中藥化學(xué)f甾體類化合物中藥化學(xué)甾

1、二、分類 類別 C17 - R甾體皂苷 含氧螺雜環(huán)強(qiáng)心苷 不飽和內(nèi)酯環(huán)蟾毒配基 六元不飽和內(nèi)酯C21甾醇 乙基衍生物膽汁酸類 戊酸甾醇

2、 8~10個碳脂肪烴昆蟲變態(tài)激素 8~10個碳脂肪烴,,,,天然甾體結(jié)構(gòu)特點: B/C反式C/D多為反式A/B順、反：順式——正系 反式——別系C3、 C10、C13、 C17多為β-構(gòu)型C3—OH,三、甾核的顏色反應(yīng) 機(jī)理：無水條件下與酸脫水、 縮合、氧化1. Liebermann-Burchard反應(yīng)

3、試劑：醋酐-濃硫酸（20：1） 現(xiàn)象：紅 紫 藍(lán) 綠 污綠， 最后褪色,,,,,Salkowski反應(yīng) 試劑：硫酸/氯仿 現(xiàn)象：氯仿層——血紅色或青色 硫酸層——綠色熒光。3. Rosen-Heimer反應(yīng)（紙片反應(yīng)）: 試劑：25%三氯醋酸乙醇溶液 條件：加熱至60℃ 現(xiàn)象：顯紅色至紫色,4、Tschugaer反應(yīng)： 試劑：氯化鋅

4、、乙酰氯/冰醋酸 現(xiàn)象：紫紅 藍(lán) 綠 5、Kahlenberg反應(yīng)（紙片反應(yīng)）： 試劑：20%五氯化銻氯仿溶液 條件：加熱至60~70℃ 現(xiàn)象：顯灰藍(lán)、藍(lán)、灰紫等顏色,,,,9.2 甾體皂苷一、概述（一）定義 螺甾烷及其相似生源的甾體化合物的低聚糖苷，其水溶液經(jīng)強(qiáng)烈振搖后多產(chǎn)生大量持久性肥皂樣泡沫。（二）分布單子葉植物：百合科、薯蕷科、石蒜 科、龍舌蘭科等,麥冬,薤白,百合,玉

5、竹,知母,重樓等; 海洋生物、動物,（三）生物活性及應(yīng)用心腦血管病——地奧心血康膠囊（黃 山藥）、心腦舒通（蒺藜）抗癌——重樓皂苷Ⅰ和Ⅳ 降血糖、降膽固醇、調(diào)節(jié)免疫等甾體皂苷元——合成甾體避孕藥和激素類藥物,二、結(jié)構(gòu)與分類（一）結(jié)構(gòu)特點1、皂苷元由27個碳組成，共有A.B.C.D.E和F六個環(huán)，E和F以螺縮酮的形式連接，形成螺甾烷結(jié)構(gòu)。A/B：順，反B/C：反C/D：反,2、３個

6、手性碳： 20(S)、22(R)、2525(S)——螺甾烷，甲基為直立鍵，β，L型25(R)——異螺甾烷，甲基為平伏鍵，α，D型,3、多有羥基：3位及其他 羰基：12位 雙鍵：5-6位，9-11位，25-27位 不含羧基：中性4、組成甾體皂苷的糖：D-葡萄糖、 D-半乳糖、 D-木糖、L-鼠李糖和L-阿拉伯糖；多與3位羥基成苷，也可在1位和26位成苷。,（二）分類,1、螺甾烷醇型：25(S)

7、 約莫皂苷元,2、異螺甾烷醇型： 25(R) 薯蕷皂苷元,3、呋甾烷醇型,4、變形螺甾烷醇型: 少,三、甾體皂苷的理化性質(zhì),1、性狀：無色或白色無定形粉末； 熔點均較高；均有旋光性，多為左旋。2、溶解性甾體皂苷——易溶于熱水、稀醇，難溶于 親脂性有機(jī)溶劑。甾體皂苷元——易溶于甲醇、乙醇、氯仿等

8、有機(jī)溶劑，難溶于水。3、溶血性：呋甾烷醇型無溶血性。,4、發(fā)泡性5、沉淀反應(yīng)：膽甾醇、堿式醋酸鉛等 甾體皂苷 + 膽甾醇 分子復(fù)合物沉淀 乙醚回流 不溶物（皂苷）,,,6、顏色反應(yīng)(1)醋酐-濃硫酸：三萜皂苷顯紅紫色

