蕭山雞白細(xì)胞介素2基因免疫的免疫增強(qiáng)作用研究.pdf

1、雞白細(xì)胞介素2是由T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一類細(xì)胞因子,能激活T細(xì)胞,促進(jìn)B細(xì)胞分化及分泌抗體,增強(qiáng)單核細(xì)胞以及NK細(xì)胞的殺傷活性,在機(jī)體的免疫反應(yīng)中具有重要的作用,是一類天然的免疫增強(qiáng)劑.該課題對(duì)雞白細(xì)胞介素2(IL-2)原核表達(dá)、真核表達(dá)及其增強(qiáng)傳染性法氏囊病病毒(IBDV)DNA疫苗免疫效果進(jìn)行了研究.將蕭山雞白細(xì)胞介素2基因克隆入原核表達(dá)載體pET-28b,獲得了重組表達(dá)載體pET-28b-IL-2,將此重組表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21

2、,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)雞IL-2.將蕭山雞白細(xì)胞介素2基因克隆入真核表達(dá)載體pCI的CMV啟動(dòng)子的下游,構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒pCI-IL-2.高壓電擊法將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入dam和phoP基因雙突變的減毒鼠傷寒沙門氏菌ZJ111株(ZJ111/pCI-IL-2),并直接轉(zhuǎn)染Vero細(xì)胞,提取細(xì)胞總DNA,DIG標(biāo)記探針可檢測(cè)到陽(yáng)性雜交信號(hào).該研究對(duì)蕭山雞IL-2基因成功地進(jìn)行了原核表達(dá)及真核表達(dá),制備了多克隆抗體.在國(guó)內(nèi)外首次研制了以減毒沙門氏菌