藥物毒理學(xué)進(jìn)展-中華食品信息網(wǎng)---宣傳食品安全知識(shí)，引導(dǎo)

1、保健食品毒理學(xué)安全性評價(jià),北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部 毒理學(xué)系 周宗燦電話：（010）8280 1531 13501340721,,反應(yīng)停thalidomide,,,保健食品毒理學(xué)安全性評價(jià),一。毒理學(xué)基礎(chǔ)二。保健食品安全性毒理學(xué)評價(jià)規(guī)范 （2003）三。毒理學(xué)試驗(yàn)及結(jié)果判定四。安全評價(jià)工作中的有關(guān)問題五。注意點(diǎn)

2、和進(jìn)展,,一。毒理學(xué)基礎(chǔ),安全性 安全性是首先關(guān)注的問題 （審批制和備案制） 保健食品（審批制）：非自愿風(fēng)險(xiǎn) 藥品：自愿風(fēng)險(xiǎn)有效性,,毒理學(xué)（toxicology）,從生物醫(yī)學(xué)角度研究化學(xué)物質(zhì)對生物機(jī)體的損害作用及其機(jī)制的科學(xué)。任何一種化學(xué)物在一定條件下都可能是對機(jī)體產(chǎn)生任有害作用。,毒理學(xué),描述毒理學(xué)、機(jī)制毒理學(xué)、管理毒理學(xué) （法規(guī)毒理學(xué)）毒

3、作用譜： 系統(tǒng)毒性；致突變；致畸；致癌,劑量軸,100┫% ┫ ** ┫ ○ ┫ ┫ 50 ┫ ┫ ┫ * ┫

4、 ○ ┫ ○ ┗┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳ 15 30 60 NOAEL LOAEL mg/kg 閾,,,,毒作用劑量—反應(yīng)關(guān)系,描

5、述毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則,○化學(xué)物在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生的作用，可以外推于人?！饘?shí)驗(yàn)動(dòng)物必須暴露于高劑量，這是發(fā)現(xiàn)對人潛在危害的必需的和可靠的方法。○成年的健康（雄性和雌性未孕）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人可能的暴露途徑是基本的選擇。,,檢測和評價(jià),人擬用劑量 100倍 ↓

6、 ↓藥物A ┕──────────────┘ 30倍 毒性作用 ↓ ↓藥物B ┕────┘ ∴毒性B > A 無毒性 毒性作用

7、 安全性 A > B ? 作用,毒性評價(jià)試驗(yàn)的基本目的,○ 受試物毒作用的表現(xiàn)和性質(zhì)○ 劑量-反應(yīng)(效應(yīng))研究○ 確定毒作用的靶器官○ 確定損害的可逆性,,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物種選擇,○對受試物在代謝、生化和毒理學(xué)特征與人最接近的物種；○選擇自然壽命不太長的物種；○易于飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)操作的物種；○經(jīng)濟(jì)并易于獲得的物種。常規(guī)選擇物種的方式是利用兩個(gè)物種，一種是嚙齒類，另一種是非嚙齒類。系統(tǒng)毒性研究

8、最常用的嚙齒類是大鼠和小鼠，非嚙齒類是狗。,,物種選擇,○急性毒性試驗(yàn)常用 大鼠、小鼠、狗○亞慢性、慢性毒性試驗(yàn)常用 大鼠、狗○皮膚刺激試驗(yàn)和致敏試驗(yàn)常用 豚鼠○皮膚刺激試驗(yàn)和眼刺激試驗(yàn)常用 兔○遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)多用 小鼠○致畸試驗(yàn)常用 大鼠、小鼠和兔○致癌試驗(yàn)常用 大鼠和小鼠○遲發(fā)性神經(jīng)毒性試驗(yàn)常用 母雞,,染毒途徑,毒理學(xué)試驗(yàn)中染毒途徑的選擇，應(yīng)盡可能模擬人在接觸該受試物的方式。最常用的染毒途徑為經(jīng)口、經(jīng)

9、呼吸道、經(jīng)皮途徑。,,溶劑和賦型劑,染毒前根據(jù)染毒途徑的不同，應(yīng)將受試物制備成一定的劑型。常用的是制備成水溶液、油溶液或混懸液。對溶劑和助溶劑的要求是：①所用的溶劑或助溶劑應(yīng)該是無毒或?qū)嶋H無毒②與受試物不起反應(yīng)，受試物在溶液中應(yīng)穩(wěn)定；③與受試物的毒動(dòng)學(xué)和毒效學(xué)無顯著影響；④無特殊刺激性或氣味。,,溶劑和賦型劑,對水溶性受試物，體內(nèi)試驗(yàn)首選的溶劑為水（經(jīng)口染毒）和等滲鹽水（胃腸道外染毒）。水不溶性受試物應(yīng)溶于或懸浮于適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)