9、 甾體皂苷顯藍(lán)綠色 (2)三氯醋酸：三萜皂苷100℃顯色 甾體皂苷60℃顯色(3)鹽酸二甲氨基苯甲醛試劑(Ehrlich) 呋甾烷醇型雙糖鏈皂苷顯紅色，其他類型甾體皂苷不顯色。(4)茴香醛試劑（Anisaldehyde）：黃色,四、甾體皂苷的提取分離,1、提取

10、 丙酮、乙醚沉淀甲醇、稀乙醇提取 水飽和的正丁醇萃取 大孔樹脂柱2、分離沉淀法：丙酮或乙醚，膽甾醇，吉拉得試劑色譜法：硅膠、大孔樹脂、羥丙基葡聚糖凝 膠、制備HPLC,,,五、甾體皂苷的檢識,1、理化檢識 顯色反應(yīng)、泡沫試驗、溶血試驗2、色譜檢識 硅膠薄層色

11、譜： 氯仿-甲醇-水（65：35：10，下層） 正丁醇-醋酸-水（4：1：5，上層） 顯色： 25%三氯醋酸；10%硫酸； 5%磷鉬酸等,六、結(jié)構(gòu)研究,（一）化學(xué)法——同三萜皂苷（二）波譜法1、UVC=C: 205~225nm C=O: 285nmC=C-C=C: 235nmC=C-C=O: 240nm甾體皂苷元 + 濃硫酸 270~275n

12、m 可用于定量。,,2、IR螺縮酮結(jié)構(gòu)：4個特征吸收帶cm-1: 980(A)，920(B)，900(C)，860(D)C25-S構(gòu)型(螺甾烷醇型): B帶強(qiáng)度 > C帶C25-R構(gòu)型: B帶強(qiáng)度 < C帶3 、MSEI-MS: m/z: 139(基峰); 115(中強(qiáng)); 126(弱) 推測F環(huán)取代情況,FD-MS: [M+Na]+, [M+Na-162]

13、 +, [M+Na-146] +, [M+2H-162] + [M+2Na] 2+ 推測分子量4、NMR1 H-NMR: 4個-CH3信號： 18，19-CH3為單峰，21，27-CH3為雙峰27-CH3 : C25-R (0.7ppm); C25-S (1.1ppm),13 C-NMR: C22螺原

14、子 螺甾烷醇型：109.5ppm 呋甾烷醇型：90.3ppm 變形螺甾烷醇型：120.9ppm5、ORD C11、C12、 C15 =O: (+) cotton C7、C16 =O: (-) cotton 無C=O: 平坦曲線,9.3 強(qiáng)心苷,一、概述定義：對心臟有顯著生理活性的甾體 苷類,由強(qiáng)心苷元與糖縮合而成。分布：玄參科、百合科、蘿摩科、

15、十 字花科、夾竹桃科、毛茛科、 衛(wèi)矛科、?？频?00多種植物活性：加強(qiáng)心肌收縮性，減慢竇性頻 率，有一定毒性。,二、結(jié)構(gòu)與分類1、苷元的結(jié)構(gòu)特點（1） 甾核： A/B 、C/D多順式；B/C反式 （2）取代： C10-CH3 , -CH2OH, -CHOC13-CH3 C14-OH β-構(gòu)型C17-不飽和內(nèi)酯環(huán)

16、3-羥基與糖成苷,,（3）根據(jù)C17上內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)分兩類甲型強(qiáng)心苷元（強(qiáng)心甾烯類）： C17上為五元不飽和內(nèi)酯環(huán)， 多,乙型強(qiáng)心苷元（海蔥甾二烯類、蟾蜍甾二烯類）： C17上為六元不飽和內(nèi)酯， 少,2、糖的結(jié)構(gòu)特點（1）2-羥基糖（α-羥基糖）： D-glc; L-rha; L-夫糖；D-雞納糖；D-洋地黃糖； L-黃花夾竹桃糖（2

17、）2-去氧糖（α-去氧糖）： L-夾竹桃糖； D-洋地黃毒糖； D-加拿大麻糖； D-沙門糖,D-洋地黃毒糖,D-加拿大麻糖,D-洋地黃糖,L-夫糖,3、苷元與糖的連接方式Ⅰ型： 苷元-（2，6-去氧糖）x -（D-葡萄糖）yⅡ型： 苷元-（6-去氧糖）x -（D-葡萄糖）yⅢ型： 苷元-（D-葡萄糖）x ——多為低聚糖苷 ——Ⅰ型、Ⅱ型多， Ⅲ型少,三、結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系1、

