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1、本實(shí)驗(yàn)采用瘤胃尼龍袋技術(shù)、體外胃蛋白酶-胰蛋白酶二步酶消化和體外培養(yǎng)技術(shù),研究葡萄糖處理大豆粕對(duì)奶牛過(guò)瘤胃蛋白、瘤胃發(fā)酵參數(shù)和小腸可吸收蛋白的影響,為有效利用植物性蛋白,探索新型飼料蛋白質(zhì)保護(hù)劑提供理論依據(jù)。 試驗(yàn):葡萄糖處理大豆粕對(duì)奶牛過(guò)瘤胃蛋白影響的研究 本試驗(yàn),選取4只體況良好、體重(700±50Kg)、胎次、泌乳期相近的中國(guó)荷斯坦奶牛,安裝永久性瘤胃瘺管,飼喂蛋白質(zhì)水平為15.14%,精粗比為47:53的日糧,本
2、章首先設(shè)計(jì)四部分單因素試驗(yàn),四部分單因素試驗(yàn)分別為:不同添加量葡萄糖處理大豆粕對(duì)奶牛過(guò)瘤胃蛋白的影響:不同溫度葡萄糖處理大豆粕對(duì)奶牛過(guò)瘤胃蛋白的影響:不同加熱時(shí)間葡萄糖處理大豆粕對(duì)奶牛過(guò)瘤胃蛋白的影響:不同含水量葡萄糖處理大豆粕對(duì)奶牛過(guò)瘤胃蛋白的影響。然后在單因素試驗(yàn)和前人研究基礎(chǔ)上篩選出適宜的因素水平,葡萄糖添加量分別為1%、3%、5%、7%;加熱溫度分別為85℃、100℃、115℃、130℃;加熱時(shí)間分別為30min、60min、9
3、0min、120min;含水量分別為15%、20%、25%、30%,進(jìn)行四因素四水平正交試驗(yàn),共16個(gè)處理,用尼龍袋法研究葡萄糖處理大豆粕對(duì)奶牛過(guò)瘤胃蛋白的影響。結(jié)果表明:葡萄糖加熱處理大豆粕可有效降低蛋白質(zhì)降解率,是一種很好過(guò)瘤胃保護(hù)方法;葡萄糖的添加量范圍1%~7%,溫度范圍85℃~130℃,時(shí)間范圍30min~120min,含水量15%~30%內(nèi)處理大豆粕均可有效降低蛋白質(zhì)的降解率;利用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)得到,葡萄糖添加量、溫度、加熱時(shí)
4、間、含水量四個(gè)因素均對(duì)蛋白質(zhì)降解率影響顯著;根據(jù)R值得到四個(gè)因素的影響順序?yàn)椋簻囟?加熱時(shí)間>添加量>含水量;隨著加熱溫度、加熱時(shí)間的延長(zhǎng)、葡萄糖添加量的增加,大豆粕DM降解率與瘤胃蛋白降解率都逐漸下降;隨著含水量的增加,DM降解率與瘤胃蛋白降解率先降低后增加,含水量20%時(shí)保護(hù)效果最好。 試驗(yàn)二:體外條件下葡萄糖處理大豆粕對(duì)奶牛瘤胃參數(shù)的影響 本試驗(yàn)研究在體外培養(yǎng)條件下,葡萄糖處理豆粕對(duì)瘤胃pH、氨氮、微生物蛋白的影響
5、。結(jié)果表明:葡萄糖處理組pH在6.28-7.18之間,從處理組與對(duì)照組在同一時(shí)間的pH變化來(lái)看,組間差異不顯著(P>0.05);處理組與對(duì)照組間氨氮濃度差異極顯著(P<0.01),從不同時(shí)間點(diǎn)來(lái)看,在體外培養(yǎng)2h時(shí),培養(yǎng)液NH3-N濃度均上升至最高點(diǎn),然后下降,隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加NH3-N濃度有上升的趨勢(shì),處理組低于對(duì)照組:從不同時(shí)間發(fā)現(xiàn)各組隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加后微生物蛋白的產(chǎn)量逐漸增加,處理組微生物蛋白產(chǎn)量低于對(duì)照組,但除在2h時(shí),兩組
6、微生物蛋白含量之間差異極顯著(P<0.01),4h兩組之間差異顯著(P<0.05)外,其余時(shí)間點(diǎn),兩組間差異不顯著(P>0.05)。 試驗(yàn)三:胃蛋白酶-胰蛋白酶體外消化豆粕適宜條件的研究 本試驗(yàn)研究得出在恒溫?fù)u床下用胃蛋白酶-胰蛋白酶消化豆粕的最適合條件為:在恒溫?fù)u床中,溫度為37℃,轉(zhuǎn)速85r/min,底物的量為0.5g,緩沖液pH為1.2,胃蛋白酶酶濃度為50mg/mL,錐形瓶中消化6h后,調(diào)節(jié)消化液的pH至7.5,
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