10、溶劑中?；鞈乙鹤畛Ｓ玫馁x形劑為0.5%羧甲基纖維素鈉或10%阿拉伯樹膠。受試物溶液應(yīng)新鮮配制，除非已證明貯存穩(wěn)定。,,美國藥劑協(xié)會(huì)（1986）推薦的常用溶劑和賦型劑,一般推薦的染毒最大容積,（1）經(jīng)口20ml/kg（對空腹動(dòng)物）；（2）經(jīng)皮2ml/kg（根據(jù)體表面積計(jì)算，限于染毒的準(zhǔn)確性）；（3）靜脈1ml/kg（5分鐘以上）；（4）肌肉注射0.5ml/kg（一個(gè)部位）；（5）每眼0.01ml；（6）直腸0.5ml/kg；

11、（7）陰道：大鼠0.2ml, 兔1ml；（8）吸入2mg/L；（9）鼻：猴或犬每鼻孔0.1ml。,,安全系數(shù)·不確定系數(shù),不確定系數(shù)100倍 物種間差異10倍 個(gè)體間差異10倍 毒效學(xué) 毒動(dòng)學(xué) 毒效學(xué) 毒動(dòng)學(xué) 100.4 100.6 100.5

12、 100.5 (2.5) (4.0) (3.2) (3.2),,,,,,,,二。保健食品安全性毒理學(xué)評價(jià)規(guī)范（2003）,食品衛(wèi)生法、保健食品管理辦法的要求保健食品必須符合食品衛(wèi)生要求，對人體不產(chǎn)生任何急性、亞急性或慢性危害。第一部分：毒理學(xué)評價(jià)程序第二部分：毒理學(xué)檢驗(yàn)方法,第一部分：毒理學(xué)評價(jià)程序,主題內(nèi)容與適用范圍對受試物的要求 對受試物處理的

13、要求保健食品安全性毒理學(xué)評價(jià)試驗(yàn)的四個(gè)階段和內(nèi)容不同保健食品選擇毒性試驗(yàn)的原則要求 保健食品安全性毒理學(xué)評價(jià)試驗(yàn)的目的和結(jié)果判定保健食品毒理學(xué)安全性評價(jià)時(shí)應(yīng)考慮的問題,（一）主題內(nèi)容與適用范圍,本程序規(guī)定了保健食品安全性毒理學(xué)評價(jià)的統(tǒng)一規(guī)程。本程序適用于保健食品的安全性評價(jià)。,（二）對受試物的要求,以單一已知化學(xué)成分為原料的受試物；含有多種原料的配方產(chǎn)品。提供原料來源、生產(chǎn)工藝、推薦人體攝入量、使用說明書等有關(guān)資料。受

14、試物應(yīng)是符合既定配方和生產(chǎn)工藝的規(guī)格化產(chǎn)品，其組成成分、比例及純度應(yīng)與實(shí)際產(chǎn)品相同。,（三）對受試物處理的要求,介質(zhì)的選擇人的可能攝入量較大的受試物處理袋泡茶類受試物的處理膨脹系數(shù)較高的受試物處理液體保健食品濃縮含乙醇的保健食品含有人體必需營養(yǎng)素等物質(zhì)的保健食品益生菌等微生物類保健食品以雞蛋等食品為載體的特殊保健食品,衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2002]51號(hào)文件,1.《關(guān)于進(jìn)一步規(guī)范保健食品原料管理的通知（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2002]51號(hào)）

15、》對保健食品涉及的各種原料物質(zhì)的管理與安全性評價(jià)作了詳細(xì)規(guī)定，將原料分為三類：藥食同源（附件1）；可用于保健食品（附件2）；禁用于保健食品（附件3）。,《通知》的主要內(nèi)容,申報(bào)保健食品中涉及的物品（或原料）是我國新研制、新發(fā)現(xiàn)、新引進(jìn)的無食用習(xí)慣或僅在個(gè)別地區(qū)有食用習(xí)慣的，按照《新資源食品衛(wèi)生管理辦法》的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。申報(bào)保健食品中涉及食品添加劑的，按照《食品添加劑衛(wèi)生管理辦法》的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。申報(bào)保健食品中涉及真菌、益