18、 C/D環(huán)順式稠合， 14- β羥基2、 A/B順式稠合的甲型，3-β羥基3、 C17-不飽和內(nèi)酯環(huán)，β構(gòu)型4、10位甲基轉(zhuǎn)化為醛基或羥甲基后活性增強(qiáng)，轉(zhuǎn)化為羧基或無甲基后則活性減弱。5、5 β,11 α,12β-OH，?4（5）： 活性增強(qiáng)；1,6,16 β-OH，?16（17） ： 活性降低。,6、糖的數(shù)目、種類與毒性的關(guān)系（1）甲型： 三糖苷苷元 單糖苷： 葡萄糖苷>甲氧基糖苷>6-去氧糖苷

19、>2,6-二去氧糖苷（2）乙型： 苷元>單糖苷>二糖苷 乙型>甲型,四、理化性質(zhì)1、性狀： 無定形粉末或結(jié)晶。味苦（ C17-β），對粘膜有刺激性，有旋光性。2、溶解性： 可溶于水、醇及丙酮等極性溶劑，不溶于乙醚等親脂性有機(jī)溶劑。 與分子中糖的數(shù)目、種類及苷元上羥基的數(shù)目、位置有關(guān)。,3、水解反應(yīng) （1）溫和酸水解 試劑：0

20、.02~0.05mol/L的鹽酸或硫酸條件：在含水醇中短時間加熱回流結(jié)果：Ⅰ型強(qiáng)心苷水解成苷元、2-去 氧糖和/或低聚糖。 Ⅱ型、Ⅲ型不水解。,（2）強(qiáng)烈酸水解試劑：3%~5%無機(jī)酸條件：長時間加熱或加壓結(jié)果：生成單糖和脫水苷元應(yīng)用： Ⅱ型、Ⅲ型強(qiáng)心苷（3）氯化氫-丙酮法試劑：1%氯化氫的丙酮溶液條件：20℃放置二周結(jié)果：苷元和糖的衍生物應(yīng)用： 多數(shù)Ⅱ型強(qiáng)心苷,（4

21、）酶水解 無水解α-去氧糖的酶 Ⅰ型、Ⅱ型強(qiáng)心苷——次級苷和葡萄糖 Ⅲ型強(qiáng)心苷——苷元和葡萄糖（5）堿水解 1）酰基的水解 碳酸氫鈉（鉀）——2-去氧糖上的?；鶜溲趸}（鋇）——羥基糖或苷元上的 酰基,2）內(nèi)酯環(huán)的水解試劑：氫氧化鈉（鉀） 溶劑：水溶液或醇溶液結(jié)果： 堿性水溶液中內(nèi)酯開環(huán)，酸化后閉環(huán) 堿性

22、醇溶液中內(nèi)酯環(huán)開環(huán)后生成異構(gòu)化苷 甲型強(qiáng)心苷內(nèi)酯環(huán)雙鍵轉(zhuǎn)位，形成C22活性亞甲基。,4、顏色反應(yīng)（1）甾體母核的顯色反應(yīng)（2）五元不飽和內(nèi)酯環(huán)的反應(yīng) 堿性醇溶液中甲型強(qiáng)心苷C22活性亞甲基的反應(yīng)： 1）Legal反應(yīng)(亞硝酰鐵氰化鈉反應(yīng)) 樣品1~2mg，溶在2~3滴吡啶中，加1滴3%亞硝酰鐵氰化鈉和1滴2mol/L氫氧化鈉液，顯深紅色并逐漸褪去。,2）k

23、edde反應(yīng) 試劑：3，5-二硝基苯甲酸試劑 現(xiàn)象：紅色或紫紅色3）Raymond 反應(yīng) 試劑：間二硝基苯試劑 現(xiàn)象：紫紅色4）Baljet反應(yīng) 試劑：堿性苦味酸試劑 現(xiàn)象：橙色或橙紅色（15min）,（3）α -去氧糖的反應(yīng) 1）K.K反應(yīng)操作：樣品1mg溶于5ml冰醋酸中，加1 滴20%三氯化鐵水溶液，混勻， 漫漫加入濃硫酸。現(xiàn)象：醋酸層漸顯蘭

