茄子萼片花青素合成相關(guān)基因DFR和MYB的克隆及表達分析.pdf

1、茄子（Solanum melongena L.）作為大眾餐桌上即為常見的菜，其富含大量花青素，具有很高的營養(yǎng)價值，其根、莖、葉和種子具有一定藥用價值，其萼片也經(jīng)常出現(xiàn)在餐桌上，具有很好的市場前景。
　　本研究針對于歐洲綠萼茄，東北紫茄，及其兩種茄子的雜交茄觀察后發(fā)現(xiàn)，歐洲進口茄萼片整個生長周期內(nèi)均為綠色，東北紫茄則隨生長周期的推進，逐漸變?yōu)檩嗥希s交品種則隨生長周期，萼片也逐漸變紫，但并非全為紫色，而是紫、綠相間。本實驗針對

2、萼片為何會出現(xiàn)該種變化進行了如下研究及結(jié)果分析:
　　1.選擇三種茄子生長成熟的果實萼片作為實驗材料。分別為全綠的歐洲綠萼品種茄子，東北紫萼品種茄子，及其綠、紫相間的雜交品種。采用RACE及同源克隆的方法分別克隆了這三個品種茄子DFR及MYB6個基因的cDNA，命名為SmDFR和SmMYB。
　　2.DFR和MYB基因分析
　　歐洲綠萼SmDFR基因cDNA全長1016bp，從82bp-716bp為開放閱讀框，編碼21

3、3個氨基酸，登錄號為KX224250;東北紫萼SmDFR基因cDNA全長1128bp，從332bp-973bp為開放閱讀框，共213個氨基酸，登錄號為KX224251;雜交品種SmDFR基因cDNA全長1005bp，從73bp-708bp為開放閱讀框，共211個氨基酸，登錄號為KX224252。歐洲綠萼SmMYB基因cDNA全長969bp，從116bp-578bp為開放閱讀框，共編碼153個氨基酸，登錄號為KX224253;東北紫萼Sm

4、MYB基因cDNA全長959bp，從178bp-621bp為開放閱讀框，編碼153個氨基酸，登錄號為KX224254;雜交品種SmMYB基因cDNA全長993bp，從140bp-582bp為開放閱讀框，編碼153個氨基酸，登錄號為KX224255。
　　3.采集萼片，對三個品種現(xiàn)蕾期、盛蕾期、初花期，盛花期4個時期的花青素含量進行測定。檢測結(jié)果表明，歐洲綠萼品種花青素含量無明顯變化;而東北紫萼則隨生長周期推進，花青素含量明顯升高;

5、雜交品種的花青素含量則處于上述二者之間，與觀察到的萼片紫色變化程度成正相關(guān)，但又并非完全符合肉眼觀察的顏色變化，其中可能與pH值等諸多因素有關(guān)。熒光定量PCR結(jié)果表明，DFR及MYB的表達水平變化與其花青素含量正相關(guān)。
　　證實三個品種中萼片顏色及花青素含量變化與DFR及MYB的表達模式及表達量成正相關(guān)。但由于前期試驗所得結(jié)果，所得氨基酸比對差異并不大，而表達量差異則有明顯異，故推斷可能與該基因的啟動子有關(guān)，調(diào)控這些基因呈現(xiàn)出該種