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1、分類號:TQ920密級:不保密學(xué)校代碼:10057研究生學(xué)號:12812517固定化酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉研究ResearchingonTheProductionofSodiumGluconatebyImmobn娩edEnzyme專業(yè)名稱:微生物與生化藥學(xué)(理)指導(dǎo)教師姓名:路福平教授研究生姓名:賀玉蘭申請學(xué)位級別:理學(xué)碩士論文提交日期:2015年6月論文課題來源:企業(yè)委托學(xué)位授予單位:天津科技大摘要葡萄糖酸鈉在食品、建筑、紡織染料等領(lǐng)域有
2、著廣泛的應(yīng)用,國內(nèi)外對其需求量逐年增加。酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉因其環(huán)境友好、經(jīng)濟節(jié)約,而越來越受到人們的青睞。但酶在實際應(yīng)用中也存在諸多缺陷,難以從反應(yīng)體系中回收,最終導(dǎo)致生產(chǎn)成本的提高。本文采用固定化酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉,通過研究不同固定化方法對酶固定化效果影響以及固定化酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉的工藝優(yōu)化,達到了葡萄糖酸鈉的經(jīng)濟高效生產(chǎn)。本文首先對戊二醛交聯(lián)法、海藻酸鈉包埋法、環(huán)氧樹脂共價法固定化效果進行研究,通過比較固定化酶的單位酶活、酶活回收
3、率,最終選擇環(huán)氧樹脂共價法作為酶固定化的方法。確定了固定化葡萄糖氧化酶(GOD)和固定化過氧化氫酶(CAT)的最佳固定化條件分別為:E洲19,加酶量10mL和O8mL;pH為65和60;磷酸鈉濃度均為10M;溫度為20℃和30℃;固定時間24h和32h。將GOD和CAT分別固定在環(huán)氧樹脂E叫上,并對其酶學(xué)性質(zhì)進行研究。研究了溫度、pH、金屬離子、儲存時間對酶和固定化酶活力的影響。固定化GOD的最適反應(yīng)溫度38℃,較游離酶分別提高6℃,最
4、適反應(yīng)pH為65比游離酶高05。60℃保溫1h,固定化GOD殘留酶活在80%以上,游離酶殘留酶活急劇下降至12%。Zn升對固定化GoD酶活性具有顯著的激活作用,cu2、A礦、Hg抑制酶活性。經(jīng)過7周的儲存之后,固定化GOD的殘留酶活保留了904%。固定化CAT和游離CAT的最適反應(yīng)溫度均為30℃,最適pH70,比游離酶高02。Zn2、Ca2、Cu2、Cr3對固定化CAT酶活性有抑制作用;Cu2對酶的抑制作用最強。固定化CAT儲存7周后剩
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