24、色，界面的顏色隨 苷元羥基、雙鍵的位置和數(shù)目不同 而異（紅、綠、黃）。范圍：游離α-去氧糖或此條件下能水解 出α-去氧糖的強(qiáng)心苷。苷元-（α-去氧糖)x-(葡萄糖）y (x>1)苷元-（α-去氧糖)x,2）口占噸氫醇（Xanthydrol）反應(yīng) 試劑：口占噸氫醇試劑條件：水浴加熱3分鐘現(xiàn)象：紅色范圍：分子中有α-去氧糖即可3）對-二甲氨基

25、苯甲醛反應(yīng)（紙片）試劑：對-二甲氨基苯甲醛條件：90℃加熱30秒現(xiàn)象：灰紅色斑點范圍：分子中有α-去氧糖即可,4）過碘酸-對硝基苯胺反應(yīng)（紙片反應(yīng)）： 噴過碘酸鈉水溶液，放置10分鐘，噴對硝基苯胺試液，灰黃背景下出現(xiàn)深黃斑點（紫外燈下為棕色背景下黃色熒光斑點），噴5%氫氧化鈉甲醇液，斑點變?yōu)榫G色。,五、提取分離1、提取 一般用70~80%乙醇提取，濃縮，初步純化：（1）

26、石油醚脫脂后再提取。（2）醇提液濃縮，保留適量醇，放置使葉綠素成膠狀析出。（3）吸附法：活性炭、氧化鋁、 聚酰胺,次生苷的提?。?先發(fā)酵酶解，然后用醋酸乙酯或乙醇提取，也可先用乙醇提取，再酶解。3、分離系統(tǒng)溶劑萃取法粗分色譜法：硅膠、中性氧化鋁 單糖苷、次生苷、苷元——有機(jī)溶劑

27、 洗脫 極性大的強(qiáng)心苷——含水系統(tǒng)洗脫,六、檢識1、理化檢識醋酐-濃硫酸反應(yīng)——甾核口占噸氫醇反應(yīng)——α-去氧糖kedde反應(yīng)——五元不飽和內(nèi)酯環(huán)（甲型）2、色譜檢識硅膠板: 乙酸乙酯-甲醇-水; 水飽和的丁酮硅藻土或纖維素: 甲酰胺或乙二醇作固定相 氯仿-丙酮; 氯仿-正丁醇,顯色劑:（1）2% 3

28、，5-二硝基苯甲酸乙醇液與2mol/L氫氧化鉀等體積混合噴霧——紅色（2）1%苦味酸水溶液與10%氫氧化鈉水溶液（95：5）混合噴霧，90-100℃加熱4-5min——橙紅色（3）2%SbCl3/CHCl3溶液噴霧，100℃加熱5min——不同強(qiáng)心苷顯不同顏色,七、結(jié)構(gòu)研究1、UV光譜特征甲型：217~220nm（logε4.20~4.24)乙型：295~300nm（ logε3.93） 甲型如果增加?16（

29、17）則紅移至270nm；增加?14（15） 、?16（17）則紅移至330nm。,2、IR 在1800~1700cm-1有2個羰基峰，甲型在較高波數(shù)區(qū)（較高波數(shù)的峰隨溶劑極性增大而減弱或消失），乙型在較低波數(shù)區(qū)。3、1H-NMR甲型：21-H(2H, br.S / t /dd): 4.5~5ppm22-H(1H, br.S): 5.6~6ppm,乙型： 21-H(1H, S ): 7.2ppm

30、左右 22-H(1H, d ): 7.8ppm左右 23-H(1H, d ): 6.3ppm左右18, 19-CH3: 1.0 ppm左右(18位在較低場)3-H(1H, m): 3.9ppm左右糖5-CH3(3H, d/m): 1.0~1.5 ppm左右糖-OCH3(3H, S): 3.5 ppm左右,4、13C-NMR伯碳 12~24 ppm仲碳 20~41

31、ppm叔碳 35~57 ppm季碳 27~43 ppm醇碳 65~91 ppm烯碳 119~172 ppm羰基碳 177~220 ppm,MSFD-MS, FAB-MS: 推測分子量和糖的連接順序。EI-MS: [M-H2O]+; [M-162] +;[M-146] +;[M-130] +,9.4

32、膽汁酸類一、結(jié)構(gòu)特征及分布甾核：A/B順反; B/C反; C/D反取代：3，6，7，12-羥基或羰基； C17-戊酸常與甘氨酸或?；撬?結(jié)合，以鈉鹽形式存在。不同膽汁酸區(qū)別：羥基數(shù)目、位置、 構(gòu)型不同分布：動物的膽汁、膽結(jié)石,去氧膽酸：3α，12α-OHα-豬去氧膽酸：3α，6α-OH鵝去氧膽酸： 3α，7α-OH熊