16、生菌等物品（或原料）的，按照我部印發(fā)的《衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)真菌類和益生菌類保健食品評審規(guī)定的通知》（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2001]84號(hào)）執(zhí)行。,,丁香、八角茴香、刀豆、小茴香、小薊、山藥、山楂、馬齒莧、烏梢蛇、烏梅、木瓜、火麻仁、代代花、玉竹、甘草、白芷、白果、白扁豆、白扁豆花、龍眼肉（桂圓）、決明子、百合、肉豆蔻、肉桂、余甘子、佛手、杏仁（甜、苦）、沙棘、牡蠣、芡實(shí)、花椒、赤小豆、阿膠、雞內(nèi)金、麥芽、昆布、棗（大棗、酸棗、黑棗）、羅漢果、郁李仁、

17、金銀花、青果、魚腥草、姜（生姜、干姜）、枳子、枸杞子、梔子、砂仁、胖大海、茯苓、香櫞、香薷、桃仁、桑葉、桑椹、桔紅、桔梗、益智仁、荷葉、萊菔子、蓮子、高良姜、淡竹葉、淡豆豉、菊花、菊苣、黃芥子、黃精、紫蘇、紫蘇籽、葛根、黑芝麻、黑胡椒、槐米、槐花、蒲公英、蜂蜜、榧子、酸棗仁、鮮白茅根、鮮蘆根、蝮蛇、橘皮、薄荷、薏苡仁、薤白、覆盆子、藿香。 87,附件1 既是食品又是藥品的物品名單,,人參、人參葉、人參果、三七、土茯苓、大薊、女貞子、

18、山茱萸、川牛膝、川貝母、川芎、馬鹿胎、馬鹿茸、馬鹿骨、丹參、五加皮、五味子、升麻、天門冬、天麻、太子參、巴戟天、木香、木賊、牛蒡子、牛蒡根、車前子、車前草、北沙參、平貝母、玄參、生地黃、生何首烏、白及、白術(shù)、白芍、白豆蔻、石決明、石斛（需提供可使用證明）、地骨皮、當(dāng)歸、竹茹、紅花、紅景天、西洋參、吳茱萸、懷牛膝、杜仲、杜仲葉、沙苑子、牡丹皮、蘆薈、蒼術(shù)、補(bǔ)骨脂、訶子、赤芍、遠(yuǎn)志、麥門冬、龜甲、佩蘭、側(cè)柏葉、制大黃、制何首烏、刺五加、刺玫

19、果、澤蘭、澤瀉、玫瑰花、玫瑰茄、知母、羅布麻、苦丁茶、金蕎麥、金櫻子、青皮、厚樸、厚樸花、姜黃、枳殼、枳實(shí)、柏子仁、珍珠、絞股藍(lán)、胡蘆巴、茜草、蓽茇、韭菜子、首烏藤、香附、骨碎補(bǔ)、黨參、桑白皮、桑枝、浙貝母、益母草、積雪草、淫羊藿、菟絲子、野菊花、銀杏葉、黃芪、湖北貝母、番瀉葉、蛤蚧、越橘、槐實(shí)、蒲黃、蒺藜、蜂膠、酸角、墨旱蓮、熟大黃、熟地黃、鱉甲。 114,附件2 可用于保健食品的物品名單,,八角蓮、八里麻、千金子、土青木香、山

20、莨菪、川烏、廣防己、馬桑葉、馬錢子、六角蓮、天仙子、巴豆、水銀、長春花、甘遂、生天南星、生半夏、生白附子、生狼毒、白降丹、石蒜、關(guān)木通、農(nóng)吉痢、夾竹桃、朱砂、米殼（罌粟殼）、紅升丹、紅豆杉、紅茴香、紅粉、羊角拗、羊躑躅、麗江山慈姑、京大戟、昆明山海棠、河豚、鬧羊花、青娘蟲、魚藤、洋地黃、洋金花、牽牛子、砒石（白砒、紅砒、砒霜）、草烏、香加皮（杠柳皮）、駱駝蓬、鬼臼、莽草、鐵棒槌、鈴蘭、雪上一枝蒿、黃花夾竹桃、斑蝥、硫磺、雄黃、雷公藤、顛

21、茄、藜蘆、蟾酥。 59,附件3 保健食品禁用物品名單,,保健食品原料安全性評價(jià)要求,藥食同源（附件1）87種: 可免可用于保健食品（附件2）114種: 二階段？？？？: 見下禁用于保健食品（附件3）59種。,,以普通食品、衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)和允許用作保健食品的物質(zhì)以外的動(dòng)植物或動(dòng)植物提取物、微生物、化學(xué)合成物為原料生產(chǎn)的保健食品，應(yīng)對該原料和用該原料生產(chǎn)的保健食品分別進(jìn)行安全性評價(jià)。 該原料原則上按以下四種情況

