臨床血液常規(guī)檢驗儀器描述

1、第五章 臨床血液常規(guī)檢驗儀器,臨床檢驗常規(guī)儀器是臨床實驗室最常用最基本的的分析儀器，包括：血細胞分析儀血液凝固分析儀,第五章 臨床檢驗常規(guī)儀器,第一節(jié) 血細胞分析儀,教學要求掌握血細胞分析儀的概念、庫爾特原理、儀器的基本結構。熟悉聯合檢測型血細胞分析儀器的檢測原理，網織紅細胞檢測原理，血紅蛋白檢測原理、儀器性能評價和維護。了解血細胞分析儀的分類、性能指標、常見故障和排除及進展。,第一節(jié) 血細胞分析儀學習內容,一、血細胞

2、分析儀的分型二、血細胞分析儀的檢測原理三、血細胞分析儀的基本結構四、血細胞分析儀的性能指標與評價五、血細胞分析儀的維護及常見故障六、血細胞分析儀的進展 思考題,一、血細胞分析儀的分型,血細胞分析儀(Blood cell analyzer,BCA)是指對一定體積全血內血細胞異質性進行自動分析的臨床檢驗常規(guī)儀器。又稱血細胞自動計數儀(ABCC)、血液學自動分析儀(AHA)。ABCC代表早期的低檔次BCA，AHA外延

3、過大。,,一、血細胞分析儀的分型,血細胞分析儀分型按自動化程度按檢測原理按對白細胞的分類水平,,二、血細胞分析儀的檢測原理,（一）血細胞分析儀的細胞計數原理,庫爾特（電阻抗）血細胞檢測原理,二、血細胞分析儀的檢測原理,（2）紅細胞和血小板檢測的直方圖,二、血細胞分析儀的檢測原理,2.聯合檢測型血細胞分析儀檢測原理,,二、血細胞分析儀的檢測原理,,,二、血細胞分析儀的檢測原理,體積(volume，V) 電阻抗原理測定細胞體積和數量

4、電導性(conductivity，C) 高頻電磁探針，測量細胞內部結構，細胞內核漿比例光散射(scatter，S)細 胞內粗顆粒的光散射強 度要比細顆粒更強,二、血細胞分析儀的檢測原理,（3） 光散射與細胞化學聯合檢測原理,這類儀器是應用激光散射與細胞化學染色技術對白細胞進行分類計數。,二、血細胞分析儀的檢測原理,,高角度前向散射光：細胞核及顆粒的信息低角度前向散射光：細胞大小的信息,結合細胞化學染色技術對白細胞進行分類計

5、數,,二、血細胞分析儀的檢測原理,（4）電阻抗、射頻與細胞化學聯合檢測原理,這類儀器是利用電阻抗、射頻這一成熟細胞計數技術結合細胞化學技術，通過4個不同的檢測系統(tǒng)對白細胞、幼稚細胞進行分類和計數。,,,二、血細胞分析儀的檢測原理,白細胞分類散射圖,聯合使用多項技術(流式、激光、射頻、電導、電阻抗、細胞化學染色)同時分析一個細胞，綜合分析實驗數據，從而得出較為準確的白細胞“五分類”結果。,二、血細胞分析儀的檢測原理,（5）網織紅細胞檢測原

6、理,,網織紅細胞中嗜堿性物質RNA，在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結合熒光強度與RNA含量成正比用流式細胞術檢測 網織紅細胞大小和 RNA含量及血紅蛋 白的含量,二、血細胞分析儀的檢測原理,網織紅細胞等與試劑反應前后的變化,反應前,反應后,二、血細胞分析儀的檢測原理,熒光(RNA)強度,,,Reticulocytes,,,,PLT,RBC,,,,,WBC,,前向散射光(細胞大小),血細胞分析儀網織紅細胞成熟度分類,二

7、、血細胞分析儀的檢測原理,3.干式離心分層型血細胞分析儀的細胞計數原理將血液充入到含特殊試劑（抗凝劑、熒光染料）的毛細管內專用離心機上離心，儀器根據血中各種血細胞成份的比重不同分層亦不同的原理，血細胞被吖啶橙染色后，各層細胞會有明顯的顏色差異，然后將毛細管放在特殊的判讀機上對不同細胞層進行比對定量分析計算機綜合信息處理，得到紅細胞、中性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞、血小板、血紅蛋白等參數。,二、血細胞分析儀的檢測原理,（二）血細胞分

