白血病分子診療

1、分子生物學(xué)在白血病中的應(yīng)用,2016-3-8融合基因?qū)嶒炇?一、白血病相關(guān)基因改變的常見類型,融合基因,基因突變,基因表達異常,1. 融合基因： 所謂融合基因，是指將兩個或多個基因的編碼區(qū)首尾相連．置于同一套調(diào)控序列（包括啟動子、增 強子、核糖體結(jié)合序列、終止子等）控制之下，構(gòu)成的嵌合基因。,概 念,,,,,,,Chr 9,Chr 22,,,,ABL,BCR,,,,,,,,,,BCR-ABL融合基因,,

2、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,2. 基因突變： 錯義突變（點突變） 插入突變 缺失突變 移碼突變,錯義突變（點突變）：,DNA分子中一個堿基對被另一個不同的堿基對取代所引起的突變。 如： JAK2V617F JAK2基因 mRNA水平（cDN

3、A水平）：第1849位點G突變?yōu)門 蛋白水平：第617位氨基酸位點由纈氨酸（V）突變 為笨丙氨酸（F）,,,插入突變：,較長片段的DNA的插入而發(fā)生突變，但不改變閱讀框 如： NOTCH1 H1590-L1592insFGP NOTCH1基因 mRNA水平（cDNA水平）：c.4775

4、4776ins(TGGGCC) 蛋白水平： H1590-L1592insFGP,,,缺失突變：,較長片段的DNA的缺失而發(fā)生突變 ，但不改變閱讀框 如： JAK2 N542-E543del JAK2基因 mRNA水平（cDNA水平）： c.1624-1629 del 6bp

5、 蛋白水平：N542-E543 缺失N、E氨基酸,,,移碼突變：,DNA片段中某一位點插入或丟失一個或幾個（非3或3的倍數(shù)堿基對時，造成插入或丟失位點以后的一系列編碼順序發(fā)生錯位的一種突變。 如：CALR L367fs(46) 突變 CALR基因 mRNA水平（cDNA水平）： c.1179_1230del 52bp

6、 蛋白水平：第367位氨基酸（亮氨酸）位點發(fā)生移碼，在 367位點起后的46位氨基酸終止。,,,癌基因或抑癌基因表達異常 如： WT1定量,3、基因表達異常,二、白血病基因檢測的臨床意義,1、 輔助診斷2、 指導(dǎo)治療3、 評估預(yù)后4、 微小病變殘留檢測,三、白血病相關(guān)基因分類,BCR-ABLFLT3-ITDJAK2V617FC-KIT……,PML-RARa

7、NPM1RUNX1AML1-ETO……,DNMT3ATET2ASXL1/ASXL2IDH1/IDH2……,SF3B1SRSF2U2AF1……,,Class 1 增 殖,Class 2 分 化,Class 3 表觀遺傳,Class 4 剪切因子,四、白血病相關(guān)常見基因,AML CMLMPN,ALLCLL,MDS,AML 相 關(guān) 基 因 異 常,,融合基因：,1、 PML-RARa: 95

8、% AML-M3 分為三型 L型、S型、V 型 PLZF-RARa NPM1 -RARa2、 AML1-ETO: 40% AML-M2 (主要為M2b)3、 CBFβ-MYH11：90% AML-M4Eo4、 MLL-AF17 MLL-AF6 AML-M4 /M5 MLL-AF9,AML 相 關(guān) 基 因 異 常,,基因突變：,F

9、LT3-ITDNPM1（A/B/D型）c-KitIDH1IDH2 ASXL2NRAS KRAS P53DNMT3A,基因定量分析：,WT1 定量,,FLT3-ITD：AML-M3中發(fā)生頻率較高,c-Kit： 50%AML1-ETO陽性AML CBFβ-MYH11陽性AML,ASXL2：AML1-ETO陽性AML,CML 相 關(guān) 基 因 異 常,BCR-ABL : 95%CML C

10、ML特異 marker 亞型： cDNA Protein b3a2、b2a2型 P210 e19a2型 P230 e1a2型 P190,,MPN 相 關(guān) 基

11、 因 異 常,,,,PV、ET、PMF的診斷,,BCR-ABL 排除早期慢粒,PV: JAK2V617F JKA2exon12ET：JAK2V617F MPL CALRPMF: JAK2V617F MPL CALR,BCR-ABL JAK2V617F MPL CALR JAK2exon12,MDS 相 關(guān) 基 因 異 常,,WT1 定量DNMT3ATET2ASXL1SF

12、3B1SRSF2 RUNX1,,SF3B1：主要見于50-70% 環(huán)形鐵粒幼增多性貧血,SRSF2 ：主要見于CMML,ALL 相 關(guān) 基 因 異 常,,BCR-ABL: 35%成人ALLTEL-AML1: 兒童ALL 預(yù)后好E2A-PBX1：預(yù)后不好MLL-AF4 ： 嬰幼兒多見,NOTCH1 ： 預(yù)后好FBXW7： 預(yù)后不好PTEN NRAS KRAS,B-ALL,T-ALL,C