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1、本文對(duì)黑鯛幼魚對(duì)氨氮脅迫的生理響應(yīng)及其維生素C的營(yíng)養(yǎng)需求進(jìn)行了研究。主要內(nèi)容如下: 1.氨氮對(duì)黑鯛稚魚、幼魚的急性毒性研究在水溫25℃,鹽度28,pH 8.1的室內(nèi)養(yǎng)殖水體中分別對(duì)黑鯛稚魚(1.0±0.2g)和幼魚(30.0±2.0g)進(jìn)行了氨氮的急性毒性試驗(yàn),試驗(yàn)用NH4Cl來(lái)調(diào)節(jié)氨氮濃度,正式試驗(yàn)前分別對(duì)黑鯛稚魚和幼魚進(jìn)行了毒性預(yù)試驗(yàn),分別以24小時(shí)未見死亡組和全部死亡組的濃度為最小濃度和最大濃度,隨后以等對(duì)數(shù)間距設(shè)計(jì)正式試
2、驗(yàn)的氨氮濃度。對(duì)稚魚的氨氮濃度設(shè)定為:0,20.0 mg/L,26.0 mg/L,33.8 mg/L,43.94 mg/L,57.12 mg/L;幼魚的氨氮濃度為:0,30.0 mg/L,34.5 mg/L,39.7 mg/L,45.6 mg/L,52.5 mg/L。結(jié)果表明,稚魚的24hLC50、48hLC50、72hLC50、96hLC50分別為:2.43mg/L、2.09mg/L、1.90mg/L、1.74mg/L非離子氨(NH3
3、-N),安全濃度為0.174mg/L NH3-N。幼魚的24hLC50、48hLC50、72hLC50、96hLC50分別為:3.10mg/L、2.47mg/L、2.15mg/L、1.99mg/L非離子(NH3-N),安全濃度為0.199mg/L NH3-N。結(jié)論,從氨氮對(duì)黑鯛稚魚、幼魚的LC50來(lái)分析,黑鯛稚魚、幼魚對(duì)氨氮有較高的耐受性。 2.急性氨氮脅迫對(duì)黑鯛幼魚皮質(zhì)醇、血糖及乳酸含量的影響在水溫為25℃,設(shè)計(jì)了0、10、2
4、0mg/L總氨(即非離子氨為0、0.67、1.33mg/L)的三個(gè)氨氮處理,對(duì)黑鯛(體重為28.0±2.0g)進(jìn)行96h的急性脅迫試驗(yàn),分別于0、6、12、24、48和96h取血樣,離心取血清進(jìn)行測(cè)定皮質(zhì)醇、血糖及乳酸水平的變化。結(jié)果顯示,對(duì)照組在96h內(nèi)無(wú)明顯上升或下降的趨勢(shì),10mg/L和20mg/L氨氮組的皮質(zhì)醇均在6h時(shí)出現(xiàn)最大值,分別為65.07ng/ml和70.97ng/ml,均與對(duì)照組有顯著性差異(P<0.05),其后,各
5、氨氮處理組的皮質(zhì)醇開始下降,至96h時(shí),各氨氮組的皮質(zhì)醇基本回恢復(fù)到正常水平。血清中血糖和乳酸水平跟皮質(zhì)醇變化相似,脅迫情況下,血糖和乳酸也是先上升后下降的趨勢(shì)。試驗(yàn)表明,氨氮急性脅迫造成黑鯛較強(qiáng)的應(yīng)激反應(yīng),皮質(zhì)醇在應(yīng)激反應(yīng)較明顯,是較好的應(yīng)激指標(biāo),但在氨氮濃度不高的情況下,各應(yīng)激指標(biāo)都會(huì)恢復(fù)到正常水平,說(shuō)明,黑鯛幼魚能夠逐漸地適應(yīng)其脅迫。 3.不同鹽度條件下氨氮對(duì)黑鯛幼魚生長(zhǎng)指標(biāo)的影響在水溫25℃,pH8.1的條件下,設(shè)定三個(gè)
6、鹽度(20,28,36)和三個(gè)氨氮濃度(0、5、10mg/ml總氨(非離子氨為:0、0.33、0.67mg/L),一共9組試驗(yàn)組,每組設(shè)三重復(fù),對(duì)黑鯛幼魚進(jìn)行為期30d的慢性氨氮脅迫,以研究氨氮暴露對(duì)黑鯛幼魚生長(zhǎng)指標(biāo)的影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示,同一鹽度條件下,隨著氨氮濃度的增加,黑鯛幼魚的增重率(WGR)有下降的趁勢(shì),而黑鯛幼魚的飼料系數(shù)也呈上升的趨勢(shì)。高氨氮濃度組的WGR與低濃度組有顯著性的差異。在鹽度28和36的低中高三個(gè)氨氮濃度之間的W