22、確定試驗(yàn)內(nèi)容。用該原料生產(chǎn)的保健食品原則上須進(jìn)行第一、二階段的毒性試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行下一階段的毒性試驗(yàn)。,安全性評價(jià)要求,國內(nèi)外均無食用歷史的原料或成分: 四個(gè)階段的毒性試驗(yàn)。僅在國外少數(shù)國家或國內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分，第一、二、三階段的毒性試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行第四階段毒性試驗(yàn)。未發(fā)現(xiàn)有毒或毒性甚微以及較大數(shù)量人群有長期食用歷史，第一、二階段的毒性試驗(yàn)，必要時(shí)第三階段毒性試驗(yàn)。國際組織已對其進(jìn)行過系統(tǒng)的毒理學(xué)安全性評價(jià)，先

23、進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)。必要時(shí)第三階段毒性試驗(yàn)。在國外多個(gè)國家廣泛食用的原料，進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行下一階段毒性試驗(yàn)。,不同保健食品選擇毒性試驗(yàn)原則,2 . 益生菌類及真菌類保健食品評審規(guī)定,益生菌類及真菌類保健食品必須安全可靠，即食用安全，無不良反應(yīng)；生產(chǎn)用菌種的生物學(xué)、遺傳學(xué)、功效學(xué)特性明確和穩(wěn)定；可用于保健食品的益生菌及真菌類菌種名單由衛(wèi)生部公布。,菌種來源及國內(nèi)外安全食用資料，菌種的安全性評價(jià)資料

24、(包括毒力試驗(yàn))，對經(jīng)過馴化、誘變的菌種，應(yīng)提供馴化、誘變的方法及馴化劑、誘變劑等資料。菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害，不得在生產(chǎn)用培養(yǎng)基內(nèi)加入有毒有害物質(zhì)和致敏性物質(zhì)?？股睾驼婢臋z測。在發(fā)酵過程中不得加入具有功效成分的動(dòng)植物及其它物質(zhì)。益生菌的主種子傳代不超過10代，工作種子傳代不得超過5代。經(jīng)過基因修飾的菌種不得用于保健食品。,益生菌類及真菌類,益生菌、真菌菌種名單,《以酶制劑等為原料的保健食品評審規(guī)定》衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[200

25、2]100號(hào),酶制劑①. 菌種來源及衛(wèi)生部認(rèn)定的檢定單位出具的菌種檢定報(bào)告；②. 菌種的毒力試驗(yàn)報(bào)告；③. 菌種的安全性評價(jià)報(bào)告；④. 國內(nèi)外該菌種使用于食品生產(chǎn)的文獻(xiàn)資料；⑤. 發(fā)酵終產(chǎn)物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（包括純度、雜質(zhì)成分及含量）。,《以酶制劑等為原料的保健食品評審規(guī)定》衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2002]100號(hào),①. 提供明確的產(chǎn)品化學(xué)結(jié)構(gòu)式、物理化學(xué)性質(zhì)，配體與金屬離子之比、游離元素和總元素之比；②. 提供氨基酸螯合物定性、定量的檢測

26、方法（包括原料和產(chǎn)品）以及衛(wèi)生部認(rèn)定的檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的驗(yàn)證報(bào)告；③. 毒理學(xué)安全評價(jià)資料④. 國內(nèi)外該氨基酸螯合物用于食品生產(chǎn)的文獻(xiàn)資料。,氨基酸螯合物,對申報(bào)某些保健功能的食品進(jìn)行檢測的興奮劑主要有七大類：雄性激素(類固醇)、麻醉劑(可待因、杜冷丁等)、β-2受體阻斷劑(心得安、心得舒等)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮劑(士的寧、芬氟拉明、麻黃素、咖啡因等)、利尿劑(速尿、利尿酸、安體舒通等)、β-激動(dòng)劑(瘦肉精等)、肽類激素

27、(生長激素、紅細(xì)胞生成素等)。,興奮劑檢測,第二部分：毒理學(xué)評價(jià)方法,試驗(yàn)的四個(gè)階段和內(nèi)容第一階段：急性毒性試驗(yàn)第二階段：遺傳毒性試驗(yàn)，30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，傳統(tǒng)致畸試驗(yàn) 第三階段：亞慢性毒性試驗(yàn)：90天喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、代謝試驗(yàn)第四階段：慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)）,選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則要求,以衛(wèi)生部規(guī)定允許用于保健食品的動(dòng)植物或動(dòng)植物提取物（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)［2002］51號(hào)附件2）或微生物（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)［2001］84號(hào)附件2和5）為原料