8、析儀的血紅蛋白測定原理,除干式、無創(chuàng)型外，各型BCA對血紅蛋白測定都采用光電比色原理血細胞懸液中加入溶血劑后，紅細胞溶解釋放出血紅蛋白，后者與溶血劑中有關成分結合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統(tǒng)特定波長(530～550nm)下進行光電比色,二、血細胞分析儀的檢測原理,基本結構,機械系統(tǒng)電學系統(tǒng)血細胞檢測系統(tǒng)血紅蛋白測定系統(tǒng)計算機控制系統(tǒng),三、血細胞分析儀的基本結構,1.機械系統(tǒng) 包括機械裝置（如全自動有進

9、樣針、分血器、稀釋器、混勻器、定量裝置等）和真空泵，以完成樣本的定量吸取、稀釋、傳送、混勻，以及將樣本移入各種參數的檢測區(qū),三、血細胞分析儀的基本結構,2.電學系統(tǒng) 包括主電源、電壓元器件、控溫裝置、自動真空泵電子控制系統(tǒng)，以及儀器的自動監(jiān)控、故障報警和排除等,三、血細胞分析儀的基本結構,3.血細胞檢測系統(tǒng) 國內常用的血細胞分析儀，使用的檢測技術可分為電阻抗檢測技術和光散射檢測技術兩大類,三、血細胞分析儀的基本結構,電

10、阻抗檢測技術：由檢測器、放大器、甄別器、閾值調節(jié)器、檢測計數系統(tǒng)和自動補償裝置組成流式光散射檢測技術：由激光光源、檢測裝置和檢測器、放大器、甄別器、閾值調節(jié)器、檢測計數系統(tǒng)和自動補償裝置組成,三、血細胞分析儀的基本結構,4.血紅蛋白測定系統(tǒng) 由光源、透鏡、濾光片、流動比色池和光電傳感器等組成。 5.計算機控制系統(tǒng),三、血細胞分析儀的基本結構,四、血細胞分析儀的性能指標與評價,（一）儀器的性能指標 1.測試參數 2.細胞形態(tài)學分

11、析 3.測試速度 4.樣本量 5.工作條件與基本功能 6.技術要求,（二）血細胞分析儀的評價,ICSH公布了電子血細胞分析儀的評價方案：在細胞計數、血紅蛋白測定方面，要評價儀器測試樣本的總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準確性等,四、血細胞分析儀的性能指標與評價,四、血細胞分析儀的性能指標與評價,（二）血細胞分析儀的評價 1.精密度 2.攜帶污染率 3.總重復性 4.線性范圍 5.標本老化 6.抗干擾性

12、 7.白細胞分類的鑒定,（三）血細胞分析儀的校準,出廠前已經過廠方技術鑒定合格，但由于運輸振動或因故障維修后或長時間停用后再啟用等原因，以及正常使用半年以上或認為有必要時，都必須對儀器進行調校及性能測試，這對了解儀器性能，發(fā)現問題，確保檢驗質量有重要意義,四、血細胞分析儀的性能指標與評價,五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除,（一）儀器的維護 血細胞分析儀屬高精密儀器，應有專人負責，按儀器廠家的的要求進行日保養(yǎng)、周保養(yǎng)、月保養(yǎng)及

13、年終的大保養(yǎng)，并建立儀器保養(yǎng)和維修檔案。同時要做好：檢測器、液路和機械傳動部分的維護,（二）儀器的維護 1.檢測器的維護 ①采血順利②防止纖維絲堵孔③關機前對檢測器的微孔進行清理沖洗④計數期間，及時按 “反沖”鍵，沖掉沉積變性的蛋白質⑤定期卸下檢測器，用5%次氯酸鈉浸泡清洗,五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除,2.液路的維護,五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除,3.機械傳動部位的維護,五、血細胞分析儀的維護與常見故障

