‘蘋果梨’果實(shí)花青苷合成調(diào)控基因PyMYB的克隆與表達(dá)分析.pdf

1、“蘋果梨”（Pyrus bretschneideri Rehd.“Pingguoli”）是延邊地區(qū)特色的果品之一，是吉林省特產(chǎn)，同時(shí)也是北方寒溫帶地區(qū)的名貴果品之一?！疤O果梨”不僅具有較強(qiáng)的抗寒性，而且果實(shí)較大，是能夠著紅色的優(yōu)良梨品種。紅梨的外觀品質(zhì)好，商品價(jià)值高，市場需求量大，因此選育優(yōu)良的紅梨品種是促進(jìn)梨產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展，同時(shí)也是梨樹育種的重要方向；由于紅梨品種稀少，選育優(yōu)良的紅梨品種成為梨樹資源研究領(lǐng)域丞待解決的問題。近年來，國內(nèi)外

2、關(guān)于梨果皮著色機(jī)理有一定的研究突破，在“蘋果梨”果皮著色機(jī)制中的相關(guān)結(jié)構(gòu)基因已有深入的研究，但對(duì)其調(diào)控基因的研究報(bào)道較少。本試驗(yàn)以延邊的“蘋果梨”果皮作為材料，克隆其花青苷生物合成過程中的調(diào)控基因MYB10、MYB114，并測定套袋與不套袋果實(shí)著色期間果皮的花青苷含量變化，同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR分析MYB10與MYB114的表達(dá)特性。主要研究結(jié)果如下：
　　1.本實(shí)驗(yàn)成功獲得了“蘋果梨”果皮花青苷合成過程中的相關(guān)調(diào)節(jié)基因Py

3、MYB10a和PyMYB114全長cDNA序列。序列分析結(jié)果顯示兩基因cDNA全長分別為736bp和744bp。PyMYB10a的ORF（最大開放閱讀框）編碼130個(gè)氨基酸，蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量約為15.17KDa，PI（理論等電點(diǎn)）為4.73；PyMYB114的ORF（最大開放閱讀框）編碼201個(gè)氨基酸，蛋白質(zhì)分子量約為23.48KDa，pI（理論等電點(diǎn)）為5.57。
　　2.相似性與系統(tǒng)進(jìn)化樹分析結(jié)果表明，PyMYB10a和PyM

4、YB114的核苷酸序列以及編碼的蛋白質(zhì)序列均與薔薇科植物的MYB10和MYB114的核苷酸序列、編碼的蛋白質(zhì)具有較高的相似性和同源性，且與梨屬植物的相似性與同源性最高。
　　3.對(duì)“蘋果梨”果皮花青苷含量測定結(jié)果表明，套袋處理和未套袋處理（CK）果實(shí)的果皮中花青苷含量在果實(shí)著色過程中存在較為明顯的差異，套袋處理可以有效地促進(jìn)“蘋果梨”果實(shí)著色和花青苷的合成。
　　4.實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析結(jié)果表明，套袋“蘋果梨”果實(shí)解袋后，