廣西水稻內(nèi)生細(xì)菌多樣性分析及對水稻紋枯病菌的拮抗作用測定.pdf

1、水稻紋枯病是廣西水稻生產(chǎn)中重要的病害之一，防治該病的主要措施是噴灑井崗霉素。井崗霉素的大量使用，造成病原菌的抗藥性，防治效果下降。利用有益微生物防治水稻紋枯病是目前該病防治研究的一個重要方向。本研究對廣西水稻內(nèi)生細(xì)菌的多樣性進(jìn)行分析，在此基礎(chǔ)上篩選對紋枯病菌有抑制作用的拮抗菌株，結(jié)果如下：
　　 1、從廣西稻區(qū)的晚稻68種水稻品種中采集了222個水稻標(biāo)樣，分離出1415株菌株，經(jīng)形態(tài)、生理生化測定和16s rDNA序列分析，這些

2、菌株分屬于5個屬：芽孢桿菌屬（Bacillus）、鞘胺醇單孢菌屬（Sphingomonas）、土壤桿菌屬（Agrobacterium）、伯克霍爾德氏菌屬（Burkholderia）和腸桿菌屬（Enterobacter）。其中，芽孢桿菌屬（Bacillus）和土壤桿菌屬（Agrobacterium）為主要類群。芽孢桿菌屬（Bacillus）在不同地區(qū)、不同水稻品種、不同的生育時期以及不同器官中的數(shù)量都占有絕對優(yōu)勢，為水稻內(nèi)生細(xì)菌的優(yōu)勢類群

3、。
　　 2、水稻內(nèi)生細(xì)菌的類群隨不同地區(qū)而異，如：博優(yōu)679水稻品種在桂西（百色）種植沒有分離出Sphingomonas和Burkholderia，而在桂北（河池）種植分離到了這兩種類群。
　　 3、水稻內(nèi)生細(xì)菌類群也隨不同水稻品種而異，如：在百色采集的標(biāo)樣中，Sphingomonas和Burkholderia存在于特優(yōu)273、特優(yōu)253和博優(yōu)228中，而博優(yōu)258、博優(yōu)679和特優(yōu)998中沒有發(fā)現(xiàn)這兩類細(xì)菌。

4、　　 4、水稻內(nèi)生細(xì)菌的類群和數(shù)量隨水稻植株不同器官而變化。如：種植在廣西大學(xué)農(nóng)場的柳沙油202號品種，植株的根部分離到Enterobacte，而葉鞘和葉組織分離不到這一細(xì)菌。水稻內(nèi)生細(xì)菌主要類群Bacillus和Agrobacterium在水稻不同器官中的數(shù)量，以根組織中含量最高（6.9×103 cfu/mL和8.0×103 cfu/mL），其次是鞘（4.0×103 cfu/mL和6.0×103 cfu/mL）和葉組織（2.3×10

5、3 cfu/mL和0）。
　　 5、水稻內(nèi)生細(xì)菌類群和數(shù)量也隨水稻不同生育期而變化。如：種植在廣西大學(xué)農(nóng)場的柳沙油202號品種，在孕穗期可分離到Burkholderia，而在其他生育期分離不到這類細(xì)菌；水稻內(nèi)生細(xì)菌Bacillus，Agrobacterium，Burkholderia和Enterobacter類群的數(shù)量，在苗期到孕穗期逐漸上升，從灌漿期到乳熟期下降。
　　 6、從375株水稻內(nèi)生細(xì)菌菌株中篩選出對水稻紋枯

6、病菌有拮抗作用的菌株69株，其中，B1693菌株對水稻紋枯病菌拮抗作用較強(qiáng)。經(jīng)形態(tài)、生理生化測定和16s DNA序列分析，B1693菌株被鑒定為巨大芽孢桿菌（Bacillus megaterium）。該菌株生長最適溫度為35℃，最適pH為7.0-8.0，能利用蔗糖、葡萄糖、甘露醇、甜醇、D-果糖和D-木糖等碳源和蛋白胨、酵母浸膏、牛肉浸膏、甘酪素等有機(jī)氮，硝酸鉀和硫酸銨等氮源。通過對B1693菌株的離體和盆栽防治效果測定，先接拮抗菌后接