14、排除,（三）常見故障排除,有自我診斷功能，有故障發(fā)生時，內置電腦的錯誤檢查功能顯示出“錯誤信息”，并伴有報警聲,五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除,1.開機時的常見故障2.測試過程中常見的錯誤信息 其中檢測器的微孔堵塞是影響檢驗結果準確性最常見的原因。根據微孔堵塞的程度，將其分為完全堵孔和不完全堵孔兩種。,五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除,（三）常見故障排除,六、血細胞分析儀的進展,儀器測試原理的不斷創(chuàng)新 白細胞分類的改

15、進 紅細胞和血小板計數原理的改進 新血細胞分析參數的出現各種特殊技術的應用儀器自動化水平的提高無創(chuàng)血液分析儀的上市,紅細胞和血小板計數原理的改進,二維激光散射法測定紅細胞和血小板,克服了電阻抗法在病理情況下測定MCH、MCHC結果不準及血小板計數精確性較差的缺點,六、血細胞分析儀的進展,思 考 題,1.BCA的概念及功能是什么？2.簡述電阻抗血細胞檢測原理。3.簡述聯合檢測型BCA白細胞分類計數的實質和共有

16、特點4.簡述BCA網織紅細胞檢測原理。5.如何對BCA進行分類？半自動與全自動BCA的主要區(qū)別？6.如何對BCA進行評價？7.電阻抗型BCA和聯合檢測型BCA的基本結構？8.BCA的進展表現在哪幾個方面？9.BCA常見的堵孔原因有哪些？如何處理？10.BCA保證血小板準確計數的技術有哪些？,第二節(jié) 血液凝固分析儀,教學要求掌握血凝儀的檢測原理和基本結構熟悉半自動、全自動血凝儀的特點，血凝儀的性能評價以及各種檢測方法的優(yōu)

17、缺點了解血凝儀的分類、臨床應用、儀器的維護,學習內容,一、 概述一、血凝儀的分型二、血凝儀的檢測原理三、血凝儀的基本結構四、血凝儀的性能評價五、血凝儀的維護六、血凝儀的臨床應用● 思考題,一、概 述,血液凝固分析儀（automated coayulation analyzer,ACA）是采用一定分析技術，對血栓與出血有關成分自動檢測的臨床常規(guī)檢驗儀器在血栓/出血實驗室中最基本的設備就是血液凝固分析儀（簡

18、稱血凝儀）,發(fā) 展 史1910年，Kottman發(fā)明了最早的血凝儀1950年，Schnitger和Gross發(fā)明了基于電流法的血凝儀20世紀70年代前為血凝儀的初級階段,一、概 述,20世紀70年代，較精確的各種自動血凝儀先后問世。其特點是，單通道、終點法的半自動血凝儀，也稱第一代產品20世紀80年代末，多通道、多方法與原理的半自動血凝儀相繼誕生，稱之為第二代產品,各代血凝儀的特點,一、概 述,20世紀90年代以來，多通

19、道、多方法、多功能全自動（即第三代）血凝儀不斷涌現,一、概 述,二、血凝儀的分型及特點,（一）血凝儀分型按自動化程度半自動血凝儀全自動血凝儀全自動血凝工作站,三者有何區(qū)別 ？,三、血凝儀的檢測原理,血凝儀檢測原理主要檢測方法：凝固法、底物顯色法、免疫學法、干化學法等。,彼此有何不同？,三、血凝儀的檢測原理,,,血凝儀檢驗技術原理,,三、血凝儀的檢測原理,,1．凝固法原理 是通過檢測血漿在凝血激活劑作用下發(fā)生一系列

20、物理量（光、電、超聲、機械運動等）的變化，再由計算機分析所得最終結果，稱生物物理法。按測量原理分為電流法、超聲分析法、光學法和磁珠法四種。,呵！是血漿凝固的變化,光學法（比濁法）：是根據血漿凝固過程中濁度的變化，導致光強度變化來測定相關因子,三、血凝儀的檢測原理,三、血凝儀的檢測原理,光學法血凝儀工作流程,,三、血凝儀的檢測原理,纖維蛋白的形成與吸光度,??？為何在50%？,三、血凝儀的檢測原理,磁珠法原理：是根據磁珠運動的幅度隨血漿凝固