33、去氧膽酸： 3α，7β-OH,二、理化性質(zhì)1、酸性：難溶于水，能溶于堿水，易溶于有機(jī)溶劑。2、酯化反應(yīng)： 羧基酯化后成為結(jié)晶，在酸水中回流數(shù)小時，又可得到游離膽汁酸。,3、羥基和羰基的反應(yīng)羥基乙?；Y(jié)晶，水解，羥基。羥基氧化為羰基，還原除去羰基，得到去氧膽汁酸。4、顏色反應(yīng)（1）甾核反應(yīng)（2）Pettenkofer反應(yīng)：試劑：10%蔗糖，濃硫酸現(xiàn)象：界面出現(xiàn)紫色環(huán),（3）Gregory Pascoe反應(yīng)試劑：4

34、5%硫酸，0.3%糠醛條件：65℃ 30min現(xiàn)象：蘭色用途：檢識、定量（4）Hammarsten反應(yīng)試劑：20%鉻酸現(xiàn)象：紫色,三、檢識1、理化檢識2、色譜檢識硅膠板：游離膽汁酸： 異辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸(17:7:5)結(jié)合膽汁酸： 異戊醇-冰醋酸-水(18:5:3)顯色：10%磷鉬酸，30%硫酸，碘,四、提取分離 動物膽汁 10

35、%NaOH皂化，過濾 濾液 30%H2SO4調(diào)PH2~3 有機(jī)溶劑萃取 總膽汁酸,,,9.5 實例一、毛花洋地黃[來源] 玄參科毛花洋地黃Digitalis lanata[成分] 強(qiáng)心苷原生苷：毛花洋地黃苷甲, 乙, 丙, 丁, 戊等次生苷：洋地黃毒苷、羥基~、異羥基~

36、 （地高辛digoxin）、雙羥基~（一）結(jié)構(gòu)特點: 甲型; Ⅰ型洋地黃毒苷元-(洋地黃毒糖)2-3’-乙酰洋地黃毒糖-葡萄糖,（二）提取分離及應(yīng)用應(yīng)用：制備西地藍(lán)(cediland-D)—— 去乙酰毛花洋地黃苷丙提取分離：毛花洋地黃葉粗粉 70%EtOH, CHCl3

37、 總強(qiáng)心苷 CHCl3-MeOH-H2O 毛花洋地黃苷丙 Ca(OH)2水解去乙酰基 西地藍(lán),,,,二、蟾酥[來源] 蟾蜍科中華大蟾蜍Bufo bufo gargarizans或黑眶

38、蟾蜍Bufo bufo melanostictus的耳下腺及皮膚腺分泌的白色漿液，經(jīng)加工干燥而成。[功效] 解毒、止痛、開竅醒神[成分] 蟾蜍甾二烯類 強(qiáng)心甾烯類 蟾毒色胺類（吲哚類生物堿）,（一）主要成分及結(jié)構(gòu)1、蟾蜍甾二烯類游離：蟾毒配基類——乙型強(qiáng)心苷元 蟾毒靈、華蟾毒精、蟾毒它靈、 脂蟾毒配基、日蟾毒它靈等結(jié)合：

39、 脂肪酸 3-OH與 脂肪酸氨基酸 成酯 硫酸,,,2、強(qiáng)心甾烯類 為甲型強(qiáng)心苷元結(jié)構(gòu)類型，以酯的形式存在。 沙門苷元-3-辛二酸精氨酸酯、沙門苷元-3-半辛二酸酯、沙門苷元-3-硫酸酯等。3、蟾毒色胺類（吲哚類生物堿） 5-羥色胺，蟾蜍色胺等。,（二）提取分離與檢識1、提

40、取分離 氯仿回流提取，硅膠柱層析，環(huán)己烷-丙酮梯度洗脫得蟾毒配基類單體。2、檢識蟾毒配基類——濃硫酸顯色強(qiáng)心甾烯類——Legal, Kedde反應(yīng),三、牛黃[來源] ?？婆os taurus domesticus 的干燥膽結(jié)石[功效] 解痙、清心豁痰、開竅、息 風(fēng)、解毒等。[成分] 膽紅色、膽汁酸、膽固醇等 膽酸、去氧膽酸（松弛平滑肌）、豬去氧膽酸、石膽