28、生產(chǎn)的保健食品 ，應(yīng)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變試驗(yàn)和30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和第三階段毒性試驗(yàn)。,選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則要求,普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)［2002］51號(hào)附件1）以傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)且食用方式與傳統(tǒng)食用方式相同的保健食品，一般不要求進(jìn)行毒性實(shí)驗(yàn)。用水提物配制生產(chǎn)的保健食品，如服用量為常規(guī)用量，一般不要求進(jìn)行毒性試驗(yàn)。如服用量大于常規(guī)用量時(shí)，需進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變試驗(yàn)和30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，

29、必要時(shí)進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)。用水提以外的工藝生產(chǎn)的保健食品，服用量為常規(guī)用量時(shí)，應(yīng)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變試驗(yàn)。如服用量大于常規(guī)用量時(shí)，需增加30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和第三階段毒性試驗(yàn)。,選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則要求,營養(yǎng)補(bǔ)充劑用已列入營養(yǎng)強(qiáng)化劑名單的營養(yǎng)素的化合物為原料生產(chǎn)的保健食品，如其原料來源、生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量均符合國家有關(guān)要求，一般不要求進(jìn)行毒性試驗(yàn)。,三。毒理學(xué)試驗(yàn)及結(jié)果判定,急性毒性試驗(yàn)：如LD50小于人的

30、可能攝入量的100倍，則放棄該受試物用于保健食品。如LD50大于或等于100倍者，則可考慮進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。如動(dòng)物未出現(xiàn)死亡的劑量大于或等于10g/kgBW（涵蓋人體推薦量的100倍），則可進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。對人的可能攝入量較大和其它一些特殊原料的保健食品，按最大耐受量法給予最大劑量動(dòng)物未出現(xiàn)死亡，也可進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。,,遺傳毒性試驗(yàn)：,○ Ames試驗(yàn)或V79/HGPRT、 TK基因突變試驗(yàn)○骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)

31、或哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)○小鼠精子畸形分析或睪丸染色體畸變分析○其它備選遺傳毒性試驗(yàn)：顯性致死試驗(yàn)、果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)、非程序性DNA合成實(shí)驗(yàn),遺傳毒性試驗(yàn)結(jié)果的判定,三項(xiàng)試驗(yàn),體外或體內(nèi)有一項(xiàng)或以上試驗(yàn)陽性，放棄該受試物用于保健食品。如三項(xiàng)試驗(yàn)均為陰性，則進(jìn)入下一步的毒性試驗(yàn)。,3. 30天喂養(yǎng)試驗(yàn),最大未觀察到有害作用劑量大于或等于人的可能攝入量的100倍，可進(jìn)行安全性評價(jià)。特殊原料：在最大灌胃劑量組或在飼料中的

32、最大摻入量劑量組未發(fā)現(xiàn)有毒性作用，可進(jìn)行安全性評價(jià)[至少大于或等于人的可能攝入量的70倍]。特殊功能的保健食品應(yīng)進(jìn)行具體分析。,長期毒性試驗(yàn),外觀 ┐ 亞慢性、慢性生長發(fā)育(體重)├ 毒性試驗(yàn) 體液行為 │ 過程中 ?血液學(xué)毒性體征 ┘

33、 ↓ ?血清生化學(xué) 活殺解剖 ? 尿分析最終體重 ┐ ↓臟器濕重 ├ 器官/組織 生物學(xué)標(biāo)志臟/體比 ┘ ↓

34、 ? 酶 固定/染色 ?內(nèi)源性成分 組織病理學(xué) ? 膽汁、尿,,,,,,,4.大鼠 · 致畸試驗(yàn),雄鼠×雌鼠 陰栓 └┴┴

35、┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┤（天）孕0 7 ←─染毒─→ 16 20 處死檢查 活胎、吸收胎、早死胎、晚死胎

36、 ┌─────┼─────┐ 大鼠 外觀畸形 骨骼畸形 內(nèi)臟畸形,,致畸試驗(yàn)結(jié)果的判定,以LD50或30天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的最大未觀察到有害作用劑量設(shè)計(jì)的受試物各劑量組，如果在任何一個(gè)劑量組觀察到受試物的致畸作用，則應(yīng)放棄該受試物用于保健食品，如果觀察到有胚胎毒性作用，則應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的繁殖試驗(yàn)。,其它毒理學(xué)試驗(yàn),5.90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 最大未觀察到有害作用劑量大于人的可能攝入量的100倍進(jìn)行

37、安全性評價(jià)。國內(nèi)外均無食用歷史的原料或成分：最大未觀察到有害作用劑量小于或等于人的可能攝入量的100倍者表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。國外少數(shù)國家或國內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分：最大未觀察到有害作用劑量大于100倍而小于300倍者，應(yīng)進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)。大于或等于300倍者則不必進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)，可進(jìn)行安全性評價(jià)。,其它毒理學(xué)試驗(yàn),6.慢性毒性：最大未觀察到有害作用劑量小于或等于人的可能攝入量的50倍者，表示