21、過程中黏度的增加而變化來測量凝血功能的方法。根據儀器對磁珠運動測量原理的不同，又可分為光電探測法和電磁珠探測法。,雙磁路磁珠法原理,三、血凝儀的檢測原理,光電磁珠法原理,可以用光檢測磁珠擺動衰減幅度,,用電磁檢測磁珠擺動衰減幅度,光學法與磁珠法原理主要區(qū)別光學法原理：是用光探測凝固過程中血漿濁度的（吸光度）變化來判斷終點；光電磁珠法原理：是用光探測鋼珠振幅衰減程度來判斷終點；雙磁路磁珠法原理：是用電磁探測鋼珠振幅衰減程度來判斷終點

22、。,三、血凝儀的檢測原理,三、血凝儀的檢測原理,2.產色底物法原理：實質為光電比色原理，是通過測定產色底物的吸光度變化來推測所測物質的含量和活性，也稱生物化學法,三、血凝儀的檢測原理,3.免疫學方法原理 以純化的被檢物質為抗原，制備相應的抗體，然后利用抗原抗體反應對被檢物進行定性或定量測定。血凝儀使用免疫比濁法,四、血凝儀的基本結構,1.半自動血凝儀的基本結構 主要由樣本預溫槽和試劑預溫槽、加樣器、檢測系統(tǒng)（光學、磁場）及

23、微機組成,,全自動呢 ？,四、血凝儀的基本結構,2.全自動血凝儀基本結構 包括樣本傳送及處理裝置、試劑冷藏位、樣本及試劑分配系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、計算機、輸出設備 及附件等,,就這么簡單？,1.一般性評價 包括：①產品質量占50%，其中想要的特征占25%、儀器自動化水平占15%、免費維護能力占10%；②價格占25%；③廠商評估占10%；④擔保占5%；⑤售后服務占5%；⑥可接受性占5%。,五、血凝儀的性能評價,五、血凝儀的

24、性能評價,2.技術性能評價 重復性測定、正確度、線性范圍、攜帶污染率、干擾因素等幾方面,,攜便式血凝儀,3.半自動與全自動血凝儀的比較 半自動血凝儀：手工加樣加試劑；操作簡便；應用檢測方法少；價格便宜；速度慢；測量精度好于手工，但低于全自動全自動血凝儀：自動化程度高；檢測方法多；通道多，速度快；測量精度好,五、血凝儀的性能評價,六、血凝儀的維護,1.半自動血凝儀的維護 ①保持測試槽、樣本槽、試劑槽清潔，嚴禁有異物進入；

25、②避免陽光直曬和遠離強熱物體；③放置在平穩(wěn)的工作臺面上，不得搖晃與振動；④防止受潮和腐蝕；⑤儀器和加珠器（磁珠法）都必須遠離強電磁場干擾源，并使用一次性測試杯及鋼珠；⑥最好使用穩(wěn)壓器電源；⑦更換熔斷器內的保險管時，應先關閉本系統(tǒng)，拔下電源線，嚴格按熔斷器座旁標示的規(guī)格型號進行更換；⑧儀器保持恒溫37℃±0.2℃。,六、血凝儀的維護,2.全自動血凝儀的維護日保養(yǎng) ①開機前應檢查穩(wěn)壓電源是否正常，廢液瓶、垃圾箱是否倒空、洗液

26、瓶內的蒸餾水是否超過上面的凹槽、試劑是否夠用、打印紙是否更換等。②標本檢測完畢要進行洗針和管路清洗程序，防止管道堵塞。,2.全自動血凝儀的維護周保養(yǎng) ①每周進行1次徹底的管路清洗。②清洗或更換空氣過濾器。③檢查及清潔反應槽；④清洗洗針池及通針；⑤檢查冷卻劑液面水平。 月保養(yǎng) ①清潔機械運動導桿和轉動部分并加潤滑油。②及時保養(yǎng)定量裝置。③更換樣品及試劑針。④數據備份及恢復。⑤每月進行儀器內部的徹底清洗。,六、血凝儀的維護,七、血凝