄弟最后將公司已一美元的價格出讓給了貝克曼公司，就一個條件就是貝克曼公司保留庫爾特的名字，最終叫貝克曼庫爾特公司。,血細胞計數(shù)現(xiàn)狀,現(xiàn)

7、在血細胞分析儀的優(yōu)點：1.速度快。2.項目多。（項目可以擴展 CRP）3.易操作。4.精度高（血小板）,國產(chǎn)血細胞分析儀現(xiàn)狀,北京醫(yī)院1959年引入第一臺瑞典產(chǎn)細胞分析儀。上海工程師張根福仿照了第一臺國產(chǎn)血細胞分析儀。今年來邁瑞、優(yōu)利特、迪瑞等公司也在迎頭趕上。但是核心技術還是掌握在外國人手上。,第一臺真正五分類,1974年，一種名為HEMALOG D的具有初步白細胞分類功能的白細胞分析儀問世。 1982年Technico

8、n公司生產(chǎn)了H6000型血液細胞分析儀器， 應該是首款具有白細胞五分類能力的儀器。同時代日本日立公司推出圖像分析法的白細胞分析儀HITACHI 8200型，僅僅是用于完成白細胞血片分類的儀器，沒有其他血細胞計數(shù)分析能力。 Technicon 公司1985 開發(fā)了比較成熟的具有白細胞五分類功能的Technicon H1 型血液細胞分析儀，隨后升級為H2型和H3型。 COULTER公司在1987 年開發(fā)研制其經(jīng)典VCS技術

9、，并推出持續(xù)具有多年影響力的、具有白細胞五分類功能的血液細胞分析儀MAXM 型。,,1990年前后，歐洲和日本許多廠家都陸續(xù)推出了各種類型的具有白細胞五分類功能的血細胞分析儀器。各廠家設計生產(chǎn)的此類血細胞分析儀，其在白細胞分類技術上原理各不相同，分析測定項目略有不同，且形式多樣，結(jié)構復雜，試劑種類和成分也趨。,vcs技術,他V 代表體積測量，也就是傳統(tǒng)的電阻法原理，可將體積大小差異顯著的淋巴細胞和粒細胞 分開；C 代表高頻電導性，該技術

10、可直接測量細胞內(nèi)部結(jié)構間的差異，了解細胞內(nèi)部核漿比例和細胞內(nèi)化 學成分，可辨別細胞體積相同而內(nèi)部性質(zhì)不同的細胞，可將體積相近的淋巴細胞和嗜堿性細胞區(qū)分開，因 為他們的核質(zhì)比例明顯不同。S 代表激光散射，它可穿透細胞，探測細胞內(nèi)核分葉狀況和顆粒情況，通過 分析光散射信息對細胞內(nèi)顆粒性進行分析，細胞內(nèi)顆粒粗的光反射強，因此可以用于單核細胞和三種粒細 胞的區(qū)分。通過綜合處理三個參數(shù)的特性，可全面對白細胞的各種特征進行綜合評價分析，得到五項白細

11、 胞分類結(jié)果,阻抗、激光散射和熒光染色技術,采用阻抗、激光散射和熒光染色技術進行五分類的儀器 這種技術主要應用在 Sysmex 研制和開發(fā)的 SF-3000、SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血 液分析儀中。直流電阻抗法（DC）用于測量細胞體積大小。激光散射產(chǎn)生的前向散射光、側(cè)向散射光可用 于探測白細胞體積大小、細胞內(nèi)含物的情況（細胞核以及顆粒情況） ，側(cè)向熒光則可以反應細胞內(nèi)脫氧核糖 核酸（DNA）和

12、核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒細胞檢測溶血劑 Strmatolyzer-EO 可將除了嗜酸 細胞以外的所有細胞溶解或萎縮，含有完整嗜酸細胞的液體通過小孔可以按照電阻法計數(shù)技術進行計數(shù)。 在嗜堿細胞通道中，使用特殊溶血劑 Strmatolyzer-BA 可將除了嗜堿細胞以外的所有細胞溶解或萎縮，含 有完整嗜堿細胞的液體通過小孔可以按照電陽法計數(shù)技術進行計數(shù)，幼稚細胞檢查通道（IMI）可以根據(jù)幼 稚細胞膜比成熟細胞膜表面含有脂質(zhì)較

13、少的現(xiàn)象，在細胞稀釋懸液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，結(jié) 合在幼稚細胞表現(xiàn)氨基酸較多，對溶血劑有抵抗作用，當加人溶血劑后成熟細胞易被溶解，而幼稚細胞不 易被破壞，可通過電阻法檢測出來。綜合各個測量方法，得到白細胞五分類的圖形和數(shù)據(jù),更加方便、更加適用、更多功能、更加準確、更加 速度和更多參數(shù)的血液分析儀，已經(jīng)是各血液分析儀生產(chǎn)廠商的目標。,1.血常規(guī)檢驗多參數(shù)化 近年來許多儀器都在增加新的參數(shù)以滿足臨床在診斷和鑒別診斷方面的需求。最早

14、加入并得到公認的 參數(shù)是紅細胞體積分布寬度（RDW） 。目前該參數(shù)已經(jīng)成為許多型號血細胞分析儀的標準參數(shù)，在各種貧血 的診斷和治療中起著重要作用，而該參數(shù)是很難應用人工方法測定的。以后有關血平均小板體積（MPV） 、 血小板體驗積分布寬度（PDW） 、血小板壓積（PCT） 、大血小板比率、血紅蛋白濃度分布寬度、異常淋巴細 胞提示、幼稚細胞提示等各種參數(shù)和功能也不斷的添加到一些品牌的儀器上，目前有的儀器甚至可以提供 40～50種測量或計算

15、參數(shù)。但很多的新參數(shù)目前仍不能應用于臨床，僅限于實驗室或供研究使用。,更加方便、更加適用、更多功能、更加準確、更加 速度和更多參數(shù)的血液分析儀，已經(jīng)是各血液分析儀生產(chǎn)廠商的目標。,2.多功能合成擴展 血細胞分析儀已經(jīng)不僅僅局限在進行常規(guī)血細胞分析，它增加了許多擴展功能。例如將網(wǎng)織紅細胞的 計數(shù)和分析功能加人其中， 一些儀器另外增加了幼稚細胞分析和有核紅細胞分析功 能，例如 SYSMEXSF-3000/SE-9000/SE-9500/XE

16、-2100；BAYETRADVLA120；ABBOTTCELL－DYN/3500/4000等。 更有一些儀器把流式細胞分析儀的某些簡單功能進行了合并，這樣在常規(guī)血液分析儀上就可以得到某些淋 巴細胞亞群的分析結(jié)果，例如在 COULTERSTKS 上可以同時測定 CD4TCD8，在 ADVLAZ120G 型血液細胞分析儀 上又將腦脊液的細胞分析功能加人進來，使用特殊的試劑和程度，可對腦脊液中的紅細胞、白細胞和分類 進行測定。 3檢測速度的提