38、毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。未觀察到有害作用劑量大于50倍而小于100倍者，經(jīng)安全性評價(jià)后，決定該受試物是否可用于保健食品。最大未觀察到有害作用劑量大于或等于100倍者，則可考慮允許用于保健食品。,其它毒理學(xué)試驗(yàn),7.致癌試驗(yàn)根據(jù)致癌試驗(yàn)所得的腫瘤發(fā)生率、潛伏期和多發(fā)性等進(jìn)行致癌試驗(yàn)判定的原則是：腫瘤只發(fā)生在試驗(yàn)組動(dòng)物，對照組中無腫瘤發(fā)生。試驗(yàn)組與對照組動(dòng)物均發(fā)生腫瘤，但試驗(yàn)組發(fā)生率高。試驗(yàn)組動(dòng)物中多發(fā)性腫瘤明顯，

39、對照組中無多發(fā)性腫瘤，或只是少數(shù)動(dòng)物有多發(fā)性腫瘤。試驗(yàn)組與對照組動(dòng)物腫瘤發(fā)生率雖無明顯差異，但試驗(yàn)組中發(fā)生時(shí)間較早。,安全性評價(jià)考慮的因素,試驗(yàn)指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義：生理作用與毒性作用：時(shí)間-毒性效應(yīng)關(guān)系：特殊人群和敏感人群： 人的可能攝入量較大的保健食品： 含乙醇的保健食品：動(dòng)物年齡對試驗(yàn)結(jié)果的影響安全系數(shù) 人體資料 綜合評價(jià) 保健食品安全性的重新評價(jià)（必要時(shí)）,四、安全評價(jià)工作中的有關(guān)問題,原料的安全性

40、是建立在長期食用、藥用的經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，系統(tǒng)的全面的毒理學(xué)研究資料尚不完整，尤其是改變了傳統(tǒng)的食用方式時(shí)。其安全性應(yīng)高度關(guān)注。應(yīng)注重原料的安全評估，特別是三致和慢性毒性。加強(qiáng)原料中有害成分的鑒定與毒性研究。對配伍模式進(jìn)行毒性研究。有益作用與有害作用的權(quán)衡與判定。方法學(xué)問題,保健食品含有功效成分，采用一套方法難以評價(jià)結(jié)構(gòu)和功能不同的物質(zhì)，傳統(tǒng)的毒理學(xué)安全評價(jià)指標(biāo)有一定局限性，保健食品的安全評價(jià)應(yīng)引入個(gè)案評估的原則，了解其作用機(jī)制將有

41、助于安全評價(jià)。,作用機(jī)制研究將有助于安全評價(jià),保健食品含有功效成分，采用一套方法難以評價(jià)結(jié)構(gòu)和功能不同的物質(zhì)，傳統(tǒng)的毒理學(xué)安全評價(jià)指標(biāo)有一定局限性，保健食品的安全評價(jià)應(yīng)引入個(gè)案評估的原則，了解其作用機(jī)制將有助于安全評價(jià)。,安全系數(shù) 通常為100化學(xué)物：純度清楚，沒有特別的營養(yǎng)價(jià)值，人群暴露量較低，確定對健康不良影響采用給予動(dòng)物不同劑量水平來估計(jì)最大未觀察有害作用劑量，從而應(yīng)用適當(dāng)?shù)陌踩禂?shù)確定安全攝入量。,方法學(xué)問題,,整體食

42、物：各種化合物的復(fù)雜的混合體，成份和營養(yǎng)價(jià)值變化大，體積大易產(chǎn)生飽腹，給與動(dòng)物的量通常只是人體膳食含量的幾倍，采用的膳食模式是否營養(yǎng)均衡，是否引起營養(yǎng)問題。因?yàn)榉鞘茉囄锉旧碇苯右鸬牟涣挤磻?yīng)需要避免，因此，采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來測試整體食物的潛在不良作用是很困難的。實(shí)質(zhì)等同原則可用于對其進(jìn)行安全評價(jià)。,方法學(xué)問題,毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義,第Ⅰ和第Ⅳ種情況最為常見。 ○統(tǒng)計(jì)學(xué)意義→生物學(xué)意義→損害效應(yīng)/非損害效應(yīng),統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和

43、生物學(xué)意義,○ 第Ⅲ種情況是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義但無生物學(xué)意義，此種情況相當(dāng)見。 ○ 在判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)意義時(shí)，有無劑量-反應(yīng)關(guān)系是關(guān)鍵。 ○ 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義但無生物學(xué)意義的情況，更常見的原因是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不良所致。 ○第Ⅱ種情況是具有生物學(xué)意義但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能是因?yàn)樵撌录陌l(fā)生是極端罕見的。,,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義,○在評價(jià)毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，要綜合評價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義○一般來說，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義是具有生物