7、GR、SGR均無(wú)顯著性差異。高鹽度的10mg/ml氨氮濃度組FCR最高,為2.82,低鹽度組的未添加氨氮組FCR則最小,僅為2.12。此外,各處理組對(duì)黑鯛幼魚的體成分組成沒有顯著性差異(P>0.05)。結(jié)論,鹽度與氨氮之間對(duì)黑鯛幼魚生長(zhǎng)影響的交互作用不明顯。鹽度對(duì)黑鯛幼魚的增重系和特殊生長(zhǎng)率沒有顯著性影響,而氨氮對(duì)黑鯛幼魚的增重率、特殊生長(zhǎng)率和飼料系數(shù)均有顯著性影響。一般隨著鹽度、氨氮濃度的升高,其增重率、特殊生長(zhǎng)率會(huì)下降,飼料系數(shù)增加
8、。此外,兩者對(duì)黑鯛幼魚的體成分無(wú)顯著性影響。 4.不同鹽度條件下氨氮對(duì)黑鯛幼魚超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶活性的影響在水溫25℃,pH8.1的條件下,設(shè)定三個(gè)鹽度(20,28,36)和三個(gè)氨氮濃度(0,5,10mg/ml總氨,換算為非離子氨為:0、0.33、0.67mg/L),一共9組試驗(yàn),每組設(shè)三重復(fù),對(duì)黑鯛進(jìn)行為期30d的慢性氨氮脅迫,分別在氨氮暴露的第0、6、12、18、24、30d取樣以研究氨氮暴露對(duì)黑鯛超氧化物歧化酶(S
9、OD)與過(guò)氧化氫酶(CAT)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,低、中鹽度條件下,10mgTAN/L組隨著氨氮暴露時(shí)間的延長(zhǎng),其SOD活力呈先上升后下降的趨勢(shì),經(jīng)過(guò)30天的氨氮暴露后,各鹽度的三個(gè)氨氮組黑鯛幼魚肝臟中的SOD、CAT活力基本恢復(fù)到暴露前水平;在整個(gè)氨氮暴露過(guò)程中,各組氨氮處理的黑鯛幼魚的SOD活力變化沒有顯著性差異,同一氨氮濃度的不同暴露時(shí)間之間的SOD活力變化亦無(wú)顯著性差異。CAT活力的變化情況跟SOD相似,在低鹽度和中鹽度組中,5
10、mgTAM,和10mg TAN/L,的氨氮暴露脅迫,其CAT活力有先上升后下降的趨勢(shì),推測(cè)可能是低鹽和中鹽條件下,5mg TAN/L和10mg TAN/L的氨氮暴露促進(jìn)了黑鯛幼魚SOD和CAT酶的合成的緣故。直到黑鯛幼魚適應(yīng)后,其SOD和CAT活力就會(huì)恢復(fù)到正常水平,而高鹽度組,不能引起黑鯛有脅迫的興奮效應(yīng)。結(jié)論,氨氮和鹽度之間對(duì)黑鯛幼魚的SOD和CAT活性的影響無(wú)交互作用。在低氨氮濃度范圍應(yīng)激下,黑鯛幼魚肝臟SOD、CAT活性變化隨著
11、氨氮的升高而加快??赡苁前钡{迫刺激黑鯛免疫系統(tǒng)的應(yīng)答,從而使黑鯛幼魚更快地適應(yīng)所處的氨氮脅迫。 5.飼料中VC含量對(duì)黑鯛幼魚生長(zhǎng)及免疫力的影響以魚粉和酪蛋白為蛋白源,配制7組不同劑量維生素C的飼料(維生素C含量的添加量分別為:0,50,100,200,400,800,1600mg/kg飼料),在室內(nèi)飼養(yǎng)黑鯛幼魚(10.5±1.2 g)8周,對(duì)黑鯛幼魚進(jìn)行飼料維生素C需求和生長(zhǎng)指標(biāo)的研究,分析了肝臟中維生素C含量及肝臟中兩種抗氧
12、化酶活性的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,投喂8周后,添加維生素C飼料組能促進(jìn)黑鯛幼魚的增重率(WGR),特殊生長(zhǎng)率(SGR)及飼料系數(shù)(FCR),與無(wú)添加組具有顯著性差異(P<0.05)。8周后,200mg/kg組的黑鯛幼魚的WGR,SGR最大,F(xiàn)CR最小。無(wú)添加組(對(duì)照組)的生長(zhǎng)情況最差。肝臟中維生素C的含量隨著飼料中維生素的增加而增加,最后趨于穩(wěn)定,且添加維生素C的各組與無(wú)添加組有顯著性差異(P<0.05)。肝臟中的超氧化物歧化酶(SOD)、
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