44、學(xué)意義的必要條件之一?！鹫_地利用統(tǒng)計(jì)學(xué)假設(shè)檢驗(yàn)的結(jié)果有助于確定實(shí)驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)關(guān)聯(lián)。,,判斷生物學(xué)意義的步驟,（1）縱向比較，此參數(shù)的改變有無劑量-反應(yīng)關(guān)系。 （2）橫向比較，此參數(shù)的改變是否伴有其它相關(guān)參數(shù)的改變。 （3）與歷史性對照比較，同時(shí)進(jìn)行的陰性對照應(yīng)在歷史性對照的均數(shù)±3SD 范圍之內(nèi)，否則應(yīng)重新試驗(yàn)。觀察值與對照組比較，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性（P < 0.05），其數(shù)值不在正常參考值范圍之內(nèi)屬于有害作

45、用。,,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義,○應(yīng)重視在染毒早期可能出現(xiàn)一過性改變，如有劑量-反應(yīng)關(guān)系可能為機(jī)體的適應(yīng)，應(yīng)分析其是損害作用。否則，可能無生物學(xué)意義。 ○如體重改變與對照組比較差別有顯著性，但改變不超過10%，則無生物學(xué)意義?！鹋K器重和臟體比同時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時(shí)，才認(rèn)為有生物學(xué)意義?！鹩薪y(tǒng)計(jì)學(xué)意義但無生物學(xué)意義的參數(shù)過多（如10%以上），可能該實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量保證不佳。,,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義,其它的考慮：○ 同時(shí)對照組的標(biāo)準(zhǔn)差過小，

46、CV低于歷史性對照CV的1/2?！?如處理組與同時(shí)對照組兩組均數(shù)之差值應(yīng)超過檢測誤差的兩倍以上?！?某些血液生化指標(biāo)（如AST、ALT等）的測定值升高才有生物學(xué)意義。,,亞慢性毒性實(shí)驗(yàn)WBC計(jì)數(shù),與陰性對照組比較，—，P>0.05；+，P<0.05；++，P<0.01,五。注意點(diǎn),立題（市場調(diào)研和專家咨詢）主管單位和檢驗(yàn)單位咨詢 ○原料配方，○受試樣品（質(zhì)量、溶解性、樣品前處理）， ○申報(bào)功能，○人擬用量。

47、申報(bào)前專家咨詢,,對中藥安全性的關(guān)注點(diǎn),中藥大多為植物，毒性一般低于化學(xué)藥品。有長期傳統(tǒng)藥用的經(jīng)驗(yàn)。人體（人群）使用的經(jīng)驗(yàn)與動(dòng)物毒理學(xué)安全性評價(jià)是互為補(bǔ)充，不能替代。個(gè)人經(jīng)驗(yàn)和個(gè)案報(bào)告作為因果關(guān)系的證據(jù)不充分，應(yīng)發(fā)展循證醫(yī)學(xué)。應(yīng)發(fā)展中藥藥材．復(fù)方的毒理學(xué)研究及安全性數(shù)據(jù)庫。特別是體外毒性篩選和靶器官預(yù)測，ADME／Tox。,美國NTP（2000）,美國國家毒理學(xué)計(jì)劃（NTP）1500多種在美國上市的草本植物中，其有益作用或有害

48、作用大部分沒有經(jīng)過科學(xué)證實(shí)。膳食補(bǔ)充劑健康教育法未要求對1994年前上市的草本植物進(jìn)行安全性評價(jià)。FDA負(fù)責(zé)舉證，安全性評價(jià)的責(zé)任在政府。,美國NTP（2000）10種,白毛茛：進(jìn)行生殖毒性．發(fā)育毒性．慢性毒性．致癌性研究紫草：具有肝毒性．并可致大鼠肝癌和肺癌，進(jìn)行生殖毒性研究 蒲勒酮/胡薄荷酮（歐亞薄荷．紫穗薄荷等）：可能具有胚胎毒性，進(jìn)行生殖毒性．慢性毒性．致癌性研究銀杏：進(jìn)行神經(jīng)毒性．慢性毒性．致癌性研究松果菊：進(jìn)行

49、免疫毒性．亞慢性毒性．慢性毒性．致癌性研究,KAVA卡瓦,Dallas L. ClouatreToxicology Letters 150 (2004) 85–96Kava kava: examining new reports of toxicity,,KAVA,在1998年以前，卡瓦（Piper methysticum）提取物被認(rèn)為是抗焦慮藥很安全的替代物，并且可能具有大量另外的效益。至2002年底出版的綜述繼續(xù)了證實(shí)卡瓦的安全

50、和效益。不過，自2003年1月卡瓦提取物在歐共體和加拿大已經(jīng)被禁止， 并US FDA警告由于肝功能衰竭的11例導(dǎo)致移植， 包括4例死亡。從各種各樣的數(shù)據(jù)庫全部為的評論的78例肝毒性被認(rèn)為與到卡瓦攝入有關(guān)聯(lián)。 這些不良事件中， 4例可能與單獨(dú)攝入有關(guān)聯(lián)，另外的23例可能與攝入卡瓦有關(guān)聯(lián)，但也涉及 攝入其它化合物。,卡瓦內(nèi)酯,KAVA,已知卡瓦內(nèi)酯肝毒性3種可能的機(jī)制為抑制細(xì)胞色素P450， 在肝臟谷胱甘肽水平的，降低環(huán)氧合酶活性。在任何分

51、析中，卡瓦提取物的直接毒性相當(dāng)小，然而藥物相互作用和/或與其它化合物的毒性增強(qiáng)的可能性很大。 目前， 卡瓦毒性看來是“特異質(zhì)” 。然而，與其它抗焦急藥比較,卡瓦提取物的危險(xiǎn)-效益比仍然保持良好。,ILSI,在食物和膳食補(bǔ)充劑中使用植物和植物制制安全性評價(jià)指南 · 2003,為危害鑒定和表征進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究的基本原則和需要的7點(diǎn)推薦,○實(shí)驗(yàn)研究的范圍取決于使用歷史是否足夠和產(chǎn)品與傳統(tǒng)的食物或食物成分的可比較性○為鑒別可能的安全

52、問題應(yīng)該評定有益效應(yīng)和有害效應(yīng)的作用模式，包括在植物產(chǎn)品和攝入的其他生物學(xué)活性化合物之間相互作用的可能性?！鹑Q于使用的歷史和作用模式，可能必需進(jìn)行特殊研究?！鹜ǔ?yīng)該對商業(yè)定型產(chǎn)品進(jìn)行安全性研究，劑量范圍包括有害效應(yīng),推薦（7點(diǎn)）,○為特定生物活性組分設(shè)計(jì)的體外和體內(nèi)研究能為安全性研究提供有價(jià)值的信息或相關(guān)的終點(diǎn)的解釋○應(yīng)該研究基質(zhì)對活性成分的吸收率和范圍的影響，特別當(dāng)從某一純度外推到另一純度時(shí)○基于較純的制劑研究可低估或高估

53、有害效應(yīng)的潛力（產(chǎn)品評價(jià)）,安全性評價(jià)所需信息的決策樹（2003）,決策樹,決策樹,按決策樹的出口點(diǎn)的要求，在草藥產(chǎn)品上應(yīng)列出的信息: A – I, II, III, IV; B – I, II, III, IV, VI, VII, VIII, (IX); C – I, II, III, IV, V; D – I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII (IX); E – I, II, III, IV, V, V

54、I, VII, VIII, IX (特別強(qiáng)調(diào)的原因和意義是與傳統(tǒng)比較的差別，如因加工引起的變化); F – I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX;G– 產(chǎn)品作為食物或膳食補(bǔ)充劑被定型生產(chǎn)和安全評價(jià)以前，需要被特征化；H– 不加至食物或用于膳食補(bǔ)充劑，與可比較的醫(yī)用攝入并無綜合危險(xiǎn)度時(shí): 效益分析。 證明植物的膳食補(bǔ)充劑的安全性，需要的信息要點(diǎn): I– 成分或產(chǎn)品的說明; II– 來源有機(jī)體的細(xì)節(jié)(屬

55、，種，消費(fèi)的植物部分);III– 經(jīng)食物和/或其它來源的人體先前暴露的證據(jù); IV– 使用范圍和估計(jì)攝入量; V–加工技術(shù)的細(xì)節(jié)和配方的穩(wěn)定性; VI– 營養(yǎng)學(xué)評價(jià)(包括活性成分對其它飲食成分生物利用度影響的評價(jià)); VII– 毒物學(xué)評價(jià)(包括其它飲食成分對活性成分生物利用度影響的評價(jià)); 不可能列出必須的毒性試驗(yàn)的清單，應(yīng)按個(gè)例在的基礎(chǔ)上選擇研究項(xiàng)目; VIII–人的臨床的數(shù)據(jù)，包括反應(yīng)的變異性，有害作用報(bào)告和禁忌征; IX– 輔助的